茶叶中茶氨酸含量检测方案

参考 GB/T 23193-2017 采用 TSKgel 色谱柱测定茶叶中茶氨酸 【基本信息】 茶氨酸(L-Theanine) 是茶叶中特有的游离氨基酸，茶氨酸是谷氨酸y-乙基酰胺，有甜味。茶氨酸含量因茶的品种、部位而变动。茶氨酸在干茶中占重量的1%-2%。茶氨酸在化学构造上与脑内活性物质谷酰胺、谷氨酸相似，是茶叶中生津润甜的主要成份。茶氨酸含量约为新茶的1%~2%左右，其含量随发酵过程减少。 【溶液的配制】 色谱流动相配制：水，100%乙腈 标准曲线配制：称取少量L-茶氨酸标准品，用水溶解并稀释至 0.01 mg/mL、0.02 mg/mL、0.5mg/mL、0.1 mg/mL、0.15 mg/mL、0.2 mg/mL。 待测样品配制：制取0.1g左右茶叶，加入10 mL水，100℃水浴浸提 30 min， 经0.45 um 滤膜过滤后进样。 【分析条件】 仪器： Thermo Ultimate 3000 色谱柱： TSKgel ODS-100V(4.6 mm I.D.x25 cm， 5 um) 流速： 0.8mL/min 柱温： 35°℃ 样品盘温度：10℃ 进样量：20uL 检测器：UV@210nm 梯度： 水/% 乙腈/% 0 100 0 10 100 0 12 20 80 20 20 80 22 100 0 40 100 0 【分析结果】 图11茶氨酸标准品的色谱图(0.2mg/mL) 名称 保留时间(min) 不对称因子As 分离度 理论塔板数 茶氨酸 5.848 1.09 - 17789 图2 茶叶提取液的色谱图 峰序号 名称 保留时间(min) 不对称因子As 峰面积 理论塔板数 1 茶氨酸 5.850 1.04 16.0497 19256 茶叶实际称重 0.1054g， 加水 10.6023 g，根据提取液中峰面积数值，计算得提取液中茶氨酸的浓度为 0.1212 mg/mL，则茶叶中茶氨酸的含量为 0.1212*10.6023/1000/0.1054*100%=1.219% 【结论】 使用TSKgel ODS-100V (4.6 mm I.D.x25 cm， 5 um) 对茶氨酸作标准曲线，其线性关系良好，可满足 GB/T 23193-2017中的要求。 茶氨酸 (L-Theanine) 是茶叶中特有的游离氨基酸。茶氨酸在化学构造上与脑内活性物质谷酰胺、谷氨酸相似，是茶叶中生津润甜的主要成份。茶氨酸含量因茶的品种、部位而变动，在干茶中占重量的1%-2%。国家标准GB/T 23193-2017中规定了用高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸含量的方法。本应用参照上述国标，采用C18柱TSKgel ODS-100V (4.6mmI.D.×25cm, 5μm) 对茶氨酸进行了定量分析，并作标准曲线，其线性关系良好，可满足GB/T 23193-2017中的要求。