茶叶中5种黄曲霉毒素检测方案(液相色谱柱)

DiAA reliabie partner for your lab 茶叶中5种黄曲霉毒素的检测解决方案 一直以来，普洱茶致癌的说法屡见报端，也有普洱茶中检出黄曲霉毒素的报道，这让消费者疑虑重重，甚至不敢喝普洱茶。 迪马科技开发的《茶叶中5种黄曲霉毒素的检测》方案： 1.采用固相萃取-UPLC-MS/MS法，可同时检测5种黄曲霉毒素，并能够达到准确定性定量； 2.ProElut AFT-4柱由多种吸附剂按照一定的比例分层填装而成，采用不同作用机理去除杂质，同时对黄曲霉毒素没有不可逆吸附，保证了样品的净化效果及回收率； 3.避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素回收率低和净化效果不好的弊端； 4. 商品化的成品柱，吸附剂稳定性好，不受外界环境因素影响，保证实验结果的重现性和准确性； 5.过柱过程操作步骤简单，节省时间，降低检测成本，提高工作效率。以下为详细解决方案，敬请参考! 茶叶中5种黄曲霉毒素的检测 1、适用范围 本方案适用于半发酵、全发酵和重发酵茶叶中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1的检测。本方法定量限是 5.0 pg/kg。 2、标准品配制 (1)储备液单标 目标物 浓度(ug/mL) 溶剂 AFTB1 20.0 甲苯 AFT B2 100.0 甲苯 AFT G1 50.0 甲苯 AFT G2 2.0 甲醇：苯(2：98) AFT M1 1.25 乙腈 (2)中间液混标100 pg/L， 乙腈溶剂 (3)添加水平：5.0 pg/kg， 100 pg/L 100 pL 3、样品制备 称取2.0g样品，加入20 mL 85%乙腈水，振荡2 min，超声 10 min，6000 rpm 离心2 min，收集上清液，取出5mL待净化。 4、净化—— ProElut AFT-4 6mL (Cat.#： 65934) a活 化： 依次加入5mL乙腈和5mL85%乙腈水，流出液去； b上 样： 将上样液加入柱中，收集流出液； c淋 洗： 用5 mL85%乙腈水淋洗，收集流出液； d重新溶解： 合并上样和淋洗步骤的流出液，在50℃下用减压蒸馏将洗脱液浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。 同方法制备基质匹配标准溶液 5、色谱条件 UPLC 条件： 色谱柱： Leapsil C18，， 100×2.1 mm， 2.7 p1m (Cat#： 86005) 流 速：0.3 mL/min 进样量： 5pL 柱温：40℃ 流动相： A： 0.1%甲酸水 B：乙腈+甲醇(1+1) 梯度设置 时间/Min. 0 6 7 12 A(%) 65 40 65 65 B(%) 35 60 35 35 质谱条件： 电离模式： ESI扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500V雾化气压力：50psi辅助气压力：50 psi气帘气压力：20 psi离子源温度：500℃ 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对(m/z)(母离子/子离子) 定量离子对(m/z)(母离子/子离子) 碰撞气能量/eV 去簇电压/V AFB1 313.0/241.0 313.0/241.0 51 78 313.0/285.0 51 AFB2 315.0/259.0 315.0/259.0 40 77 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 青岛：0532-83725230 石家庄：0311-66686220 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 西安：158-0293-5126 哈尔滨：180-4537-3042 315.0/287.0 40 AFG1 329.0/200.0 329.0/200.0 56 74 329.0/243.0 56 AFG2 331.0/189.0 331.0/189.0 60 61 331.0/313.0 60 AFM1 329.0/273.0 329.0/273.0 40 64 329.0/243.0 40 6、添加回收结果 茶叶中黄曲霉毒素检测(添加水平5 ug/kg)的添加回收结果(%) 基质 AFTB1 AFT B2 AFT G1 AFT G2 AFT M1 普洱 94.0 102.4 106.6 93.2 96.2 小叶红茶 96.0 99.2 87.2 108.4 87.6 大红袍 94.4 93.8 86.4 95.0 92.6 XIC of +MRM (11 pairs)： 313.000/241.000 DaID： AFB1-1 from Sample 15 (2... Max.1850.0 cps. 5种黄曲霉毒素标准品2.5 pg/L 的 MRM 色谱图 5种黄曲霉毒素标准品2.5 pg/L 的 TIC色谱图 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625沈阳：024-22943513青岛：0532-83725230石家庄：0311-66686220 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 西安：158-0293-5126 哈尔滨：180-4537-3042 黄曲霉毒素 M1 2.5 pg/L 的 XIC 色谱图 黄曲霉毒素 G2 2.5 pg/L的 XIC色谱图 XIC of+MRM (11 pairs)： 329.000/200.000 DaID：AFG1-1 from Sample 15 (2... Max. 1125.0 cps. 黄曲霉毒素 G1 2.5 pg/L 的 XIC色谱图 黄曲霉毒素B2 2.5 pg/L 的 XIC 色谱图 Max. 1850.0 cps. 黄曲霉毒素 B1 2.5 ug/L的 XIC 色谱图 茶叶中5种黄曲霉毒素的检测相关产品信息： 货号 名称 规格 样品前处理 65934 黄曲霉毒素检测专用固相萃取柱 ProElut AFT-4 6 mL， 30/pk 82O-COIAC1005 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱 3 mL， 25/pk 82O-COIAC1001 黄曲霉毒素总量(B1、B2、G1、G2)免疫亲和柱 1 mL，25/pk 82O-COIAC1004 黄曲霉毒素总量(B1、B2、G1、G2)免疫亲和柱 3 mL， 25/pk 244358 12管防交叉污染真空 SPE 萃取装置 12位 4803 1，3，6 mL 柱管通用连接器 15/pk 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm，0.22 um 100/pk 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 30040 FitMax针头式过滤器 Nylon 13 mm，0.45 um 100/pk 标准品 82O-S02017-1ML 黄曲霉毒素 B1(AFB1)[1162-65-8] 2 ug/mL 溶于乙腈，1mL 82O-S02018-1ML 黄曲霉毒素 B2(AFB2)[7220-81-7] 0.5 ug/mL 溶于乙腈，1 mL 82O-S02019-1ML 黄曲霉毒素 G1(AFG1)[1165-39-5] 2pg/mL 溶于乙腈，1mL 82O-S02020-1ML 黄曲霉毒素 G2(AFG2) [7241-98-7] 0.5 pg/mL 溶于乙腈，1 mL 82O-S02030-1ML 黄曲霉毒素M1(AFM1)[6795-23-9] 0.5 ug/mL溶于乙腈，1mL 色谱柱及保护柱 86005 UHPLC/HPLC兼容色谱柱 Leapsil C18 100×2.1 mm，2.7 pm HPLC 溶剂•缓冲盐离子对试剂 50101 乙腈 HPLC级 4L 50102 甲醇 HPLC级 4L 50144 甲酸 HPLC级 50 mL 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色(现货) 50孔 52401A 瓶架/白色(现货) 50 孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2 mL， 100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk H80465 HPLC 进样针 25pL 红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中 北京： 上海： 天津： 广州：都： 沈阳： 青岛： 石家庄：南： 重庆： 西安： 哈尔滨： 济南： 重庆： 西安： 哈尔滨： 标准品配制(1) 储备液单标目标物浓度(μg/mL)溶剂AFT B120.0甲苯AFT B2100.0甲苯AFT G150.0甲苯AFT G22.0甲醇：苯（2:98）AFT M11.25乙腈(2) 中间液混标100 μg/L，乙腈溶剂(3) 添加水平：5.0 μg/kg，100 μg/L 100 μL样品制备    称取2.0 g 样品，加入20 mL 85%乙腈水，振荡2 min，超声10 min，6000 rpm离心2 min，收集上清液，取出5 mL待净化。净化—— ProElut AFT-4  6 mL (Cat.#：65934)a活    化：依次加入5 mL乙腈和5 mL 85%乙腈水，流出液弃去；b上    样：将上样液加入柱中，收集流出液；c淋    洗：用5 mL 85%乙腈水淋洗，收集流出液；d重新溶解：合并b、c步骤流出液，50 ℃下用减压蒸馏将洗脱液浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1 mL。同方法制备基质匹配标准溶液色谱条件UHPLC 条件：色谱柱：Leapsil C18，100 × 2.1 mm，2.7 μm  (Cat#：86005)流  速：0.3 mL/min    进样量：5 μL   柱  温：40 ℃流动相： A：0.1%甲酸水    B：乙腈+甲醇（1+1）