血液中酒精检测方案(气相色谱仪)

ThermoFisherSCIENTIFICThe world leader in serving science 方法开发报告顶空气相色谱法分析血液中的酒精 检测项目 血液中的酒精检测 样品基体 血液 仪器型号及配置 Triplus300+Trace1310 色谱柱及柱温 DB-FFAP， 30 m， 0.32 mm， 1.00 um 柱温：70℃(恒温8min) 检测器类型、工作参数 FID 检测器，检测器温度250℃氮气：氢气：空气=40：35：350 (mL/min) 载气类型及流速 氮气，恒流模式，流速：1.0mL/min 进样方式及进样体积 孵化炉温度：70℃ Manifold 温度：105℃传输线温度：115℃ 孵化时间：15 min 吹扫：进样后吹扫流量 30mL/min， 0.5 min 恒流进样模式 SSL进样口，进样模式： split，进样口温度：200℃，分流比30：1 进样体积：1mL(定量环) 一、样品前处理 对照液及供试液的配制 对照液：吸取 10.04mL或称取 8.008g无水乙醇标准品置于 100mL容量瓶中，添加纯净水至刻度，混匀，得 8000mg/100mL 乙醇储备液，将储备液逐级稀释得到浓度为 400mg/100mL 的对照品储备液。逐级稀释对照储备液，获得系列浓度对照工作液，浓度分别为 200mg/100mL、100mg/100mL、80mg/100mL、20mg/100mL、10mg/100mL。 内标工作液：准确称取 1.050g叔丁醇标准品(含量不小于99.5%)置于 500mL 容量瓶中，添加纯净水至刻度，混匀，得 200mg/100mL 叔丁醇标准使用液。 2.3 待测样品及加标回收率样品的制备 吸取 0.50mL 待血全血两份，分别加入样品瓶内，各加入0.10mL 叔丁醇标准使用液，密封混匀后，待进样。 0.494mL 待测全血，平行3份，分别添加6pL浓度为2000mg/100mL的乙醇标准使用液，再分别添加0.10mL叔丁醇标准使用液，按上述方法平行操作。 二、实验结果： 2.1方法的线性关系 取2.2项下的系列浓度标准溶液0.5mL，分别加入0.1mL的叔丁醇内标液，密封后混匀进样。由低浓度至高浓度依次进样检测，以乙醇峰面积和内标叔丁醇峰面积比为纵坐标，乙醇浓度为横坐标作标准曲线线性回归。结果表明，目标物乙醇和内标叔丁醇峰形良好(图1)，在10mg/100mL~200mg/100mL范围内乙醇呈良好线性关系(R’=0.9993，见图2)。 图1.乙醇(5.60min)及内标叔丁醇的色谱图(4.86min)， 浓度为10mg/100mL 图2.乙醇的线性 第2页 图3.由上而下分别为样品及加标回收率样品的色谱图 表2方法的线性关系、定量限 化合物 保留时间 线性范围 相关系数 定量限 min mg/100mL mg/100mL 乙醇 5.60 1 10.00-200.00 0.9993 10.0 2.2方法精密度和回收率的测定 按照2.3项下方法制备3份加标样品，密封后混匀进样，所得样品图见图3，结果见表2，回收率范围为91.32~115.40%，相对标准偏差 (RSD， n=3)为2.55%。回收率和精密度数据结果见表3。 表3方法回收率和精密度数据 化合物 添加水平(25 mg/100mL) 空白测得量mg/100mL 测得量mg/100mL 回收率(%) RSD (%) 乙醇 98.79 123.32 91.32% 2.55 102.18 124.44 95.80% 2.55 129.34 115.40% 2.55 3.4样品检测 取2.3项下的两份样品，放入顶空中检测血液中乙醇的含量，两份平行样品的结果分别为98.79mg/100mL和102.18mg/100mL， 根据标准取平均值，则在该样品中，其酒精含量为 100.49mg/100mL， 可定为醉驾。 四、可行性建议 本方法根据 GA/T842-2009的步骤，结合 Thermofisher 的 Triplus300 和Trace1310 气相色谱仪，对血液中的酒精进行检测，且经过验证，该方法简便、快速、准确；可供各级公安部门及司法鉴定中心参考。 海 第页 第页