水果（苹果、梨）中4,6-二硝基邻甲酚残留量检测方案(食品)

水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的测定 GB 23200.27-2016 适用范围 本标准适用于苹果、梨中水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的检验，其他食品可参照执行。（本实验样品为苹果） 参考标准：《GB 23200.27—2016 食品安全国家标准 水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的测定》 溶液的配置 4,6-二硝基邻甲酚标准储备液：准确称取5mg 4,6-二硝基邻甲酚标准品，用乙腈稀释并定容至10mL，浓度为500μg/mL。可在0℃~4℃冰箱中保存3个月。 4,6-二硝基邻甲酚标准工作液：准确移取标准储备液0.02mL，用乙腈稀释至10mL，浓度为1μg/mL。可在0℃~4℃冰箱中保存1个月。 提取步骤 样品前处理：将样品经搅拌机搅碎，冷藏保存，备用。 准确称取1 g试样（精确至0.01g）于15 mL离心管中，加入3g无水硫酸钠和5mL二氯甲烷，在漩涡混合器上充分混匀3min，并于4000r/min离心5min，将提取液转移至另一个15mL离心管中，残渣用5mL二氯甲烷重复提取一次，合并提取液，于50℃氮吹浓缩至干。 衍生化 残渣于离心管中加入0.4mL乙腈溶解，再加入100μL衍生化试剂MTBSTFA（N-叔丁基二甲基甲硅烷基-N-甲基三氟乙酰胺），封口，80℃下恒温衍生化1h。取250μL标准工作液加入100μL衍生化试剂MTBSTFA和150μL乙腈，封口，在上述条件下进行衍生化。衍生化后的溶液过0.22μm的微孔滤膜，供气相色谱-质谱联用仪使用。 注意事项 加标水平：1g样品中加入250μL 1μg/mL混合标准工作液，定容至0.5mL，因此加标水平为0.25mg/kg，最终机度数为 0.5μg/mL。 色谱条件 6.1气相色谱条件 色谱柱 WM-5MS ,30m×0.25mm×0.25μm 进样口温度 210℃ 升温程序 100℃，保持1min，以30℃/min升温至180℃，保持1min，以50℃/min升温至205℃，再以10℃/min升温至260℃，保持20min。 载气 高纯氦气（纯度>99.999%） 进样方式 不分流进样 恒流模式 1.0mL/min 进样量 1μL 6.2质谱条件 电离方式 电子轰击电离源（EI） 电离能量 70eV 传输线温度 250℃ 离子源温度 230℃ 四极杆温度 150℃ 监测方式 选择离子监测方式（SIM） 监测离子 m/z 255/209/239/179 溶剂延迟 5min 色谱图或者加标回收率结果 图1. 4,6二硝基邻甲酚0.5μg/mL图谱 表1、出峰情况 物质 保留时间 类型 峰宽 面积 开始时间 结束时间 4,6二硝基邻甲酚 9.897 M 0.021 5701 9.869 9.927 图2. 梨样品空白图谱 图3. 梨样品加标0.25mg/kg图谱 表2、加标回收率表 物质 加标水平 平均回收率 RSD值（n=2） 4,6二硝基邻甲酚 0.25mg/kg 104.46% 3.04% 8、相关产品信息 货号 名称 规格 00821-32291 盖子+垫片 Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖 中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶 带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk 03904-22001 气相色谱柱 WM-5MS ,30m×0.25mm×0.25μm 00837-05002 15mL螺口尖底离心管 Welchrom® 离心管 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌，15mL，50/包 00826-D123P050 4,6-二硝基邻甲酚标准品 A2S, CAS No.:534-52-1,50mg 1、适用范围本标准适用于苹果、梨中水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的检验，其他食品可参照执行。（本实验样品为苹果）参考标准：《GB 23200.27—2016 食品安全国家标准 水果中4,6-二硝基邻甲酚残留量的测定》 2、提取步骤样品前处理：将样品经搅拌机搅碎，冷藏保存，备用。准确称取1 g试样（j确至0.01g）于15 mL离心管中，加入3g无水硫酸钠和5mL二氯甲烷，在漩涡混合器上充分混匀3min，并于4000r/min离心5min，将提取液转移至另一个15mL离心管中，残渣用5mL二氯甲烷重复提取一次，合并提取液，于50℃氮吹浓缩至干。 3、衍生化残渣于离心管中加入0.4mL乙腈溶解，再加入100μL衍生化试剂MTBSTFA（N-叔丁基二甲基甲硅烷基-N-甲基三氟yi酰胺），封口，80℃下恒温衍生化1h。取250μL标准工作液加入100μL衍生化试剂MTBSTFA和150μL乙腈，封口，在上述条件下进行衍生化。衍生化后的溶液过0.22μm的微孔滤膜，供气相色谱-质谱联用仪使用。 4、色谱条件气相色谱条件色谱柱：WM-5MS，30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度：210℃；升温程序：100℃，保持1min，以30℃/min升温至180℃，保持1min，以50℃/min升温至205℃，再以10℃/min升温至260℃，保持20min；载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；进样方式：不分流进样；恒流模式：1.0mL/min；进样量：1μL质谱条件电离方式：电子轰击电离源（EI）；电离能量：70eV；传输线温度：250℃；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；监测方式：选择离子监测方式（SIM）；监测离子：m/z 255/209/239/179；溶剂延迟：5min； 5、色谱图或者加标回收率结果6、相关产品信息