水质中多环芳烃检测方案(液相色谱仪)

文件号： FLYQ-AD-FA-02浙江福立分析仪器股份有限公司应用中心 水质中16种多环芳烃的测定液液萃取高效液相色谱法 -C18色谱柱 一、检测方法： 依据国家标准：水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法(HJ478-2009) 二、方法提要 用正己烷萃取水中多环芳烃 (PAHs)，萃取液经硅胶柱净化，用二氯甲烷和正己烷的混合溶剂洗脱，洗脱液浓缩后，用具有紫外检测器的高效液液色谱仪分离检测。 三、试剂和材料 3.1乙腈 (CH3CN)：液相色谱纯。 3.2甲醇(CH3OH)：液相色谱纯。 3.33二二氯甲烷 (CH2CI2)：液相色谱纯。 3.4正己烷(C6H14)：液相色谱纯。 3.5硫代硫酸钠(Na2S2O3.5H2O)。 3.6无水硫酸钠(Na2SO4)：在400℃下烘烤2h，冷却后，贮于磨口玻璃瓶中密封保存。 3.7氯化钠(NaCI)：在400℃下烘烤 2h， 冷却后，贮于磨口玻璃瓶中密封保存。 3.8水：纯净水。 四、仪器和装置 4.1高效液相色谱仪：福立LC5090高效液相色谱仪，配备 LC5090 在线脱气机、LC5090二元高压输液泵、LC5090自动进样器、LC5090 柱温箱、LC5090 双波长-紫外检测器。 4.2色谱柱：Sunniest C18色谱柱，，4.60 mm*250 mm， 粒径为5.0 um。 4.3一次性注射器。 4.4针头过滤器：0.45 um 有机滤膜。 4.5抽滤瓶。 4.6真空 4.7微孔滤膜 0.45 um。 4.8超声清洗仪。 4.9硅胶柱：1000 mg/6.0 ml。 4.10采样瓶：：1L或2L具磨口塞的棕色玻璃细口瓶。 4.11分液漏斗：2000ml，玻璃活塞不涂润滑油。 4.12浓缩装置：旋转蒸发仪。 4.13液液萃取净化装置。 4.141-一般实验室常用仪器。 五、实验 5.1标准系列配置 5.1.1多环芳烃标准贮备夜：质量浓度为 200 mg/L 含十六种多环芳烃的乙腈溶液，包括萘、、二氢、芴、菲、蒽、荧蒽、魂、、苯并[a]并、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、茚并[1，2，3-cd]芘、二苯并[a，h]蒽、苯并[ghi]花。贮备液于4℃下冷藏。 5.1.2多环芳烃标准使用液：取 1.0mL 多环芳烃标准贮备液于 10mL 容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，该溶液中含多环芳烃20.0 mg/L。在4℃以下冷藏。 5.1.3十氟联苯 (Decafluorobiphenyl)：纯度：99%，样品萃取前加入，用于跟踪样品前处理的回收率。 5.1.4十氟联苯标准贮备液：称取十氟联苯(5.1.3)0.025g，准确到1mg，于25ml容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，该溶液中含十氟联苯 1000ug/mL。在4℃以下冷藏。 5.1.5十氟联苯标准使用溶液：取1.0mL十氟联苯标准贮备溶液(5.1.4)于25ml容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，该溶液中含十氟联苯 40ug/mL。在4℃以下冷藏。 5.1.6标准系列：取定定量多环芳烃标准使用液(5.1.2)和十氟联苯标准使用液支(5.1.5)于乙腈中，制备至少5个浓度点的标准系列，多环芳烃质量浓度分别为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0ug/mL，贮存在棕色小瓶中，于冷暗处存放。 5.2羊品制备 5.2.1样品的采集：样品必须采集在预先洗净烘干的采样瓶中，采样前不能用水样预洗采样瓶，以防止样品的沾染或吸附。采样瓶要完全注满，不留气泡。若水中有残余氯存在，要在每升水中加入80mg 流代硫酸钠除氯。 5.2.2样品的保存：样品采集后应避光于4℃以下冷藏，在7d内萃取，萃取后的样品应避光于4℃以下。 5.2.3萃取：摇匀水样，量取1000mL水样(萃取所用水样体积根据水质情况可适当增减)倒入2000 mL 的分液漏斗中，加入30g氯化钠，加入 100 uL十氟联苯标准使用溶液(5.1.5)，50mL 正己烷，振摇 5 min， 静置 5min 分层，再通过轻微的振摇使富集在分液漏斗内 壁的正己烷液滴上浮，分别收集下层水样与有机相，收集的有机相放入250mL具塞锥形接收瓶中，用有机相充分润洗分液漏斗并入接收瓶中，润洗体积不得少于30mL。再将水样重新倒入分液漏斗中，分别用50mL正己烷重复萃取两遍，合并有机相，往接收瓶加入无水硫酸钠至有流动的无水硫酸钠存在。放置 30 min， 脱水干燥。 5.2.4浓缩：将具塞锥形接收瓶的有机相转移至浓缩瓶中，以不少于20mL的有机相分3次润洗锥形接收瓶并入浓缩瓶中。设置旋转蒸发仪参数温度40℃，转速中等，配合真空泵抽真空。用旋转蒸发仪浓缩至0.5~1.0ml， 加入 3ml乙青，再浓缩至0.5mL 以下，最后准确定容到1.0mL 容量瓶中，过0.45 um 有机滤膜，待测。 5.3分析结果 5.3.116种多环芳烃混合标准溶液典型谱图及结果(5.0ug/mL) 1.萘2.二氢3.芴 4.5.菲 6.蒽7.十氟联苯 8.荧蒽9.芘10.11.苯并[a]蒽12.苯并[b]荧蒽13.苯并[k]荧蒽14.苯并[a]芘15.二苯并[a，h]蒽16.苯并[g，h，i]芘17.茚并[1，2，3-cd]芘 5.3.216种多环芳烃混合标准溶液六针重复性谱图(5.0 ug/mL) 圈 [min] 5.3.3标准曲线 标准曲线的绘制：分别进样浓度为 0.1 ug/mL、0.5 ug/mL、1.0 ug/mL、5.0 ug/mL、10.0 ug/mL的标准系列各10uL， 进行 HPLC 分析。然后以峰面积为纵坐标，以目标物的含量为横坐标，绘制标准曲线。 5.3.4检出限叠加谱图 5.3.5样品典型谱图及结果 分析结果表 峰序 组分名 保留时间 峰高 峰面积 含量 min| uAU uAU*s Lug/L」 1 萘 7.744 452.9 4483.1 0.0154 芴 11.412 1459.4 24037.2 0.5584 十氟联苯 15.552 2746.0 53615.5 2.6677 4658.3 82135.8 3.2415 5.3.6样品加标典型谱图及回收率 六、实验结果 方法验证结论：16种多环芳烃的精密度、线性相关系数、检出限、回收率结果及十氟联苯回收率汇总如下： 方法验证汇总表 化合物 保留时间 RSD(%) 峰面积RSD)(%) 标准曲线线性相关系数 检出限(ug/L) 加标回收率范围(%) 萘 0.026 0.246 0.99937 0.0014 67.02~75.51 二氢苊 0.032 0.265 0.99960 0.0016 80.40~82.01 芴 0.035 0.194 0.99963 0.0020 75.04~95.79 造 0.031 0.280 0.99961 0.0006 75.58~80.21 菲 0.038 0.249 0.99961 0.0010 89.52~92.69 蒽 0.042 0.303 0.99912 0.0010 78.76~81.1 荧蒽 0.044 0.264 0.99967 0.0020 89.52~94.43 芘 0.045 0.228 0.99964 0.0028 94.13~94.72 0.045 0.211 0.99960 0.0020 94.45~101.95 苯并[a]蒽 0.043 0.188 0.99971 0.0028 88.92~104.92 苯并[b]荧蒽 0.026 0.285 0.99969 0.0016 82.36~94.86 苯并[k]荧蒽 0.023 0.294 0.99967 0.0010 76.51~94.71 苯并[a]芘 0.020 0.338 0.99967 0.0012 86.27~93.69 二苯并[a，h]蒽 0.019 0.285 0.99959 0.0012 95.25~98.48 苯并[ghi]芘 0.020 0.298 0.99970 0.0012 91.38~100.35 茚并[1，2，3-cd]芘 0.021 0.330 0.99969 0.0014 98.42~106.63 十氟联苯 - - - 一 51.61~59.00 由以上实验结果可知，采用福立 LC5090 测定水质中16种多环芳烃，方法稳定可靠，，目标物线性范围良好，灵敏度较高，有很好的重现性，能够对样品进行准确定性定量。 用正己烷萃取水中多环芳烃（PAHs），萃取液经硅胶柱净化，用二氯甲烷和正己烷的混合溶剂洗脱，洗脱液浓缩后，用具有紫外检测器的高效液相色谱仪分离检测。1.萘 2.二氢苊  3.芴  4.苊  5.菲  6.蒽  7.十氟联苯　8.荧蒽 9.芘  10.䓛 11.苯并[a]蒽 12.苯并[b]荧蒽 13.苯并[k]荧蒽 14.苯并[a]芘 15.二苯并[a,h]蒽 16.苯并[g,h,i]芘 17.茚并[1,2,3-cd]芘 图1 16种多环芳烃标样5.0μg/mL典型谱图图2 16种多环芳烃标样5.0μg/mL重复性谱图1.萘  2.芴 3.十氟联苯图3 某水样测定谱图结果分析：样品中检出萘0.0154μg/L、芴0.5584μg/L图4 样品加标谱图