玉米中25种苯酰胺农药检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-342Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-209 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn GC-MS/MS 法测定谷物类食品中25种苯酰胺类农药含量 GCMSMS-209 摘要：本文参考GB 23200.72-2016《食品中苯酰胺类农药残留量的测定气相色谱-质谱法》，建立了 GC-MS/MS法检测谷物中25种苯酰胺类农药残留的方法。分析结果表明：在2~50 ng/mL基质校准曲线浓度范围内，各化合物线性相关系数均在0.999以上，线性良好。5 ng/mL 基质标准溶液重复分析6次，峰面积相对标准偏差均小于9%，重复性良好。对实际玉米样品进行测试，25种苯酰胺类农药均未检出，加标浓度为2 ng/g水平下，各组分回收率为80~115%，3次加标实验相对标准偏差小于10%。此方法可用于食品中苯酰胺类农药残留的检测。 关键词：：气相色谱-三重四极杆质谱联用仪 苯酰胺农药 谷物 苯酰胺类农药是一类分子中含有酰胺结构的芳香化合物，其用途较广，特别是苯酰胺类除草剂因具有选择性好，药效较高而价格较低等特点，已在国内外广泛应用。谷物是日常生活中的必需品，为保证产量，在生长过程中需要喷洒农药杀虫、除草，如不合理的使用农药，很容易导致农药残留。 GB 23200.72-2016《食品安全国家标准食品中苯酰胺类农药残留量的测定气相色谱-质谱法》中提供 了 GCMS 检测食品中25种苯酰胺类农药方法。此标准采用丙酮-正己烷混合溶液萃取苯酰胺类农药，中性氧化铝或石墨化碳黑固相萃取小柱净化，氮吹浓缩后GC-MS 分析。本文参考此标准进行前处理，采用GC-MS/MS检测， GC-MS/MS 相对于 GCMS 而言，抗干扰性能力强，灵敏度更高，更有利于低浓度农药残留的检测。 实验部分 1.1仪器 气相色谱-三重四极杆质谱联用仪： GCMS-TQ8050 NX 1.2分析条件 色谱柱： Rtx1701，(30m×0.25 mm×0.25 um) 柱温程序：40℃(1min)_30℃ /min_200℃_8C / min_280℃ (5 min) 载气控制模式：恒流 色谱柱流量：1mL/min 采集方式： MRM(离子对信息见表1) 进样量： 1uL 离子源温度：230℃ 检测器电压：调谐电压 +0.5kV 1.3样品前处理 参考标准 GB23200.72-2016，对样品进行如下前处理： 结果与讨论 2.1苯酰胺农药标准溶液谱图及化合物信息 按照1.3前处理方式处理玉米样品，得到空白基质溶液，配制25种苯酰胺类农药基质标准溶液，20 ng/mL谱图如图1所示， 5 ng/mL谱图如图2所示，相关化合物信息见表1。 图125种苯酰胺农药标准溶液谱图(浓度为20 ng/mL) 表125种苯酰胺农药信息 No. 组分名称 英文名称 CAS 号 保留时间(min) 离子对(m/z)碰撞电压(V) 毒草胺 Propachlor 1918-16-7 9.215 120.0>77.0 176.1>57.0 20 8 2 氯苯胺灵 Chlorpropham 101-21-3 9.480 127.1>65.0 127.1>92.0 3 炔苯酰草胺 Propyzamide 23950-58-5 10.825 172.9>144.9 172.9>109.0 4 二甲酚草胺 Dimethenamid 87674-68-8 11.325 230.0>154.1 203.0>126.1 5 甲草胺 Alachlor 15972-60-8 11.460 188.1>160.1 188.1>132.1 6 甲呋酰胺 Fenfuram 24691-80-3 11.570 188.1>160.1 188.1>132.1 7 异丙甲草胺 Metolachlor 51218-45-2 12.160 162.1>133.1 16 238.1>162.1 12 8 呋菌胺 Methuroxam 28730-17-8 12.790 229.00>137.10 137.00>67.10 12 12 9 氟噻草胺 Flufenacet 142459-58-3 12.915 151.0>136.0 151.0>95.0 12 26 10 敌稗 Propanil 709-98-8 13.055 217.0>161.0 160.9>99.0 10 24 11 双苯酰草胺 Diphenamide 957-51-7 13.120 167.1>152.1 239.1>167.1 20 8 12 吡唑草胺 Metazachlor 67129-08-2 13.320 209.1>132.1 133.1>117.1 18 24 13 丁草胺 Butachlor 23184-66-9 13.425 176.1>147.1 188.1>160.1 14 12 14 丙草胺 Pretilachlor 51218-49-6 14.015 262.1>202.1 238.1>162.1 10 10 15 敌草胺 Napropamide 15299-99-7 14.205 128.1>72.0 128.1>57.0 6 12 16 环氟菌胺 Cyflufenamide 180409-60-3 14.505 118.10>90.00 118.10>89.0 10 25 17-1 异丙菌胺-1 Iprovalicarb-1 140923-17-7 14.655 158>116 5 134>93 15 17-2 异丙菌胺-2 Iprovalicarb-2 140923-17-7 14.875 158>116 5 134>93 15 18 氟酰胺 Flutolanil 66332-96-5 15.015 173.0>145.0 14 173.0>95.0 26 19 噻氟菌胺 Thifluzamide 130000-40-7 15.100 448.9>428.9 446.9>426.9 20 20 20 萎锈灵 Carboxin 5234-68-4 15.155 235.1>143.0 12 235.1>87.0 24 21 苯霜灵 Benalaxyl 71626-11-4 15.730 206.1>132.1 206.1>105.1 20 20 22 稻瘟酰胺 Fenoxanil 115852-48-7 15.875 189.0>125.0 293.1>155.0 12 22 23 灭锈胺 Mepronil 55814-41-0 16.140 1269.1>119.1 269.1>227.1 6 24 噻吩草胺 Thenylchlor 96491-05-3 16.650 288.1>141.1 141.1>97.0 25 毗螨胺 Tebufenpyrad 119168-77-3 16.725 333.1>171.1 333.1>276. 8 备注：异丙菌胺包含两个同分异构体。 Q120.00>77.00(+) 毒草胺 Q448.90>428.90 (+) 噻氟菌胺 10.5 11.0 炔苯酰草胺 1.42e4 13.0 敌稗 1.82e4 13.5 丁草胺 1.21e5 15.0 氟酰胺 1.91e4 16.5 灭锈胺 2.2校准曲线和检出限 按照1.3前处理方式，得到玉米基质空白溶液5份，配制浓度分别为2、5、10、20、50ng/mL标准溶液(萘丙酰草胺、环氟菌胺校准曲线范围为5~100 ng/mL)，得到校准曲线如图2所示(部分)，线性相关系数均大于0.999，具体线性相关系数及基于2ng/mL 基质加标溶液信噪比计算得到的仪器检出限如表2所示。 Area Area 表2线性相关系数和仪器检出限(ng/mL) No. 组分名称 线性相关系数 仪器检出限 No. 组分名称 线性相关系数 仪器检出限 毒草胺 0.9997 0.0867 14 丙草胺 0.9999 0.0450 氯苯胺灵 0.9998 0.0477 15 敌草胺 0.9994 0.3629 3 炔苯酰草胺 0.9996 0.0818 16 环氟菌胺 0.9994 0.3939 4 二甲酚草胺 0.9997 0.0025 17-1 异丙菌胺-1 1.0000 0.3731 5 甲草胺 0.9996 0.0571 17-2 异丙菌胺-2 0.9994 0.3035 6 甲呋酰胺 0.9996 0.0072 18 氟酰胺 0.9998 0.0316 7 异丙甲草胺 0.9996 0.0229 19 噻氟菌胺 0.9999 0.0017 8 呋菌胺 0.9998 0.0029 20 萎锈灵 0.9998 0.0067 9 氟噻草胺 0.9998 0.2429 21 苯霜灵 0.9998 0.2844 10 敌稗 0.9999 0.0745 22 稻瘟酰胺 0.9998 0.0103 11 双苯酰草胺 0.9994 0.1899 23 灭锈胺 0.9996 0.0225 12 吡唑草胺 0.9998 0.0269 24 噻吩草胺 0.9999 0.0478 13 丁草胺 0.9992 0.1058 25 毗螨胺 0.9996 0.0055 2.3重复性结果 将5 ng/mL 玉米基质标准溶液重复分析6次，考察仪器重复性，25种化合物峰面积的相对标准偏差小于9%，具体结果见表3。 表3重复性实验结果(n=6) No. 峰面积 化合物 ·RSD (%) 2 3 4 5 6 毒草胺 84375 83064 83980 81378 81574 81091 1.72 2 氯苯胺灵 48512 46323 46112 47035 45457 45010 2.69 3 炔苯酰草胺 123267 121429 117893 114076 117215 114077 3.19 4 二甲酚草胺 82187 81100 80707 81894 79112 77906 2.07 5 甲草胺 49339 50575 49287 48700 48348 50012 1.66 6 甲呋酰胺 101124 99013 96975 96405 95530 96537 2.13 异丙甲草胺 181639 178223 178515 176935 177096 176764 1.03 8 呋菌胺 79443 78095 75637 77528 76027 76538 1.85 氟噻草胺 75285 72350 76004 75120 79946 73983 3.37 10 敌稗 32933 31378 30950 32541 32147 34251 3.64 11 双苯酰草胺 102144 98538 98317 103367 98463 98841 2.22 12 吡唑草胺 70919 74871 72075 73075 73838 73019 1.88 13 丁草胺 42419 38066 37514 37398 34941 35563 7.00 14 丙草胺 35820 35113 34667 32463 34675 33965 3.33 15 敌草胺 68320 66014 65332 72629 68155 66068 3.96 16 环氟菌胺 29389 25088 27801 30661 28194 23383 7.31 17-1 异丙菌胺-1 19219 21175 19112 16588 18058 20084 8.36 17-2 异丙菌胺-2 22422 21779 20820 18861 20983 18306 7.90 GCMSMS-209 18 氟酰胺 284974 281792 291264 286923 281540 267959 2.81 19 噻氟菌胺 26322 26710 28204 27531 27000 27556 2.49 20 萎锈灵 64310 61526 64850 63546 63002 64262 1.88 21 苯霜灵 15479 14214 14961 14974 15792 15235 3.58 22 稻瘟酰胺 20508 20913 21524 22211 22047 22512 3.63 23 灭锈胺 48437 48916 50121 48695 51174 53718 4.02 24 噻吩草胺 22591 25009 23020 24540 24287 23876 3.87 25 毗螨胺 24873 25332 26595 28016 27699 28177 5.30 2.4实际样品测试及加标回收率结果 按照1.3的前处理方法，分析玉米样品，得到色谱图如图3所示。对玉米样品加标，加标浓度为2ng/g，重复3次，实际样品中25种农药浓度及加标回收率见表4。 图4实际样品色谱图 表4实际样品中农药浓度和加标回收率(n=3) No. 化合物 样品浓度(ng/g) 检测平均浓度(ng/g) 平均回收率 RSD% 1 毒草胺 N.D. 2.16 107.8 0.55 2 氯苯胺灵 N.D. 2.27 113.5 1.51 3 炔苯酰草胺 N.D. 2.25 112.4 0.53 4 二甲酚草胺 N.D. 2.22 110.9 1.08 5 甲草胺 N.D. 2.17 108.3 2.25 6 甲呋酰胺 N.D. 2.16 108.0 1.15 7 异丙甲草胺 N.D. 2.11 105.7 2.18 8 呋菌胺 N.D. 2.08 103.8 3.06 9 氟噻草胺 N.D. 1.88 93.8 6.83 10 敌稗 N.D. 2.27 113.6 5.14 11 双苯酰草胺 N.D. 2.12 106.1 7.94 12 吡唑草胺 N.D. 2.05 102.6 4.39 13 丁草胺 N.D. 2.07 103.4 7.09 14 丙草胺 N.D. 1.92 96.2 7.81 15 敌草胺 N.D. 2.13 106.3 6.70 16 环氟菌胺 N.D. 1.84 92.2 1.61 17-1 异丙菌胺-1 N.D. 2.03 101.7 7.91 17-2 异丙菌胺-2 N.D. 2.12 105.8 8.88 18 氟酰胺 N.D. 1.95 97.4 2.65 19 噻氟菌胺 N.D. 1.99 99.6 3.25 20 萎锈灵 N.D. 1.86 92.9 2.56 21 苯霜灵 N.D. 2.04 102.0 5.98 22 稻瘟酰胺 N.D. 1.82 90.9 3.28 23 灭锈胺 N.D. 1.86 93.2 5.60 24 噻吩草胺 N.D. 1.76 87.7 4.87 25 毗螨胺 N.D. 1.60 80.0 6.05 备注： N.D.表示未检出。 结论 本文参考GB 23200.72-2016《食品安全国家标准食品中苯酰胺类农药残留量的测定气相色谱一质谱法》，建立了 GC-MS/MS法检测食品中25种苯酰胺类农药残留的方法，分析结果表明：在2~50ng/mL校准曲线浓度范围内，各化合物线性相关系数均在0.999以上，线性良好。5 ng/mL基质标准溶液重复分析6次，峰面积相对标准偏差均小于9%，重复性良好。对实际玉米样品进行测试及加标实验，25种苯酰胺类农药均未检出，加标浓度为2ng/g，回收率为80~115%，3次加标实验相对标准偏差小于10%。此方法可用于食品中苯酰胺类农药残留的检测。 岛津应用云 本文参考GB/T 23200.72-2016《食品安全国家标准 食品中苯酰胺类农药残留量的测气相色谱－质谱法》，建立了GC-MS/MS法检测玉米中25种苯酰胺类农药残留的方法，分析结果表明：在2~50 ng/mL校准曲线浓度范围内，各化合物线性相关系数均在0.999以上，线性良好。5 ng/mL基质标准溶液重复分析6次，峰面积相对标准偏差均小于9%，重复性良好。对实际样品进行测试，25种苯酰胺类农药均未检出，加标浓度为2 ng/g，回收率为80%~115%，3次加标实验相对标准偏差小于10%。此方法可用于食品中苯酰胺类农药残留的检测。