茶叶中黄曲霉毒素检测方案(色谱纯)

       2012年安徽省马鞍山市中心医院肾内科报道了一个病例，一名患者每天喝10克普洱茶，喝了一个多月后，发生黄曲霉素中毒导致急性肝损害。      就在人们对茶叶安全问题尤为敏感时，一位著名科普作家发表了“关于喝普洱茶致癌”的文章，瞬间刷爆了朋友圈。      随后，某疾病预防控制中心研究人员抽查广州市场上普洱茶样品100%检测出黄曲霉素？同样，某知名大学，学者发表论文称100%检出黄曲霉？……       黄曲霉毒素，是臭名昭著的致癌物。其中，黄曲霉毒毒素B1是头号“危险分子”，具极强毒性，可引起致癌、致畸和致细胞突变的作用。仅需1毫克，就能诱发癌症，20毫克就能致死。      看到这里，有点怕怕，俺天天喝茶，茶叶中真的会有黄曲霉毒素吗？茶叶中到底有没有黄曲霉毒素？      “普洱茶是否致癌”引发了社会广泛关注。国家相关相关科研团队，对黄曲霉毒素相关检测方法是否适用于茶叶（包括普洱茶）检测进行了系统的实验验证，并得出结论：普洱茶中不含黄曲霉毒素，因为先前媒体报道中所采用的检测方法不适合茶叶，才导致错误检出了黄曲霉毒素。因此，经过大量的实验证明，正常的茶叶加工和生产过程中，几乎不会产生黄曲霉素。终于水落石出，原来正常的茶叶中是不含有黄曲霉毒素的。可还是有众多疑问无法解释，媒体报道的权威检测单位的检测结果为什么会出现假阳性？喝茶而导致的黄曲霉毒素中毒事件，黄曲霉毒素还有可能从哪里滋生呢？疑问1：茶叶中黄曲霉毒素检测为何会出现假阳性？目前检测茶叶中黄曲霉毒素，无相应的检测方法和标准，若参考使用国家食品安全标准《食品中黄曲霉毒素B族和G 族的测定》（GB5009.22-2016），然而这个国标的适用范围并不包括茶叶及其制品。茶叶中的茶多酚和茶色素等会干扰检测结果，茶多酚含量越高，检测出的黄曲霉素含量就越高，因此，容易产生假阳性结果。备注：《出口食品中黄曲霉毒素残留量的测定》（SN/T 3263-2012）已经作废疑问2：茶叶本身不含黄曲霉毒素，黄曲霉毒素还有可能从哪里滋生呢？茶叶与茶制品，尤其是发酵茶，在生产过程中有众多微生物的参与，存储时间比较长，生产存储过程等，都有可能存在黄曲霉毒素的污染。比如普洱茶，在湿仓贮藏中，由于高温高湿的条件，容易导致微生物的繁殖（包括黄曲霉），如果茶叶中残存营养物质，那么就容易滋生黄曲霉菌，进而产生黄曲霉素。“茶叶致癌事件”背后的思考虽轰动一时的茶叶致癌事件已尘埃落定，心中的石头总算落地，茶叶本身没有黄曲霉毒素，但是茶叶和茶叶制品，存储时间过长或不当的储存条件中，还是有可能存在黄曲霉毒素的污染。为科学严谨、安全规范地开展茶叶及茶制品中黄曲霉毒素B1的检测，由云南农业大学、吉林省产品质量监督检验院、云南省茶叶流通协会、湖南省茶叶学会、四川省茶叶流通协会等联合制定了团体标准《茶叶及茶制品中黄曲霉毒素 B1的测定》。纳鸥科技积极助力标准的制定，在标准的制定过程中，不断研发和测试各SPE复合小柱，用于去除茶叶中酚类和色素等干扰物。此标准填补了国内外茶叶中黄曲霉毒素检测的空白。全新制定的团体标准《茶叶及茶制品中黄曲霉毒素B1的测定》，为相关监管部门、企业、进出口茶叶海关等，进行茶叶及茶制品中黄曲霉毒素的监管和风险控制提供了方法、标准。茶叶中黄曲霉毒素检测的难点      茶叶中黄曲霉毒素测定标准的制定过程中，比较难的点是茶叶色素和酚类物质的干扰，尽管经过专属性很强的免疫亲和小柱的前处理，但前处理后的样品中仍有不少色素和酚类物质，特别是发酵茶，干扰了后续液相或液质仪器的检测，易出现假阳性。      因此，在制定标准过程中，迫切需求将茶叶中色素和酚类物质等去除掉。纳鸥科技技术团队，结合干扰物质的化学和结构特征，创新性研发出相应的茶叶复合小柱（Anavo 茶叶中黄曲霉毒素检测专用柱)，由PSA、C18 和 MCX 等填料复合而成，可有效去除色素和酚类干扰物，而不会吸附目标化合物。（货号：AN60F021）。使用Anavo 茶叶中黄曲霉毒素检测专用柱和Anavo免疫亲和柱过柱后，不同基质茶叶的回收率情况如下（具体实验过程，见标准原文）：说明：称取5 g三种不同种类茶叶试样，添加量分别为0.5 ng/mL（低）、1.0 ng/mL（中）、5.0 ng/mL（高）的黄曲霉毒素B1标准品进行6次的平行试验，试验数据为6次平行实验的平均值，三种茶叶黄曲霉毒素B1添加量为0.5 ng/mL（低）、1.0 ng/mL（中）、5.0ng/mL（高）时，回收率分别在72.42%～85.08%之间、76.06%～88.04%之间、85.22%～91.04%。此方法的回收率在72.42%～91.04%之间，相对标准偏差在1.14%～2.13%实验数据见上表。标准中关键耗材