L-色氨酸中比旋度检测方案(旋光仪)

WG-050-201907 L-色氨酸的比旋度测定 i前言 L-色氨酸是人体和动物所必需的8种必需氨基酸之一，不能通过自身合成，只能通过食物来摄取。L-色氨酸又被称为第二必需氨基酸，目前广泛应用于医药、食品、饲料等方面。随着生产技术的不断进步，微生物法替代了传统的化学合成法和蛋白质水解法，占据了市场主导地位，主要产地集中在欧美、日本等少数地方。但目前在产业化生产L-色氨酸的过程中，均会存留少量杂质，因此下游的分离纯化工艺非常重要。 比旋光度是旋光物质的重要物理常数，可以用来检测L-色氨酸的纯杂程度，进而为提升L-色氨酸的生产效率提供参考。 2仪器与试剂 2.1仪器 Hanon P850 Pro 全自动旋光仪 3实验方法 3.1实验步骤 (1)色氨酸溶液 精准称取约1.0g色氨酸，加入适量水，在水浴(60℃)中温热溶解，定容至100mL，制成每1mL约含10mg的溶液。 (2)空白测试 将控温旋光管用三级水清洗3次以上，然后加满水至管路中无气泡。将旋光管水平放置于旋光仪中，连接温控线，设置温度20℃，等待仪器温度稳定后，点击“清零”。 (3)样品测试 将控温旋光管取出，用色氨酸溶液清洗3次以上，然后加满溶液至管路中无气泡。等待仪器温度稳定后，点击"测试”。 3.2仪器参数 样品名称：色氨酸 测试次数：3 样品质量：0.99952g 显示位数：3 试管长度： 10cm 结果类型：比旋度 温度：20℃ 测量准确：高精度测量 4结果与讨论 4.1实验结果 编号 测试温度 比旋度 平均值 1 20℃ -32.085 -32.11 -32.135 -32.135 2 -32.135 -32.035 -32.135 4.2讨论 两次平行的结果均符合药典中对于L-色氨酸比旋度的要求(-30.0°~-32.5°)，此实验能够为L-色氨酸的纯度测定提供一定的依据。 ( 参考文献 ) ( [1]陈荣庆，刘伟，等.L-色氨酸的研究进展[].安徽农业科学，2014，(14)：4438-4440，4443. ) ( [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].二部.北京：中国医药科技出版社，2015：388. ) 注意事项 1、本次实验所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和三级水。 2、色氨酸略溶于水(1.1g/100mL，25℃)，建议在水浴中温热溶解。建议先加入50-60mL的水，搅拌溶解大部分样品，再添加少量水至样品全部溶解，再于冰水中冷却至20℃。最后将样品液和清洗液全部转移至100mL容量瓶中，定容。也可使用超声波仪器加速溶解。 3、溶液配制好后建议在 30min 内测试完毕。 4、、可通过旋光管两侧的透光玻璃孔观察管中是否有气泡，同时检查并擦净玻璃上的水渍和污迹。 5、为旋光管更换样品液时建议将仪器的温控关闭。操作方法是将参数设置里的“温度"选项关闭。 1 前言L-色氨酸是人体和动物所必需的8种必需氨基酸之一，不能通过自身合成，只能通过食物来摄取。L-色氨酸又被称为第二必需氨基酸，目前广泛应用于医药、食品、饲料等方面。随着生产技术的不断进步，微生物法替代了传统的化学合成法和蛋白质水解法，占据了市场主导地位，主要产地集中在欧美、日本等少数地方。但目前在产业化生产L-色氨酸的过程中，均会存留少量杂质，因此下游的分离纯化工艺非常重要。比旋光度是旋光物质的重要物理常数，可以用来检测L-色氨酸的纯杂程度，进而为提升L-色氨酸的生产效率提供参考。2 仪器与试剂2.1 仪器Hanon P850 Pro全自动旋光仪