大麻中大麻素检测方案(液相色谱仪)

Application No.： SSI-HPLC-017News http：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2019年4月400-650-0439 ApplicationNews 高效液相色谱 NO.SSI-HPLC-017 使用高通量方法和大麻效力分析仪检测大麻提取物的效力 引言 随着大麻在美国多个州的合法化，大麻分析引起了人们的重视。大麻含有多种化学生物碱，即大麻素。大多数实验室主要关注如下大麻素：四氢大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)和大麻酚(CBN)。在植物提取物中，THC和 CBD 以天然酸的式式存在，即四氢-大麻酚酸(THCA)和大麻二酚酸(CBDA)。通过暴露于热和光，它们逐渐脱羧成 THC 和 CBD。 大麻分析目的多样，其中最常见的是效力分析，以THC、CBD 和 CBN 定量为特征。本应用报告重点介绍了使用高通量 HPLC 方法和岛津大麻效力分析仪检测大麻提取物的效力。这种方法可在8分钟内检测最常用的大麻素。 大麻已在美国和哥伦比亚特区的许多州合法化，以用于药用或娱乐用途，或两者兼而有之。但根据联邦法规，拥有大麻仍是非法行为。这可能会影响大麻产品的州际运输，也会影响实验室获取检测用大麻。因此应咨询州监管机构，以满足适当的许可要求。 对于娱乐用大麻，主要关注具有精神活性的 THC。娱乐用大麻的 THC 含量较高，而 CBD 和 CBN 相对含量较低。因此高 THC 含量的大麻的价格更高。 药用大麻通常具有较高的 CBD 含量量和低的 THC含量。治疗性 CBD 可以增强药效，但对于一些患者来说，他们可能并不需要，甚至不适合使用具有精神活性 THC的大麻。患者通过使用药用大麻，可以减轻疼痛、减轻恶心和癫痫发作的严重程度。因此，THC/CBD 比率对于医务人员开具药用大麻处方十分重要。 使用标准品溶液校准 HPLC 系统 图1显示了10.0 mg/L标准品混合物的色谱图。在酸改性水和乙腈的梯度洗脱条件下，利用 C18柱在8分钟内实现分离。 图1：10.0mg/L 标准品混合物色谱图 标准品曲线 为各目标分析物制备标准曲线(图2)，标准曲线级别数为6，拟合后线性相关系数均达到最小可接受的0.999 (R2)。除 THCA 和 CBDA 外，各分析物的线性范围为0.5至100 mg/L (0.05-10%)。在许多情况下，植物材料中 THCA 和 CBDA 的含量非常高，因此这些分析物的线性范围为0.5至250 mg/L (0.05-25%)。 . Area 1250000- THCA R²=0.9992 0.0 25.0 50.0 75.0 Conc. 图2：部分标准品曲线 标准品曲线的精确度(%) 表1、2和3显示了所有分析物的低浓度(2.0mg/L)、中浓度(20 mg/L)、高浓度(70mg/L)标准品混合物的平均精确度(%)，标准曲线浓度点重复进样6次。精确度(%)的定义如下所示。 精确度(%)=Cr/Ccx100 Cr：定量计算的浓度值 Cc： 化合物表中相应含量的标准品浓度值 根据表1的结果，低定量点的所有化合物定量精确度在±10%以内 (THCA 是±19%的异常值)；中和高定量点的定量精确度在±3%以内。这证实了，通过使用相应的标准曲线可以准确量化大麻花中的活性成分。 表1：低浓度标准品精确度(%) 2 ppm 浓度(mg/L) # 名称 平均精确度(%) 1 CBDV 107.25 CBDA 105.20 3 CBGA 104.60 4 CBG 107.00 5 CBD 105.80 6 CBN 107.15 7 d9-THC 97.00 8 d8-THC 98.85 9 CBC 105.15 10 THCA 116.15 表2：中浓度标准品精确度(%) 20 ppm 浓度(mg/L) # 名称 平均精确度(%) 1 CBDV 105.69 2 CBDA 103.67 3 CBGA 103.43 4 CBG 105.55 5 CBD 105.20 6 CBN 103.83 7 d9-THC 104.40 8 d8-THC 104.71 9 CBC 103.48 10 THCA 104.07 表3：高浓度标准品精确度(%) 70 ppm 浓度(mg/L) # 名称 平均精确度(%) 1 CBDV 103.45 2 CBDA 102.82 3 CBGA 102.20 4 CBG 103.31 5 CBD 103.21 6 CBN 103.28 7 d9-THC 103.19 8 d8-THC 103.78 9 CBC 103.49 10 THCA 102.34 大麻花中大麻素的定量分析 图3显示了富含 THC 的花样品提取物的色谱图。 图3：大麻花提取物和10.0 mg/L标准品混合物的重叠色谱图 效力计算 表4显示了各化合物的定量结果以及效力计算(如本文所定义)。 %THCA=[THCA]x(DIL)x(VOL/MG)x100 效力： (%THCAx0.877)+%A9-THC [THCA]： THCA 浓度， DIL=稀释因子， VOL=外部体积 MG=干样品重量(mg)， 0.877=大麻素亏大麻酸的分子量比 # 化合物 浓度(mg/L) wt% 1 THCV 一一 -- 2 BD 0.852 0.17 3 CBG 0.555 0.11 4 CBDA 0.721 0.14 5 CBGA 0.728 0.14 6 CBN 1.411 0.28 7 D9-THC 11.389 2.28 8 D8-THC ND IND 9 CBC 0.602 0.12 10 THCA 19.533 3.90 效力 5.7% 表4：花样品定量结果 本文由美国岛津科学仪器有限公司提供。 ( 岛津企业管理(中国)有限公司 岛津(香港)有限公司 ) ( 免责声明： ) ( *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ) ( *本资料中的所有信息仅供参考， 不 予任何保证。如有变动，恕不另行通知。 ) 大麻含有多种化学生物碱，即大麻素。大多数实验室主要关注如下大麻素：四氢大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)和大麻酚(CBN)。在植物提取物中，THC 和 CBD 以天然酸的形式存在，即四氢 - 大麻酚酸(THCA)和大麻二酚酸(CBDA)。通过暴露于热和光，它们逐渐脱羧成 THC 和 CBD。大麻分析目的多样，其中最常见的是效力分析，以 THC、CBD 和 CBN 定量为特征。本应用报告重点介绍了使用高分辨率 HPLC 方法和岛津大麻效力分析仪检测大麻提取物的效力。采用上述方法可在8min内检测常用的大麻素，并且大麻素在该方法中可实现基线分离。此外，该方法还能处理越来越多的大麻目标分析物。