茶叶中黄曲霉毒素总量检测方案(恒流泵)

青岛普瑞邦生物工程有限公司Pribolab PTE.LTD.致力于食品安全每一天Devoted to Food Safety Every Day普瑞邦(青岛)：0532-84670748普瑞邦(技术部)：13311409196地址：山东省青岛市高新区广博路17号MAX商务红湾21号楼普瑞邦官网： www.pribolab.com服务热线：400-6885349 茶叶中黄曲霉毒素检测方案 针对茶叶复杂基质，参考【GB 5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定】，建议实验过程如下： 1检测方法 1.1第一法(液相色谱法-串联质谱法) 黄曲霉毒素混合标准工作液： AFB1： AFB2： AFG1： AFG2为1：0.3：i： 1： 0.3ug/mL 黄曲霉毒素混合同位素内标工作液：：AFB1： AFB2： AFG1： AFG2 为 0.5 ug/mL 称取5g试样(根据样品吸水性可调整) +50uL 混合标准工作液+40uL 混合同位素内标工作液+84%乙腈20mL→振荡 30min→离心 10min(离心速度 4000r/min)→取上清液 4mL过 PriboFast@MFC160/260 固相净化柱→取 2mL净化液+16mL吐温 PBS 稀释→将全部稀释液通过 PriboFastQAFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL 水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用0.5mL 流动相复容→微孔滤膜(0.22um)滤过，取续滤液上机。 1.2第二法(液相色谱法) 黄曲霉毒素混合标准工作液： AFB1： AFB2： AFG1： AFG2 为1： 0.3：：1：0.3ug/mL 称取 5g试样+50uL混合标准工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心10min(离心速度4000r/min)→取上清液4mL 过 PriboFastQMFC160/260 固相净化柱→取 2mL 净化液+16mL吐温 PBS 稀释→将全部稀释液通过PriboFastQAFT 免疫亲和柱→先用 10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL 甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用0.5mL 流动相复容→微孔滤膜(0.22um)滤过，取续滤液上机。 样品来源：检测样品库中，选取红茶、绿茶各一种有代表性的茶叶，分别做两种方法的本底和加标平行。 茶叶中黄曲霉毒素检测方案 针对茶叶复杂基质，参考【GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定】，建议实验过程如下：1检测方法 1.1 第一法（液相色谱法-串联质谱法） 黄曲霉毒素混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.3：1：0.3ug/mL黄曲霉毒素混合同位素内标工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为0.5 ug/mL称取 5g试样（根据样品吸水性可调整）+50uL混合标准工作液+40uL混合同位素内标工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液4mL过PriboFast®MFC160/260固相净化柱→取2mL净化液+16mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用0.5mL流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液上机。 1.2 第二法（液相色谱法） 黄曲霉毒素混合标准工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2为1：0.3：1：0.3 ug/mL称取 5g试样+50uL混合标准工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液4mL过PriboFast®MFC160/260固相净化柱→取2mL净化液+16mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用0.5mL流动相复容→微孔滤膜（0.22μm）滤过，取续滤液上机。 样品来源：检测样品库中，选取红茶、绿茶各一种有代表性的茶叶，分别做两种方法的本底和加标平行。