注射用头孢他啶中碳酸钠检测方案(二手分析仪器)

原子吸收分光光度法测定注射用头孢他啶中助溶剂碳酸钠的含量 张 冬1*，赫晓军'，苑华，付焱?(1.河北省药品检验所，石家庄市050011；2.河北医科大学，石家庄市050001) 中图分类号 R927.2；R978.1*1 文献标识码 A 文章编号 1001-0408(2011)05-0447-02 摘 要 目的：建立测定注射用头孢他啶中助溶剂碳酸钠含量的方法。方法：采用原子吸收分光光度法。光源：钠空心阴极灯，原子化器：空气-乙炔火焰原子化器，分析线：330.3nm。结果：钠元素检测浓度线性范围为56.75~425.60 ug·mL-(r=0.999 4)；平均回收率为 101.4%(RSD=3.2%)，检出限为3.2 ug·mL一'。结论：该方法灵敏度高、结果准确，可用于注射用头孢他啶中碳酸钠的含量测定。 关键词 原子吸收分光光度法；注射用头孢他啶；碳酸钠；含量测定 Content Determination of Sodium Carbonate in Ceftazidime for Injection by Atomic Absorption Spectro-photometry ZHANG Dong， HE Xiao-jun， YUAN Hua(Hebei Institute for Drug Control，Shijiazhuang 050011，China) FU Yan(Hebei Medical University，Shijiazhuang 050001，China) ABSTRACT OBJECTIVE： To develop a method for the content determination of sodium carbonate in Ceftazidime for injection.METHODS： Atomic absorption spectrophotometery was adopted. Sodium hollow cathode lamp was used as light source， air-ethyneflame atomizer was used as atomizer， and analytical line was at 330.3 nm. RESULTS： The linear range of sodium was 56.75~425.60 ug·mL(r=0.9994) with an average recovery of 101.4% (RSD=3.2%). The limit of detection was 3.2 ug·mL'.CON-CLUSION： The method is sensitive， accurate and suitable for the content determination of sodium carbonate in Ceftazidime for in-iection. KEY WORDS Atomic absorption spectrophotometry； Ceftazidime for injection； Sodium carbonate；Content determination 头孢他啶(Ceftazidine，CAZ)是葛兰素公司1983年率先推出的半合成第3代头孢菌素类抗生素，具有抗菌谱广、抗菌活性高，对多种β-内酰胺酶高度稳定的特点"，临床上用于治疗中、重度感染。其制剂为注射用头孢他啶，收载于《美国药典》31版、日抗基2000°及《中国药典》2005年版。由于头孢他啶亲水性较弱，制剂中通常加入碳酸钠作助溶剂以增加其水溶性。《美国药典》31版采用原子吸收分光光度法测定碳酸钠的含量，《中国药典》2005年版和日抗基2000均未对碳酸钠的含量进行控制。《中国药典》2005年版是通过检测注射用头孢他啶的pH值及含量均匀度来间接控制头孢他啶的纯度，不能直接检测主成分的含量。若在质量控制中增加碳酸钠的含量测定，一方面可提高质量标准，达到国外同品种药物的质控要求，另一方面可客观、准确地计算出头孢他啶的纯度，对于控制药品质量，保证用药安全、有效具有重要意义。 1仪器与试药 AA-6300原子吸收分光光度计(日本岛津公司)。 氯化钠(批号：GBW(E)060024c，含量：99.97%)、氯化钾(批号：GBW(E)060020 a，含量：99.98%)均由国家标准物质研究中心提供；注射用头孢他啶(汕头金石粉针剂厂，批号：080213，规格：每支2.0g；批号：080107，规格：每支1.5g；批号：070812，规格：每支1.0g；批号：080106，规格：每支0.5g)；头孢他啶五水物(广州白云山化学制药厂，批号：071130010，含量：按干燥品计算，含头孢他啶C，2H2NO八S为98.8%)。 ( *副主任药师 ， 硕士。 研 究方向： 药 物分析。电 话 ： 0 311- 852120 0 8-8029 。E - m ail ： mz 99@tom . c om ) 2 方法与结果 2.1 测定条件 光源：钠空心阴极灯；原子化器：空气-乙炔火焰原子化器；分析线：330.3nm。 2.2 溶液制备 由于氯化钠较之碳酸钠稳定且易贮存，因此以氯化钠作为对照品。 氯化钠贮备液：精密称取取110℃干燥2h的氯化钠对照品709.33 mg，置于250mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为氯化钠贮备液。 对照品溶液：精密量取氯化钠贮备液4、5、6mL，分别置于100 mL量瓶中，各加入硝酸10 mL，用水稀释至刻度，作为对照品溶液。 供试品溶液：精密称取本品适量(约相当于含碳酸钠13mg)，置于100mL量瓶中，加适量水溶解后，加入硝酸10 mL，用水稀释至刻度，作为供试品溶液。 空白溶液：取硝酸10 mL 置于100mL量瓶中，用水稀释至刻度，即得。 2.3 分析线的选择 钠的火焰光谱的主要谱线有589.0、330.3nm，《美国药典》31版采用589.0 nm作为分析线测定制剂中酸酸钠的含量。由于钠原子在自然界中非常活泼，当分析线为589.0nm时，检测灵敏度很高，易在火焰中电离而引起干扰效应，为此，《美国药典》在检测中加入了能提供自由电子的钾元素，以使已电离的原子重新回到基态。笔者分别对供试品溶液中钾元素的加入量进行了考察，结果显示：不加钾时，线性相关系数为0.9980， 平均回收率85.9%(RSD=15.2%)；当加入钾溶液浓度约为10pg·mL时，线性相关系数为0.9984，平均回收率92.5%(RSD=7.5%)；加入钾溶液浓度约为10 mg·mL时，线性相关系数为0.9996，平均回收率96.5%(RSD=4.3%)。方法学指标均劣于分析线为330.0nm时的试验结果。对于痕量分析，最强的吸收线应该是最适宜的，但本品的测定中碳酸钠的含量高达10%，330.3nm分析线时的检出限已可以满足需要，且灵敏度的降低一方面可以减少操作步骤，进而减少误差，另一方面也可以避免外界因素的干扰，获得更好的标准曲线。因此本研究选取干扰少而吸光度适宜的330.3 nm作为分析线。 2.4线性范围 精密量取氯化钠贮备液2、3、5、10、15mL置于100mL容量瓶中，各加入硝酸10 mL，用水稀释至刻度，作为系列浓度的对照品溶液(n=5)。照原子吸收分光光度法在330.3 nm的波长处测定吸光度，以氯化钠的浓度(c)为横坐标，吸光度(A)为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为：A=1.92×10-c+0.04×10(r=0.9994)。结果表明，钠元素检测浓度线性范围为56.75~425.60 ug·mL。 2.5回收率试验 精密称取已知含量的样品适量(约相当于含含酸钠13mg)9份，分别置于200 mL量瓶中，分别加入氯化钠贮备液4、5、6mL，各浓度3份，加水适量溶解后，加入硝酸10mL，用水稀释至刻度，依法测定，计算回收率。结果平均回收率为101.4%，RSD=3.2%，详见表1。 表1回收率试验结果 Tab 1 Results of recovery test 加人量/pg 测得量/pg 回收率/% 平均回收率/%RSD/% 56.746 4 59.4215 104.71 56.746 4 53.542 8 94.35 56.7464 55.634 6 98.04 70.9330 72.7242 102.53 70.933 0 72.8882 102.76 101.4 3.2 70.933 0 73.467 3 103.57 85.119 6 86.4701 101.59 85.119 6 86.585 1 101.72 85.1196 87.649 1 102.97 2.6 重复性试验 测定同一样品溶液6次，结果含量的RSD=1.4%。 2.7 检出限 取“2.2”项下的空白溶液连续测定11次，按下式计算检出限DLq=ko/Sq，式中：k为置信因子(通常取3)；0为测定精密度(标准偏差)；Sq为以绝对量为单位的灵敏度(即标准曲线的斜率)。结果，检出限为3.2 ng·mL。 2.8 空白干扰试验 按处方比例称取头孢他啶五水物，加水稀释至规定浓度进行测定，结果显示试液基本无吸收，与水的测定值基本相同。 样品中碳酸钠含量测定 按所建立方法测定不同生产厂家的注射用头孢他啶4批，结果见表2。 3 讨论 分析线为330.3 nm时，硝酸加入量的影响：由于330.3 nm Tab 2 Results of content determination of sodium carbon-ate in 4 batches of samples 生产厂家 规格/g 批号 碳酸钠含量/% 汕头金石粉针剂厂 2.0 080213 10.1 汕头金石粉针剂厂 1.5 080107 10.0 汕头金石粉针剂厂 1.0 070812 10.0 汕头金石粉针剂厂 0.5 080106 10.3 谱线处的检测灵敏度较低，仅为589.0 nm处的1%左右，电离干扰对其影响基本可忽略不计，所以试验中不再加入钾元素，以免产生新的干扰，仅对硝酸加人量作适当考察。将样品测定方法中加入硝酸10 mL改为加入硝酸(20→100)5 mL，结果如下：钠元素在 56.75~425.60ug·mL'浓度范围内线性关系良好，回归方程为：A=1.94×10-c+0.03×10(r=0.999 4，n=5)；取80%、100%、120%3个浓度各3份进行回收率试验，结果，平均回收率为111.3%，RSD=2.6%(n=9)；测定同一样品溶液6份，RSD=1.9%。提示硝酸加入量为10mL时，方法学验证指标优于低浓度硝酸。 目前，碳酸钠的测定可通过测定Na*及CO来实现。Na*的测定有原子吸收分光光度法、离子选择性电极法等，对于离子选择性电极法，至今还没有很理想的离子强度调节剂。CO 的测定可用酸碱滴定法、重量法等。采用滴定法，头孢他啶分子结构中含有2个氨基、2个羧基，必然干扰测定结果；若用重量法，需先生成碳酸钡后转化为硫酸钡进行测定，操作相对繁杂。文献报道的检测碳酸钠含量的方法尚有高效液相色谱-蒸发光散射检测器法，但该法的重现性较差、检测灵敏度相对较低，鉴于原子吸收分光光度法灵敏度高、选择性好、适用范围广，笔者选用了原子吸收分光光度法。 由于《中国药典》2005版已明确规定注射用头孢他啶是头孢他啶加适量碳酸钠制成的灭菌制剂，目前生产厂家没有理由加入其他钠源辅料，因此可以认为制剂中的钠来源于碳酸钠，且本方法分析线选用330.3 nm，降低检测灵敏度的同时也排除了一部分自然界中微量钠源的干扰，空白干扰试验亦证实了这一点，故可以认为选用原子吸收分光光度法测定制剂中碳酸钠的含量是可行的。 ( 参考文献 ) ( [1] 1 郭海平，周丽华 . 头孢他啶 的严重 不良 反 应[J ].中 国药事， 1 9 99，13 ( 1 ) ： 6 2. ) ( [ 2 ] ] T he U n i ted S tates Pharm a copei al Conve nt ion. 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