食品中磺胺类药物检测方案(其它色谱仪)

磺胺类药物的多种检测方法 磺胺类药物为人工合成的抗菌药，它具有抗菌谱较广、性质稳定、使用简便、生产时不耗用粮食等优点。 根据《GB 31650-2019食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》中规定磺胺类药物在食品中最大残留量如下： 下面列举几种检测方法 参考标准：《农业部958号公告-12-2007 水产品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱法》 提取步骤 虾仁（去壳，搅碎） 精密称取 5g样品于 50mL 离心管中,加入 25mL 乙酸乙酯，再加入5g无水硫酸钠，涡旋 2min ,超声10min，3000r / min 离心 10min ,收集上清液于100mL旋转蒸发瓶中,再重复使用 25mL 乙酸乙酯溶液提取 1次,合并2 次上清液，于30°水浴中减压至近干，用1mL甲醇和2mL1%乙酸水超声溶解残渣，转入50mL离心管中，再用2mL1%乙酸水溶解残渣，转入离心管。向离心管中加入8mL正己烷，涡旋1min，3000r / min 离心5min，弃去上层正己烷层，在加入8mL正己烷重复操作，向下层加水6mL混匀待净化。 SPE净化步骤 SPE柱：月旭Welchrom® BRP规格： 60mg/3mL 活化：3mL甲醇 ，6mL水平衡，弃去 上样：待净化液全部上样，弃去 淋洗：3mL水，2mL 5%甲醇水，弃去 洗脱：15mL甲醇洗脱，压干收集 浓缩：合并收集液于旋蒸瓶中，30°C下旋近干，并用5%甲醇水复溶，定容到1mL，过0.22 μm有机滤头，上机 色谱条件 色谱柱：月旭Ultimate® ODS-3 4.6×250mm,5μm 流动相：A-乙腈，B-甲醇，C-2%乙酸水（梯度） 流速：0.6mL/min 柱温：40℃ 进样量：20μL 检测波长：270nm 时间 %A %B %C 0.000 5.0 10.0 85.0 15.000 5.0 10.0 85.0 30.000 20.0 10 70.0 45.000 20.0 10 70.0 45.100 5.0 10.0 85.0 55.000 5.0 10.0 85.0 图1、 虾仁样加标50μg/kg图谱 表1.加标回收率表 名称 加标水平μg/kg 平均回收率% RSD%（n=2） 磺胺嘧啶 50 99 3.72 磺胺噻唑 86 3.86 磺胺甲基嘧啶 89 2.35 磺胺5-甲氧嘧啶 72 4.35 磺胺二甲基嘧啶 75 4.51 磺胺甲氧哒嗪 91 2.89 磺胺6-甲氧嘧啶 82 5.35 磺胺甲基异恶唑 81 4.92 磺胺多辛 64 4.71 磺胺异恶唑 84 4.54 磺胺二甲氧哒嗪 93 3.66 参考标准：《GB29694-2013 动物性食品中13种磺胺类药物多残留的测定 》 提取步骤 分别称取鸡肝（搅碎）、猪肉（搅碎）5 g±0.05 g，于50 mL聚四氟乙烯离心管中，加乙酸乙酯20 mL，涡动2 min，4 000 r/min 离心5 min，取上清液于100 mL鸡心瓶中，残渣中加乙酸乙酯20 mL，重复提取一次，合并两次提取液。 鸡心瓶中加0.1 mol/L盐酸溶液4 mL，于40℃下旋转蒸发浓缩至少于3 mL，转至15mL离心管中。用0.1 mol/L盐酸溶液2 mL洗鸡心瓶，转至同一离心管中。再用正己烷3 mL洗鸡心瓶，将正己烷转至同一离心管中，涡旋混合30 s，3000 r/min离心5 min，弃正己烷。再次用正己烷3 mL洗鸡心瓶，转全同一离心管中，涡旋混合30s，3000 r/min离心5 min，弃正己烷，取下层净化液备用。 SPE 净化步骤净化 SPE柱：月旭Welchrom® P-SCX规格：60mg/3mL 活化：甲醇2 mL，0.1 mol/L盐酸溶液2 mL，弃去； 上样：净化液全部上样，弃去； 淋洗：0.1 mol/L盐酸溶液1 mL，50%甲醇乙腈溶液2 mL，弃去； 洗脱：4mL 5%氨水甲醇，压干，接收。 洗脱液在40℃下氮吹至干，准确加入1mL0.1%甲酸乙腈溶液1.0 mL，涡旋溶解，过0.22μm有机微孔滤膜，待测。 色谱条件 色谱柱：月旭Ultimate®ODS-3 4.6*250mm，5μm 流动相：A-乙腈，B-0.1%甲酸水（梯度） 流速：1.000mL/min 柱温：30℃ 进样量：20μL 检测波长：270nm 时间 %A %B 0.000 17.0 83.0 5.000 17.0 83.0 10.000 20.0 80.0 22.300 40.0 60.0 22.400 90.0 10.0 30.000 90.0 10.0 31.000 17.0 83.0 48.000 17.0 83.0 图2.鸡肝样品样加标50μg/kg图谱 名称 平均回收率 Rsd（N=2） 磺胺醋酰 75.97% 1.94% 磺胺吡啶 98.86% 3.90% 磺胺甲基嘧啶 94.10% 3.17% 磺胺甲氧哒嗪 95.89% 0.82% 磺胺间甲氧嘧啶 97.65% 1.87% 磺胺氯哒嗪 96.10% 4.88% 磺胺甲基异恶唑 89.06% 2.66% 磺胺异恶唑 89.26% 2.17% 苯甲酰磺胺 88.40% 3.12% 磺胺二甲基嘧啶 96.16% 1.93% 表2.样加标50μg/kg回收率表 图3、猪肉样加标40μg/kg图谱 表3.加标回收率表 名称 加标水平μg/kg 平均回收率% RSD%（n=2） 磺胺甲基嘧啶 40 91 3.68 磺胺二甲基嘧啶 94 2.45 磺胺甲氧哒嗪 88 0.92 磺胺间甲氧嘧啶 92 3.45 磺胺氯哒嗪 82 3.47 磺胺异恶唑 73 4.18 磺胺二甲氧哒嗪 89 2.04 以上几种方法，都能满足《GB 31650-2019食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》要求，且加标回收率在64%~99% 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:上海市松江区明南路85号启迪漕河泾（中山）科技园.紫荆园10号楼 邮编：201600 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168号 邮编：321000 Tel:400-810-6969 E-mail:lingyuyu @welchmat.com 虾仁（去壳，搅碎）精密称取 5g样品于 50mL 离心管中,加入 25mL 乙酸乙酯，再加入5g无水硫酸钠，涡旋 2min ,超声10min，3000r / min 离心 10min ,收集上清液于100mL旋转蒸发瓶中,再重复使用 25mL 乙酸乙酯溶液提取 1次,合并2 次上清液，于30°水浴中减压至近干，用1mL甲醇和2mL1%乙酸水超声溶解残渣，转入50mL离心管中，再用2mL1%乙酸水溶解残渣，转入离心管。向离心管中加入8mL正己烷，涡旋1min，3000r / min 离心5min，弃去上层正己烷层，在加入8mL正己烷重复操作，向下层加水6mL混匀待净化。