化妆品中游离甲醛检测方案(液相色谱仪)

检测化妆品中游离甲醛解决方案液相色谱配柱后衍生法 1范围 本方法规定了柱后衍生-高效液相色谱法测定化妆品中游离甲醛含量。 本方法适用于水剂、膏霜乳液、凝胶类化妆品中游离甲醛含量的测定。 2方法提要 样品中的游离甲醛经高效液相色谱分离，柱后衍生，在420nm波长下检测，根据保留时间定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。取 0.2g样品时，本方法对游离甲醛的检出浓度为 0.003%，，最低定量浓度为 0.005%。 3试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682 规定的一级水。 3.11甲醛标准物质水溶液，使用前按附录A 方法进行标定。 3.2磷酸，分析纯。 3.3乙酸铵，色谱纯。 3.4冰乙酸，分析纯。 3.5乙酰丙酮，分析纯。 3.6二氯甲烷，分析纯。 3.7磷酸溶液：取磷酸(3.2)2mL，缓缓加入到998mL 水中，混匀。 3.8柱后衍生溶液：称取62.5g乙酸铵(3.3)，加7.5mL冰乙酸(3.4)，5mL乙酰丙酮(3.5)，加水至1000mL，摇匀。该溶液可有效使用3天。 3.9甲醛系列标准溶液：精密量取甲醛标准物质水溶液(3.1)适量，用磷酸溶液(3.7)稀释成 1.0pg/mL、2.0pg/mL、5.0ug/mL、10.0pg/mL、20.0ug/mL、50.0ug/mL 的标准系列溶液。临用现配。 4仪器和设备 4.1高效液相色谱仪，具有全波长紫外检测器。 4.2 PCR3柱后衍生仪。 4.3天平。 4.4离心机。 4.5涡旋振荡器。 5分析步骤 5.1样品处理 称取样品0.2g(精确至0.001g)于10mL 具塞比色管中，加磷酸溶液(3.7)至刻度，涡旋处理1分钟，5000rpm 离心5min，取上清液经0.45um 微孔滤膜(水相)过滤，滤液作为待测溶液，并尽快测定。 必要时，可以取上清液加入10mL二氯甲烷(3.6)，振 摇，静置分层后取上层溶液经 0.45um微孔滤膜(水相)过滤，滤液作为待测溶液。 5.2色谱参考条件 色谱柱：C18色谱柱(250×4.6mmx5um)，或等效色谱柱： 流动相：磷酸溶液(3.7)； 流速：：11.0mL/min： 柱温：20℃； 检测波长：420nm； 进样体积：10uL； 柱后衍生溶液流速：(0.5mL/min： 衍生温度：：100℃。 5.3测定 在“5.2”项色谱条件下，取“3.9”项下的甲醛系列标准溶液分别进样，进行液相色谱分析，以系列标准溶液浓度为横坐标，9甲醛衍生物的峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，得到回归方程。 取“5.1”项下处理得到的待测溶液进样 10uL，进行色谱分析，根据保留时间和光谱图定性，测得甲醛衍生物的峰面积，根据标准曲线得到待测溶液中游离甲醛的质量浓度。按“6”计算样品中游离甲醛的含量。 6分析结果的表述 6.1计算 式中：ω(游离甲醛)――化妆品中游离甲醛的含量，，%：m――样品取样量， g； p——代入标准曲线计算得到的样品中甲醛的质量浓度，u g/mL； V——定容体积， mL。 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 6.2回收率和精密度回收率为95.3%5~112.5%，相对标准偏差小于10%。 7图谱 图1甲醛标准溶液色谱图 甲醛(4.567min) 附录A (规范性附录) 甲醛标准溶液的标定 A.1试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。 A.1.1硫酸，优级纯。 A.1.2氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠4g，用少量水溶解，再加水至100mL，混匀。 A.1.3 硫酸溶液Ⅰ：取硫酸(A.1.1)3mL，缓慢加入到97mL水中，混匀。 A.1.4 硫酸溶液Ⅱ：取取酸(A.1.1)10mL，缓慢加入到90mL水中，混匀。 A.1.5 淀粉溶液：：称取可溶性淀粉1g，用水5mL调成溶液后，加入沸水95mL，煮沸，加水杨酸0.1g或氯化锌0.4g防腐。 A.1.6 碘标准溶液：称取碘13.0g和碘化钾35g，，加水100mL，溶解后加入盐酸3滴，用水稀释至1L，过滤后转移至棕色瓶中。 A.1.7 重铬酸钾标准溶液[c(1/6K2Cr2O7)=0.1mol/L]：准确称取于120℃±2℃干燥至恒重的重铬酸钾基准物质4.9031g， 溶于水转移至1L容量瓶中，定容到刻度，摇匀。 A.1.8 硫代硫酸钠标准溶液：：称取硫代硫酸钠 (Na2S2O3.5H2O)26g或无水硫代硫酸钠16g溶于1L新煮沸放冷的水中，加入氢氧化钠0.4g或无水碳酸钠0.2g，摇匀，储存于棕色玻璃瓶内，放置两周后过滤，并按如下方法标定浓度： 准确量取重铬酸钾标准溶液(A.1.7) 25.00mL于500mL碘量瓶中，加碘化钾2.0g和硫酸溶液Ⅱ(A.1.4)20mL， 立即密塞，摇匀，于暗处放置10min。加水150mL，用硫代硫酸钠溶液(A.1.8)滴定至溶液显浅黄色时，加入淀粉溶液(A.1.5)2mL，继续滴定至溶液颜色由蓝色变为亮绿色。同时做空白试验。按下式计算硫代硫酸钠溶液的浓度： c(K2Cr207)×25.00 c(Na2S203)=- (V1-Vo) 式中： c(Na2S203)——硫代硫酸钠标准溶液的浓度，mol/L： c(K2Cr2O7)——重铬酸钾标准溶液的浓度[c(1/6K2Cr2O7)]， mol/L； V1——滴定重铬酸钾消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL： Vo——-滴定空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积， mL。 A.2标定 准确量取甲醛标准物质水溶液液量(相当于甲醛10~20mg)于250mL碘量瓶中，加入碘标准溶液(A.1.6)50.00mL， 氢氧化钠溶液(A.1.2)15mL，加塞，摇匀放置 15min，加硫酸溶液Ⅰ(A.1.3)20mL，立即塞紧，混匀，于暗处放置15min，用硫代硫酸钠标准溶液(A.1.8)滴定至溶液显淡黄色时，加入淀粉溶液(A.1.5)2mL，继续滴定至溶液的蓝色刚好褪去，记录消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积。同时做空白试验。并按下式计算甲醛的浓度： 式中： p(HCHO)—甲醛溶液的浓度分数， mg/L； V甲醛标准储备液取样体积， mL； Vo—滴定空白溶液消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积， mL； V1——-滴定甲醛溶液消耗的硫代硫酸钠标准溶液体积， mL； C -硫代硫酸钠溶液的摩尔浓度， mol/L； 15-——甲醛(1/2HCHO)摩尔质量， g/mol. 高效液相色谱-柱后衍生法测定日化用品中游离甲醛.对测定条件如流动相、色谱柱、检测波长、衍生反应器体积、衍生剂流速等进行优化.该方法加标回收率为99.4％～104.9％,相对标准偏差小于2.3％(n=5).与传统方法对比,该方法能够有效消除甲醛缓释剂、萃取剂不纯和颜色干扰的影响;可有效防止甲醛检测假阳性结果的产生,能更准确地体现样品中游离甲醛的质量分数,可用于表面活性剂及其制品中游离甲醛的检测.