毛发中二甲基色胺等11种色胺类致幻剂检测方案(液质联用仪)

SSL-CA22-053Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-619 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn LC-MS/MS检测毛发中二甲基色胺等11种色胺类致幻剂含量 LCMSMS-619 摘要：本文建立了一种使用岛津液相色谱质谱联用仪测定毛发中二甲基色胺等11种色胺类致幻剂的定量分析方法。参照中华人民共和国司法行政行业标准 (SF/T 0065-2020)， 20 mg毛发样品加入1mL提取液(0.1%甲酸水溶液)后冷冻研磨，高速离心5 min， 取上清液过 0.22 um 滤膜后上机分析。分别考察了方法线性相关性、准确度和精密度性能。结果显示各分析物定量限均大于 0.0025 ng/mg，线相关系数R²均大于0.9932，方法准确度偏差在-4%~13%之间，保留时间 RSD 均小于0.78%，峰面积精密度 RSD 均小于7.96%，满足“SF/T0065-2020”检测标准要求。该方法分析速度快，灵敏度高，专属性强，前处理简单，可为相关从业人员提供参考。 关键词：司法检测 L-CMS/MS 色胺类致幻剂 二甲基色胺是我国精神药品管制目录中的第一类精神药品，属于色胺类新精神活性物质。色胺类致幻剂是一类含有色胺结构框架、具有致幻作用的化合物，服用后能使人产生致幻的作用。吸食后主要表现为躯体症状：眩晕、无力、震颤、恶心、困倦、皮肤感觉异常和视力模糊；感觉症状：物体的形状扭曲、颜色改变、注意力无法集中、自我感觉听力显著提高，少数情况下会出现感觉错乱；精神症状：情绪改变、紧张、时间感扭曲、无法表达自己的想法、人格解体、梦境般的感觉和视幻觉。 该类药物最早在北美洲的印第安人在宗教祭祀中使用，后因其使人产生欣快感而逐渐被滥用。长期使用这类致幻剂会使人出现精神症状，甚至成瘾而不能自拔。 新精神活性物质作为第三代毒品，每年新出现的物质类型正以稳定的增长速度不断增加，对国家禁毒防控工作带来了新的挑战。 本文参考中华人民共和国司法行政行业标准(SF/T0065-2020)，基于岛津LCMS-8050 平台建立了一种简单高效的液相色谱质谱法同时测定人毛发中11种色胺类致幻剂的含量。 20 mg毛发样品加入1mL提取液(0.1%甲酸水溶液)后冷冻研磨，高速离心5 min， 取上清液过0.22um 滤膜后上机，经 Shim-pack Velox SP-C18分离，单针分析时间 11 min， 实现11种色胺类致幻剂的含量测定，方法灵敏度、重现性和准确性均满足行业标准要求，可为相关从业人员提供参考。 1.1仪器 本实验使用岛津临床质谱 LCMS-8050，具体配置如下： 输液泵： LC-30AD 检测器： LCMS-8050 自动进样器：SIL-30AC 柱温箱： CTO-30A 系统控制器：CBM-20A 工作站软件： LabSolutions Version 5.81 表1 梯度洗脱程序 1.2分析条件 时间(min) A (%) B (%) 液相色谱条件 2.00 90 10 色谱柱： Shim-pack Velox SP-C18(50mm ×2.1mm ×1.8 um)， 4.00 75 25 货号：227-32001-02 6.00 75 25 流动相：A相-20mM乙酸铵+0.1%甲酸+0.5%乙腈 8.00 10 90 B相-乙腈 9.00 10 90 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为10% 9.01 90 10 时间程序见表1 11.00 90 10 流速：0.3mL/min 进样温度：15℃ 柱温：40℃ 进样量：5uL 质谱条件 离子化模式： ESI(+)加热气：空气10.0L/min雾化气氮气 3.0 L/min干燥气：氮气10.0 L/min 离子源温度：300℃ DL管温度：250℃ 加热模块温度：400℃ 扫描模式：多反应监测(MRM) 驻留时间：10ms MRM 参数：见表2 # 名称 前体离子>产物离子 Q1 Pre CE Q3 Pre 1 5-Meo-AMT 205.10>130.10 -15 -36 -25 2 5-Meo-MIPT 247.15>86.10 -17 -19 -17 3 5-OH-DIPT 261.20>160.30 -18 -22 -20 4 5-MEO-DIPT 275.20>174.00 -21 -20 -22 5 5-MEO-DMT 219.10>58.10 -23 -15 -10 6 5-MEO-DALT 271.15>159.05 -13 -31 -27 7 4-OH-MET 219.10>115.00 -10 -38 -30 8 4-OH-DIPT 261.10>160.00 -20 -25 -24 9 4-Acetoxy-DIPT 303.15>160.00 -14 -25 -24 10 DMT 189.10>58.00 -13 -15 -20 11 Psilocin 205.05>58.00 -14 -16 -24 1.3样品制备和前处理 1.3.1标准品信息 表3标准品信息 序号 化合物 线性范围(ug/mL) 校准曲线 5-甲氧基-2-甲基色胺 5-Meo-AMT 1137-04-8 2 5-甲氧基-N-甲基-N-异丙基色胺 5-Meo-MIPT 96096-55-8 5-羟基-N，N-二异丙基色胺 5-OH-DIPT 36288-76-3 4 5-甲氧-N，N-二异丙基色胺 5-MEO-DIPT 4021-34-5 5 5-甲氧基-N，N-二甲基色胺 5-MEO-DMT 1019-45-0 6 5-甲氧-N，N-二烯丙基色胺 5-MEO-DALT 928822-98-4 4-羟基-N-甲基-N-乙基色胺 4-OH-MET 77872-41-4 8 4- 羟基-N，N-二异丙基色胺 4-OH-DIPT 132328-45-1 9 4-乙酰氧基-N，N-二异丙基色胺 4-Acetoxy-DIPT 936015-60-0 10 N，N-二甲基色胺 DMT 61-50-7 11 赛洛新 Psilocir 520-53-6 1.3.2样本制备 (1)校准品：使用20%乙腈水溶液稀释11种色胺类新精神活性物质混标工作液，制得0.01~2 ng/mL浓度的校准品溶液。 (2)质控品：称取空白毛发样品 20 mg两份，1份作为阴性质控品，1份作为阳性质控品，阳性质控品中加入10 pL 10 ng/mL 的11种色胺类新精神活性物质的混标工作液，得到0.005 ng/mg添加浓度。 表4 校准品&质控品浓度信息) # 名称 校准品(ng/mL) 质控品(ng/mg) STD1 STD2 STD3 STD4 STD5 STD6 Negative Positive 1 5-Meo-AMT 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 2.00 0.000 0.005 2 5-Meo-MIPT 0.01 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 0.000 0.005 3 5-OH-DIPT 0.01 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 0.000 0.005 4 5-MEO-DIPT 0.01 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 0.000 0.005 5 5-MEO-DMT 0.01 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 0.000 0.005 6 5-MEO-DALT 0.01 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 0.000 0.005 7 4-OH-MET 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 2.00 0.000 0.005 8 4-OH-DIPT 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 2.00 0.000 0.005 9 4-Acetoxy-DIPT 0.01 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 0.000 0.005 10 DMT 0.01 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 0.000 0.005 11 Psilocin 0.05 0.10 0.20 0.50 1.00 2.00 0.000 0.005 1.3.3样本前处理 (1)质控品前处理：取上述阴性和阳性质控品20 mg于2mL研磨管中，加研磨珠适量，再加入0.1%甲酸水提取溶液1mL，液氮冷冻研磨，14000×g离心5 min， 取上清液，过0.22 um 滤膜， 5 uL进样分析。 实验结果 2.1线性关系 使用6个标准浓度的校准品分析测定质控品，外标法定量，得到校准曲线相关系数、线性范围和校准品准确度见表5。 表5 标准曲线参数(1/C加权) # 名称 相关系数 R2 线性范围(ng/mL) 准确度(%) 1 5-Meo-AMT 0.9932 0.05~2 88.4~109.9 2 5-Meo-MIPT 0.9981 0.01~1 93.5~111.3 3 5-OH-DIPT 0.9974 0.01~1 92.7~110.7 4 5-MEO-DIPT 0.9993 0.01~1 90.0~106.0 5 5-MEO-DMT 0.9992 0.01~1 87.7~106.8 6 5-MEO-DALT 0.9992 0.01~1 92.9~109.0 7 4-OH-MET 0.9965 0.05~2 88.4~108.4 8 4-OH-DIPT 0.9983 0.05~2 89.5~111.8 9 4-Acetoxy-DIPT 0.9967 0.01~1 91.8~104.9 10 DMT 0.9984 0.01~1 94.9~104.9 11 Psilocin 0.9988 0.05~2 94.5~105.9 2.2精密度实验 分别对低浓度和高浓度的校准品进行6次重复测定，保留时间精密度相对标准偏差范围分别为 0.28%~0.78%(STD2)和0.25%~0.70%(STD6)，峰面积精密度相对标准偏差范围分别为2.57%~7.96%(STD2)和3.28%~7.78%(STD6)，满足方法要求，数据结果见附录表6。 表6 精密度测试结果 # 名称 STD2 STD2 STD6 STD6 保留时间%RSD 峰面积%RSD 保留时间%RSD 峰面积%RSD 5-Meo-AMT 0.78 6.55 0.52 4.33 2 5-Meo-MIPT 0.39 2.69 0.35 3.28 3 5-OH-DIPT 0.69 7.96 0.45 4.54 4 5-MEO-DIPT 0.64 7.09 0.61 4.14 5 5-MEO-DMT 0.31 3.53 0.25 4.80 6 5-MEO-DALT 0.57 2.57 0.62 5.62 7 4-OH-MET 0.73 5.60 0.70 5.90 8 4-OH-DIPT 0.36 6.22 0.25 5.38 9 4-Acetoxy-DIPT 0.28 7.74 0.44 3.41 10 DMT 0.66 3.19 0.56 6.76 11 Psilocin 0.74 6.23 0.53 7.78 2.3准确度实验 分别检测阴性和阳性质控品，，计算准确度偏差，结果表明11种色胺类新精神活性物质准确度偏差为-5%~13%，满足检测要求，数据结果见附录表7. 准确度测试结果 # 名称 阴性质控实测浓度 阳性质控理论浓度 阳性质控实测浓度 阳性质控准确度偏差 (ng/mg) (ng/mg) (ng/mg) (%) 1 5-Meo-AMT N.D. 0.005 0.0053 6 2 5-Meo-MIPT N.D. 0.005 0.0048 -4 3 5-OH-DIPT N.D. 0.005 0.0055 9 4 5-MEO-DIPT N.D. 0.005 0.0054 7 5 5-MEO-DMT N.D. 0.005 0.0054 8 6 5-MEO-DALT N.D. 0.005 0.0050 -1 7 4-OH-MET N.D. 0.005 0.0057 13 8 4-OH-DIPT N.D. 0.005 0.0057 13 9 4-Acetoxy-DIPT N.D. 0.005 0.0048 -5 10 DMT N.D. 0.005 0.0052 3 11 Psilocin N.D. 0.005 0.0051 *N.D. 表示低于定量限 2.4定量下限色谱图 No.6_5-MEO-DALT(0.01ng/mL) No.7_4-OH-MET (0.05ng/mL) No.8_4-OH-DIPT(0.05 ng/mL) No.9_4-Acetoxy-DIPT(0.01 ng/mL) No.10_DMT (0.01 ng/mL) No.11_Psilocin(0.05 ng/mL) 结论 建立了一种使用岛津质谱 LCMS-8045测定毛发中11种色类类致幻剂的定量分析方法。利用蛋白沉淀的前处理方法，外标法建立标准曲线，线性范围涵范“SF/T 0065-2020”标准要求，分别考察了方法的线性、准确度和精密度性能。结果显示各分析物线相关系数R2 均大于0.9932，方法准确度偏差在-4%~13%之间，保留时间 RSD 均小于0.78%，峰面积精密度 RSD 均小于7.96%， 满足“SF/T 0065-2020”检测标准要求。 岛津应用云 建立了一种使用岛津质谱LCMS-8045测定毛发中11种色胺类致幻剂的定量分析方法。利用蛋白沉淀的前处理方法，外标法建立标准曲线，线性范围涵盖“SF/T 0065—2020”标准要求，分别考察了方法的线性、准确度和精密度性能。结果显示各分析物线相关系数R2均大于0.9932，方法准确度偏差在-4%~13%之间，保留时间RSD均小于0.78%，峰面积精密度RSD均小于7.96%，满足“SF/T 0065—2020”检测标准要求。