肉、鱼中兽残、瘦肉精检测方案

3·15惊爆：又见“瘦肉精”! 2021年03月15日，央视“3·15晚会”曝光了一大批侵害消费者权益的企业：偷了你的脸，“看脸下菜碟”；你的简历可能已被卖去黑市；手机清理软件“魔爪”伸向老年人；虚假医药广告花钱就可投放；设计缺陷的汽车竟让消费者买单；养羊大县十年“瘦肉精”喂羊，羊肉销往多地... 其中有关羊肉“瘦肉精”的问题，农业农村部高度重视，连夜派工作组调查瘦肉精羊肉。 这“瘦肉精”到底是何物，对健康有何危害，为何又屡禁不止呢? “瘦肉精”并不是一种物质，而是十几种物质的总称，常见的有盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。其中盐酸克伦特罗、沙丁胺醇，还是平喘的处方药，在临床上广泛使用，不过盐酸克伦特罗的副作用太大，后来被禁用了。 之所以在养殖过程中添加，是因为它们可以促进蛋白合成，抑制脂肪合成。蛋白有个特性就是很吸水，在动物体内它会吸收大量的水，主要存在于肌肉(瘦肉)中。养殖户添加了瘦肉精就能很快提升羊的出肉率，从中获利颇丰。 “瘦肉精”对健康有哪些危害呢? 常见的中毒症状有面色潮红、头痛、胸闷、心悸、心慌、骨骼肌震颤、四肢麻木等。这些症状通常在15分钟到6小时内出现，症状大概会持续90分钟到6天。再有，瘦肉精对本身有心率不齐，高血压、青光眼、糖尿病、甲亢等疾病的人危害较大，甚至会引发死亡。 迪马科技技术部开发了《动物源性食品中91种兽药残留的筛查》解决方案，方案中包含常见的“瘦肉精”物质。该方法前处理净化步骤简单，一次性实现多种兽药残留的检测，大大提高了检测效率。方案详情如下： 动物源性食品中91种兽药残留的检测 一、适用范围 本方案适用于肉、鱼中多种兽药残留检测。 二、标准品配制 标准品储备溶液：准确称取标准品，用合适的溶剂配制成高浓度的标准溶液。 标准品中间液：1.0pg/mL；取一定量的单标于 5mL容量瓶，用乙腈定容至 5mL。标准品上机溶液：0.02ug/mL， 10%乙腈水(含有5%甲酸)配制。 三、提取 取2.5g样品，加入10mL90%乙腈水(含有0.1%甲酸)，振荡5min， 超声5min，6000rpm离心2min， 取出上清液准备净化。 四、净化 4.1 ProElut PLS-A (Cat#：6655926) SPE 柱净化过程：小柱不需要活化，直接将待净化液加入柱中，接收4mL流出液；将接收的流出液在40℃水浴条件下氮吹至 0.5mL，用定容液定容至1mL，过微孔滤膜供 LC-MS分析。 4.2 ProElut QuEChERS 多兽残分析净化管 (Cat#： 64600) QuEChERS 净化过程：将提取液全部转移至净化管中，涡旋混合1min， 6000rpm离心2min， 取出4mL上清液，在40℃水浴条件下氮吹至 0.5mL，用定容液定容至1mL，过微孔滤膜供 LC-MS分析。 定容液：：10%乙腈水(含有5%甲酸) 五、分析条件 5.1正离子模式 UPLC 条件： 色谱柱： Endeavorsil C18，100x2.1mm， 1.8um (Cat#：87003) 流速：0.2mL/min 进样量：5pL 柱温：35℃ 流动相：A：0.1%甲酸乙腈 B：0.5%甲酸水 梯度设置 时间/Min. 0 2 8 10 13 13.5 25 A(%) 10 10 60 90 90 10 10 B(%) 90 90 40 10 10 90 90 质谱条件： 电离模式： ESI 扫描方式：正离子扫描 检测方式：多反应监测 电喷雾电压：5500V 雾化气压力：50psi 辅助气压力：50psi 气帘气压力：20psi 离子源温度：500℃ 5.2负离子模式 UPLC 条件： 色谱柱： Endeavorsil C18，100x2. 1mm， 1.8um (Cat#：87003) 流速： 0.2mL/min 进样量：5uL 柱温：35℃ 流动相： A：乙腈B：10mmol/L乙酸铵 梯度设置 时间/Min. 0 2 6 8 8.5 20 A(%) 50 50 75 90 50 50 B(%) 50 50 25 10 50 50 质谱条件： 电离模式： ESI 扫描方式：负离子扫描 检测方式：多反应监测 电喷雾电压：-4500V 雾化气压力：50psi 辅助气压力：50psi 气帘气压力：20psi 离子源温度：500℃ 六、实验结果 6.1添加水平为20.0ng/kg， 水产品和动物组织中91种兽残回收率结果： 表4负离子模式下猪肉中8种多兽残的 LC-MS回收率(%)结果 表5负离子模式下罗罗鱼中8种多兽残的L C-MS回收率(%)结果 表6负离子模式下鸡肉中8种多兽残的LC-MS回收率(%)结果 PLS-A 化合物名称 回收率(%) QuE PLS-A 氧霉素 84.8 81.8 玉米赤烯酮 95.8 62.1 b-玉米赤霉烯醇 80.3 83.1 已烯雌酚 81.8 75.8 地克珠利 86.9 76.6 已二烯酚 88.3 64.5 酮 81.0 100.6 甲砜霉素 82.1 89.4 6.2添加水平为20.0ug/kg， 91 种兽残基质效应结果(基质效应=基质标/溶剂标)： 表10负离子模式下猪肉中8种多兽残的基质效应(%)结果 表11负离子模式下罗非鱼中8种多兽残的基质效应(%)结果 表12负离子模式下鸡肉中8种多兽残的基质效应(%)结果 净化方式 回收率(%) QuE PLS-A 氧霉素 164.4 172.5 玉米赤霉烯酮 87.8 86.1 b-玉米赤霉烯 104.2 86.9 己烯雌酚 88.2 105.4 地克珠利 202.2 220.6 己二烯雕酚 71.3 85.1 酮 81.8 91.5 甲砜霉素 212.1 223.2 6.391种兽残的MRM 色谱图： 图1正离子模式下，83种兽残 0.02pg/mL MRM 色谱图 图2负离子离子模式下，8种兽残 0.02pg/mL MRM色谱图 七、相关产品 货号 名称 规格 样品前处理 65926 ProElut PLS-A 6mL 30/pk 64600 ProElut QuEChERS 多兽残分析净化管 15mL 50/pk 244358 12管防交叉污染真空 SPE 萃取装置 12位 4803 1，3，6mL 柱管通用连接器 15/pk 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13mm，0.22pm 100/pk 30040 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13mm，0.45pm 100/pk 色谱柱及保护柱 87003 Endeavorsil C18 100x2.1mm，1.8pm HPLC溶剂•缓冲盐•离子对试剂 50101 乙腈 HPLC及 4L 50144 甲酸 HPLC 级 50mL 50138 乙酸铵 HPLC级 100G 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50孔 52401A 瓶架/白色 50 孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2mL， 100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk H80465 HPLC 进样针 25pL 红色货号产品火热促销中! 3·15惊爆：又见“瘦肉精”！　　2021年03月15日，央视“3·15晚会”曝光了一大批侵害消费者权益的企业：偷了你的脸，“看脸下菜碟”；你的简历可能已被卖去黑市；手机清理软件“魔爪”伸向老年人；虚假医药广告花钱就可投放；设计缺陷的汽车竟让消费者买单；养羊大县十年“瘦肉精”喂羊，羊肉销往多地......　　其中有关羊肉“瘦肉精”的问题，农业农村部高度重视，连夜派工作组调查瘦肉精羊肉。　　这“瘦肉精”到底是何物，对健康有何危害，为何又屡禁不止呢?      　　“瘦肉精”并不是一种物质，而是十几种物质的总称，常见的有盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。其中盐酸克伦特罗、沙丁胺醇，还是平喘的处方药，在临床上广泛使用，不过盐酸克伦特罗的副作用太大，后来被禁用了。　　　　之所以在养殖过程中添加，是因为它们可以促进蛋白合成，抑制脂肪合成。蛋白有个特性就是很吸水，在动物体内它会吸收大量的水，主要存在于肌肉(瘦肉)中。养殖户添加了瘦肉精就能很快提升羊的出肉率，从中获利颇丰。　　“瘦肉精”对健康有哪些危害呢？　　常见的中毒症状有面色潮红、头痛、胸闷、心悸、心慌、骨骼肌震颤、四肢麻木等。这些症状通常在15分钟到6小时内出现，症状大概会持续90分钟到6天。再有，瘦肉精对本身有心率不齐，高血压、青光眼、糖尿病、甲亢等疾病的人危害较大，甚至会引发死亡。　　迪马科技技术部开发了《动物源性食品中91种兽药残留的筛查》解决方案，方案中包含常见的“瘦肉精”物质。该方法前处理净化步骤简单，一次性实现多种兽药残留的检测，大大提高了检测效率。方案详情如下：动物源性食品中91种兽药残留的检测一、适用范围本方案适用于肉、鱼中多种兽药残留检测。二、标准品配制标准品储备溶液：准确称取标准品，用合适的溶剂配制成高浓度的标准溶液。标准品中间液：1.0μg/mL；取一定量的单标于5mL容量瓶，用乙腈定容至5 mL。标准品上机溶液：0.02μg/mL，10%乙腈水（含有5%甲酸）配制。三、提取取2.5g样品，加入10mL90%乙腈水(含有0.1%甲酸)，振荡5min，超声5min，6000rpm离心2min，取出上清液准备净化。四、净化4.1 ProElut PLS-A（Cat#：65926）SPE柱净化过程：小柱不需要活化，直接将待净化液加入柱中，接收4mL流出液；将接收的流出液在40℃水浴条件下氮吹至0.5mL，用定容液定容至1mL，过微孔滤膜供LC-MS分析。4.2 ProElut QuEChERS多兽残分析净化管（Cat#：64600）QuEChERS净化过程：将提取液全部转移至净化管中，涡旋混合1min，6000rpm离心2min，取出4mL上清液，在40℃水浴条件下氮吹至0.5mL，用定容液定容至1mL，过微孔滤膜供LC-MS分析。定容液：10%乙腈水（含有5%甲酸）五、分析条件5.1 正离子模式UPLC 条件：            色谱柱：Endeavorsil C18,100x2.1mm，1.8μm (Cat#：87003)流速：0.2mL/min进样量：5μL柱温：35℃流动相：A:0.1%甲酸乙腈 B:0.5%甲酸水质谱条件：电离模式：ESI扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500V雾化气压力：50psi辅助气压力：50psi气帘气压力：20psi离子源温度：500℃5.2 负离子模式UPLC 条件：           色谱柱：Endeavorsil C18,100x2.1mm，1.8μm (Cat#：87003)流速：0.2mL/min进样量：5μL柱温：35℃流动相：A:乙腈 B:10mmol/L乙酸铵质谱条件：电离模式：ESI扫描方式：负离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：-4500V雾化气压力：50psi辅助气压力：50psi气帘气压力：20psi离子源温度：500℃六、实验结果6.1 添加水平为20.0μg/kg，水产品和动物组织中91种兽残回收率结果：  6.2 添加水平为20.0μg/kg，91种兽残基质效应结果（基质效应=基质标/溶剂标）： 6.3 91种兽残的MRM色谱图：七、相关产品