肉制品中苯并[a]芘检测方案(液相色谱仪)

苯并芘又称苯并(a)芘(Benzoapyrene)，是由一个苯环和一个芘分子稠合而成的多环芳烃类化合物，具有强烈的致癌作用。其在环境中存在广泛，来源主要有两个方面：一是工业生产和生活过程中煤炭、石油和天然气等燃料不完全燃烧产生的废气，通过对水源、大气和土壤的污染，可以进入到蔬菜、水果、粮食、水产品和肉类等人类赖以生存的食物中；二是食物在熏制、烘烤和煎炸过程中，脂肪、胆固醇、蛋白质和碳水化合物等在高温条件下反应生产，尤其是当食品发生焦糊现象时，苯并芘的生成量将会比普通食物增加10~20倍。 目前，由食品污染所导致的疾病已成为全世界最为广泛关注的安全卫生问题之一，其中苯并芘的污染又最为常见和广泛。为满足对肉类食品中苯并芘的检测需要，本期依利特仪器将继续给大家带来守护餐桌上的安全之肉制品中苯并芘的检测。 表1 仪器配置 序号 名称 数量 1 荧光检测器 1台 2 P3100高压恒流泵 1台 3 O3100色柱柱恒温箱 1台 4 7725i手动进样阀 1个 5 Chromsoft色谱数据工作站 1套 6 SinoChrom ODS-BP 5pm， 4.6×150mm 1支 表2 所需试剂 序号 试剂 纯度 1 甲醇 色谱纯 2 无水硫酸钠 分析纯 3 苯 分析纯 4 环己烷 分析纯 5 二甲基甲酰胺 分析纯 6 氧化铝 中性 7 硅镁型吸附剂 60~100目 8 去离子水 18.2MQ 9 苯并芘标准品 TCI(上海) 表3 主要前处理设备 序号 名称 1 脂肪提取器 2 层析柱 3 紫外灯 4 氮吹仪 5 旋转蒸发仪 6 漩涡混合器 实验过程中其它玻璃器皿还包括容量瓶(100mL、50mL、25mL、10mL)、具塞锥形瓶(250mL)， 移液枪(0~1000uL，0~5000uL)、移液枪枪头(1mL， 5mL)、分液漏斗(250mL、500mL)一次性PVC手套、一次性口罩、进样针、滤膜、玻璃棉等若干。 实验方法 样品前处理 称取50.0g切碎混匀的试样，用无水硫酸钠搅拌，装入滤纸筒内，然后将脂肪提取器接好，加入100mL环己烷于90℃水浴上回流提取6~8h，提取液倒入250mL分液漏斗中，用6~8mL环己烷淋洗纸筒，洗液合并于250mL分液漏斗中，以环己烷饱和过的二甲基甲酰胺提取三次，每次40mL，振荡1min， 合并二甲基甲洗胺提取液，用40mL经二甲基甲酰胺饱和过的环己烷提取一次，弃去环己烷层。二甲基甲酰胺提取液合并于预先装有240mL硫酸钠溶液夜(20g/L) 的500mL分液漏斗中，混匀，静置数分钟后，用环己烷提取两次，每次100mL， 振荡3min，环己烷提取液合并于第一个500mL分液漏斗中。 2、、净化 于层析柱下端填入少许玻璃棉，先装入 5~6cm的氧化铝，轻轻敲管壁使氧化铝层填实，无缝隙，顶面平齐，再同样装入5~6cm 的硅镁型吸附剂，上面再装入5~6cm无水水酸钠，用30mL正己烷淋洗装好的层析柱，待环己烷液面流下至无水硫酸钠层时关闭活塞。 将试样环己烷提取液倒入层析柱中，打开活塞，调节流速为每分钟1mL，待环己烷液面下降至无水硫酸钠层时，用30mL苯洗脱，此时应在紫外灯下观察，!以蓝紫色荧光物质完全从氧化层洗下为止，若30mL苯不足，可适当增加苯量。收集苯液于50~60℃旋蒸或氮吹至干，然后再用1mL甲醇溶解，i涡旋 30s后，过滤即得。 3、色谱条件 流动相：甲醇/水=90/10(V/V) 色谱柱： SinoChrom ODS-BP 5um， 4.6×150mm 流速：1.0mL/min 进样量：20uL 温：35℃ 波长：激发290nm，发射430nm 图2 苯并芘标准品色谱图 目前，由食品污染所导致的疾病已成为全世界最为广泛关注的安全卫生问题之一，其中苯并芘的污染又最为常见和广泛。为满足对肉类食品中苯并芘的检测需要，本期依利特仪器将继续给大家带来守护餐桌上的安全之肉制品中苯并芘的检测。