婴儿乳粉中菜籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-399Excellence in Science Excellence in ScienceGCMS-385 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. - Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cnTel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn GCMS 法测定婴儿配方乳粉中4种植物甾醇的含量 GCMS-385 摘要：本文使用岛津 GCMS-QP2020 NX 气质联用仪建立了婴儿配方乳粉中4种植物甾醇的测定方法。样品经酯化萃取分离、氮吹浓缩后上机测试，分析结果表明：4种甾醇在1~200 ug/mL范围内标准曲线均线性良好，线性相关系数大于0.997。各组分的检出限为 0.07-0.157 mg/kg。 空白样品中以6.25和100 mg/kg加标，平均回收率在95.7~113.5%之间。该方法灵敏度高，重复性好，可适用于婴儿配方乳粉中甾醇成分的测试。 关键词：气质联用仪婴儿配方乳粉 甾醇 植物甾醇是一种天然的植物活性物质，广泛存在于各种植物油、、!坚果和植物种子中，也存在于部分蔬菜水果中。植物甾醇的结构与胆固醇相似，均以环戊烷全氢菲为主架结构，不同甾醇的区别在于支链大小和双键数目不同。 植物甾醇对人体健康有很多益处，研究发现，植物固醇有降低血液胆固醇、防治前列腺肥大、抑制肿瘤和调节免疫等作用。国内外研究表明，植物甾醇在肠道内可以与胆固醇竞争，减少胆固醇吸收，有效地降低高脂血症患者血液中的低密度脂蛋白胆固醇含量，对高血脂患者有很好的降脂效果。国家卫生健康委员 实验部分 1.1仪器 岛津 GCMS-QP2020 NX气质联用仪 1.2分析条件 色谱柱： Rxi-5 Sil MS (30 m×0.25mm×0.25 um) 进样口温度：290℃ 柱温程序：200℃(2 min)_20℃ /min_310℃ (9min)进样量：1uL 离子化方式：EI 接口温度：290℃ 会在2010年3号公告中，将植物甾醇等7种物品批准为“新资源食品””(使用范围不包括婴幼儿食品)，食用量为≤2.4克/天。 目前一些婴儿配方乳粉中会添加植物油，故存在一定量的植物甾醇，因此有必要研究婴儿配方乳粉中植物甾醇的含量分布情况。 本文利用岛津 GCMS-QP2020 NX 气质联用仪，建立了菜籽甾醇等4种甾醇的分析方法。该方法灵敏度高，重复性和选择性好，定量准确，适合于婴儿配方乳粉中甾醇成分的测试。 恒线速度方式：38.7 cm/sec 进样方式：分流进样 分流比：10：1 离子源温度：250℃ 检测器电压：调谐电压+0.3 kV ( 采集方式： SIM，化合物信息见表1 ) 图1样品前处理流程图 结果与讨论 2.1标准品图谱 4种甾醇的100 ug/mL标准溶液色谱图如图2所示，化合物相关信息见表1，化合物质量色谱图见图3. 图24种甾醇100 pg/mL 混合标准溶液色谱图 表14种甾醇信息 No. 化合物名称 CAS号 保留时间(min) 定量离子 ((m/z) 定性离子(m/z) 定性离子(m/z) 菜籽甾醇 474-67-9 10.331 398 255 271 2 菜油甾醇 474-62-4 10.821 400 315 289 3 豆甾醇 83-48-7 11.021 412 255 300 4 β-谷甾醇 83-46-5 11.554 414 329 396 图3 4种甾醇标准品质量色谱图(1 ug/mL) 2.2标准曲线 使用正己烷配制浓度分别为1、5、10、50、100、200 ug/mL的4种甾醇混合标准工作溶液，按优化后的仪器条件进行分析。以各目标物的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制外标法标准曲线，各化合物标准曲线如图4所示。根据1 ug/mL标样数据，分别以3倍和10倍信噪比(S/N)计算各目标物的方法检出限和定量限，结果见表2 图4 4种甾醇标准曲线(1-200ug/mL) 表2 4种甾醇曲线相关系数、检出限与定量限 No. 目标物 相关系数R 检出限(mg/kg) 定量限 (mg/kg) 1 菜籽甾醇 0.9986 0.070 0.234 2 菜油甾醇 0.9981 0.157 0.523 3 豆甾醇 0.9979 0.071 0.236 4 β-谷甾醇 0.9985 0.118 0.392 2.3重复性测试 取浓度为 1 ug/mL的标准溶液，重复进样6次，考察仪器重复性，各组分峰面积及 RSD% 见表3。 表3重复性测试结果 No. 峰面积 组分名称RSD (%) 1 2 3 4 5 6 1 菜籽甾醇 6224 6727 6443 6415 6315 6793 3.50 2 菜油甾醇 8538 8440 8674 8600 8221 9068 3.28 3 豆甾醇 8329 8698 8465 8086 8052 8291 2.90 4 β-谷甾醇 8838 8395 8801 8157 8272 8434 3.28 2.4实际样品和加标回收率测试 取市售品牌的婴儿配方乳粉样品进行实验，得到该样品色谱图见图5，样品中未检出4种目标组分。 在空白样品基质中加入校准溶液，加标浓度分别为 6.25 mg/kg 和 100 mg/kg， 每个浓度平行测试3份，按1.3所述前处理方式进行加标回收率试验，加标回收率结果如表4所示。 图5 某品牌婴儿配方乳粉样品色谱图 表4 样品加标回收率结果 No. 目标物 样品测试 结果 (mg/kg) 加标浓度6.25 mg/kg 加标浓度100 mg/kg 平均 平均 1# 2# 3# 回收率 1# 2# 3# 回收率 (%) (%) 1 菜籽甾醇 N.D. 6.97 6.43 7.07 109.2 113.25 115.34 111.48 113.4 2 菜油甾醇 N.D. 7.12 6.78 7.38 113.5 111.87 114.35 110.52 112.2 3 豆甾醇 N.D. 5.99 5.75 6.20 95.7 109.18 113.05 107.15 109.8 4 B-谷甾醇 N.D. 6.78 6.30 6.90 106.5 105.12 107.16 103.82 105.4 注：N.D.表示未检出 结论 本方法采用岛津 GCMS-QP2020 NX建立了婴儿配方乳粉中4种甾醇的检测方法。该方法在1~200 ug/mL 范围内标准曲线均线性良好，相关系数大于0.997，各组分的检出限和定量限分别为 0.07-0.157 mg/kg 和 0.234-0.392mg/kg。 空白样品中以6.25和100 mg/kg 浓度水平加标，，平均回收率在95.7~113.5%之间。该方法灵敏度高，重复性好，可适用于婴儿配方乳粉中甾醇成分的含量测定。 岛津应用云 本文使用岛津GCMS-QP2020   NX气质联用仪建立了婴儿配方乳粉中4种植物甾醇的测定方法。样品经酯化萃取分离、氮吹浓缩后上机测试，分析结果表明：4种甾醇在1~200   µg/mL范围内标准曲线均线性良好，线性相关系数大于0.997。各组分的检出限为0.07-0.157 mg/kg。空白样品中以6.25 和100   mg/kg加标，平均回收率在95.7~113.5 %之间。该方法灵敏度高，重复性好，可适用于婴儿配方乳粉中甾醇成分的测试。