谷物/饲料中伏马菌素检测方案(柱后衍生装置)

MA-252PICKERINGLABORATOIRIESTegent德祥谷物和饲料中伏马菌素的分析 MA-252 PICKERINGLABORATORIES 伏马菌素是由镰刀菌产生的天然真菌毒素。伏马菌素污染发生在世界各地的许多农产品中，特别是玉米。通常与干燥和炎热的天气，及随后的高湿度时期有关。在十多种伏马菌素中，伏马菌素FBlis是最普遍和最具毒性的，其次是FB2和FB3。伏马菌素被归类为对人类可能的致癌物，也会导致动物的健康问题，尤其是马和猪。FDA规定人类食品的伏马菌素 限值在2-4ug/g之间，非动物饲料的伏马菌素限值在5-100ug/g之间 由于伏马菌素没有发色团，也没有荧光，因此需要衍生化来达到所需的检测灵敏度。本研究建立了一种快速、灵敏的柱后衍生高效液相色谱法，能够在低至0.01ug/g的水平下分析谷物和动物饲料中的伏马菌素。 方法 分析条件 柱子：Ci8反向色谱柱，4.6*250mm 柱温：40℃ 流速：0.8ml/min 流动相：A：将1ml的甲酸加入到1L的去离子水中。B：甲醇 进样量：10-50ul 柱后衍生系统：Onyx PCX 或Vector PCX 加热反应器温度：65℃ 衍生试剂： 950mlGA104， 300mgs OPA， 2g Thiofluor 3ml 30% Brij35溶液 检测器：荧光检测器， 器x=335nm， 入em=440nm HPLC梯度 TIME (Min) Eluent A，% EluentB，% 0 45 55 2 45 55 9 30 70 14 10 90 16 10 90 16.1 45 55 22 45 55 样品提取和净化 免疫亲和纯化柱： FumonitestTM WB (Vicam)萃取液：水/甲醇(20/80)PBS溶液：用去离子水将 100mL 的10XPBS (Vicam， P/NC1113)稀释至1L 向 25g磨细的样品中加入 25g NaCl 和 50mL萃取溶液。高速混合5分钟，通过凹槽过滤器过过。取10 mL提取物，加入.40mL PBS溶液，混匀，通过微纤维过滤器过滤。将10mL|稀释的提取物装入免疫亲和柱，让溶液以约1-2滴/秒的流速通过。用10mL PBS溶液洗涤柱子，依次用1mL甲醇醇1ml去离子水洗脱。在氮气流下将溶液蒸发至近干，在1mL甲醇/水(50/50)中复溶。注入10-50uL样品，上机测试。 伏马菌素的分析 FB1 Found FB2 Found FB1 Spike FB2 Spike FB1 FB2 Sample in Sample in Sample Concentration Concentration Recoveries Recoveries 大麦 o ug/g 0 ug/g 0.2 ug/g 0.07 ug/g 92.3% 87.5% 蜀黍 0.04 ug/g 0.01 ug/g 0.2 ug/g 0.07 ug/g 85.4% 81.8% 红花种子 0 ug/g 0 ug/g 0.2 ug/g 0.07ug/g 92.0% 80.8% 玉米 0.17 ug/g 0.03 ug/g 0.4 ug/g 0.13 ug/g 91.7% 88.7% 燕麦 0 ug/g 0 ug/g 0.2 ug/g 0.07 ug/g 91.5% 83.3% 混合饲料 0.08 ug/g 0.02 ug/g 0.3 ug/g 0.1 ug/g 88.0% 80.6% 图3.大麦中加入0.2ug/g的FB1和0.07ug/g的FB2色谱图 图2.混合饲料中加入0.08ug/g的FB1和0.02ug/g的FB2色谱图 总部 香港九龙观塘巧明街100号友邦九龙大楼36楼3605室Tel： (852) 3910 1500 Fax： (852) 2758 3830 亚太地区 香港办事处 香港九龙观塘鸿图道14-16号DP 29， Dragon Parc 2 Villa， Nguyen Huu Tho志成工业大厦5楼全层Street， Phuoc Kien Commune， Nha Be District，Ho Chi Minh City.北区北京办事处西安办事处北京市东城区南竹竿胡同2号陕西省西安市长安区郭杜街道文苑中路银河SOHO D座50921室长安双创中心B座Tel： (010) 8232 7383 Fax：(010) 8232 9551东区上海办事处武汉办事处上海市长宁区天山路1717号湖北省武汉市东湖高新佳园路2号SOHO天山广场T2幢1002室 (200050)高科大厦18楼F1801(430074)Tel： (021) 5261 0159 Fax： (021) 5261 0122南区广州办事处长沙办事处广东省广州市黄埔区茅岗南路9号湖南省长沙市经济技术开发区向阳路1号鱼珠智谷A08-09(510730)金科时代中心3A-1904(410015)Tel： (020) 32568788 Fax： (020) 3256 8700海南办事处海南省海口市蓝天路7号华江大厦12B室(570203)昆明办事处云南省昆明市五华区北京路1079号欣都龙城4栋707室(650041)西区南宁办事处广西省南宁市市族大道141号成都办事处中鼎万象东方C座601室(530028)四川省成都市高新区都会路55号3单元25楼2506号重庆办事处重庆市渝北区新溉路保华大道仁安龙城国际1期1栋1单元20-9室(400020) 德祥集团旗下一站式科研用品采购平台 网址： www.smartlabhub.com.cn 邮箱： info@smartlabhub.com.cn 售后服务热线：400-006-9696   伏马菌素是由镰刀菌产生的天然真菌毒素。伏马菌素污染发生在世界各地的许多农产品中，特别是玉米。通常与干燥 和炎热的天气，及随后的高湿度时期有关。在十多种伏马菌素中，伏马菌素FBlis是最普遍和最具毒性的，其次是FB2和 FB3。伏马菌素被归类为对人类可能的致癌物，也会导致动物的健康问题，尤其是马和猪。FDA规定人类食品的伏马菌素 限值在2-4ug/g之间，非动物饲料的伏马菌素限值在5-100ug/g之间。  由于伏马菌素没有发色团，也没有荧光，因此需要衍生化来达到所需的检测灵敏度。本研究建立了一种快速、灵敏的 柱后衍生高效液相色谱法，能够在低至0.01ug/g的水平下分析谷物和动物饲料中的伏马菌素。