咖啡中葫芦巴碱检测方案(液相色谱柱)

采用 TSKgel 色谱柱参考 NYT 3012-2016分析咖啡及制品中葫芦巴碱葫芦巴碱Trigonelline 【基本信息】 葫芦巴碱(trigonelline)，是从豆科植物蝶形亚科葫芦巴属葫芦巴千干燥种子中分离的一种生物碱。因而定名葫芦巴碱。在中医药典中，葫芦巴碱具有温肾、去寒、止痛之功效，是治疗肾脏冷虚、小腹冷痛、寒湿脚气的主要药物。在西医治疗中，葫芦巴碱主要用于治疗糖尿病，肿瘤和肝损伤等。葫芦巴碱也可从咖啡中提取。 【溶液的配制】 称取试样0.5g(其中生咖啡0.2g， 精确到0.01g)于100 mL烧杯中，加入80 mL 沸水。盖表面皿，置于电热板上煮沸提取30 min， 冷却至室温，转移到100 mL 容量瓶中，加入1mL磺基水杨酸溶液，摇匀，水定容至刻度。上清液用水相0.45 um 滤膜过滤，收集滤液上机测定。 【分析条件】 色谱柱： TSKgel Amide-80 HR (5 um， 4.6 mm I.D.×25 cm) 流动相：甲醇+水(88+12)； 流速：0.8mL/min 柱温：25℃ 检测器： UV@260 nm 进样体积：10 uL 分析结果： 图1 葫芦巴碱对照品色谱图 No. 对照品名称 保留时间(min) 理论塔板数 1 葫芦巴碱 10.34 3370 图2 咖啡提取液色谱图 No. 对照品名称 保留时间(min) 理论塔板数 1 葫芦巴碱 10.40 2940 色谱图中，咖啡提取液中葫芦巴在色谱柱上有较强的保留并与其他提取成分色谱峰有很好的分离，经计算得该咖啡样品中葫芦巴碱含量为 0.58 g/100 g. 【结论】 采用上述方法，使用 TSKgel Amide-80 HR (5 um， 4.6 mm I.D.×25 cm)色谱柱，可以满足 NYT3012-2016中对咖啡及制品中葫芦巴碱分析测定要求。 参考NYT3012-2016咖啡及制品中葫芦巴碱的高效液相色谱测定方法，采用TSKgel Amide-80HR（5um,4.6mmID×25cm）色谱柱对咖啡提取液中的葫芦巴碱进行分析，在色谱柱上有较强的保留并与其他提取成分色谱峰有很好的分离，完全可以满足标准中的分析测定要求。