百草枯和敌草快中快速分离检测方案(液质联用仪)

应用简报 Agilent农药分析、食品检测、Trusted Answers水质检测 使用 LC/MS 检测与亲水相互作用色谱(HILIC)快速分离百草枯和敌草快 Andrew Kennedy 和 Adam Bivens 安捷伦科技公司 本应用简报介绍了使用新一代 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 化学键合相与亲水相互作用色谱(HILIC) 对特别难分离的百草枯和敌草快化合物对进行分离。百草枯和敌草快上存在的两个季铵基团使这些化合物具有强极性；因此难以在反相色谱上保留或分离。以前通常使用离子对试剂来诱导这些化合物的保留。然而这种技术面临诸多局限性，例如系统污染、高背景和信号抑制，使用 HILIC 色谱柱时则无需考虑这些问题。 反相色谱使用非极性固定相，这种固定相会妨碍许多极性农药的保留和分离。离子对是保留和分离极性化合物更传统的技术。而这种技术有两项主要的缺点： 离子对试剂在使用后的很长时间内都会对 LC/MS 系统造成污染，导致高背景和色谱柱选择性发生变化 分析离子对试剂的运行模式会产生显著的背景与分析信号抑制；因此质谱分析仅限于单离子模式 相反， HILIC 技术能够保留并分离极性化合物而不会产生由离子对技术引起的问题，同时也可以采用与反相色谱相同的系统和溶剂。 ( 百草枯和敌草快上的强正电荷使其难以通过HILIC 得到分析，因为与表面硅醇基的 任何相互作用都会导致很多色谱柱上的严重拖尾和保留时间过长。新一代 AgilentInfinityLa b Poroshell 120 HILIC-Z 突破了这一限制，采用新型两性离子相，能够获 得出色的峰形。 ) 试剂与化学品 所有试剂均为 HPLC 级或更高等级。超 LC/MS 级乙腈购自 J.T Baker (CenterValley， PA， U.S.A.)。水经由 EMD MilliporeMilli-Q Integral 系统 (Darmstadt， Germany)纯化。试剂级甲酸(FA，部件号 G2453-85060)来自安捷伦科技公司。，甲酸铵、百草枯标准品和敌草快标准品购自Sigma-Aldrich (St. Louis， MO， USA)。 ( 仪器和材料 ) ( A gilent InfinityLab 接头 ) ( 色谱柱入口： Agilent QuickConnect 快速连接接头(部件号 5067-5965) ) ( 色谱柱出口： Agilent Quick Turn接头(部件号5067-5966) ) ( 安捷伦样品瓶，螺口，棕色，带书写签，经认证，2mL，100/包(部件号 5182-0716) ) ( 安捷伦固定螺口盖，带 PTFE/红色硅胶隔垫(部件号5190-7024) ) ( 安捷伦样品瓶内插管，250pL，去活 玻璃，带聚合物物支(部件号5181- 8872) ) ( Eppendorf 移液器和连续分液器 ) ( 超速离心仪(VWR， Radnor， PA， USA) ) ( 涡旋器和多管涡旋器 (VWR， Radnor， PA， USA) ) ( Agilen t InfinityLab 溶剂瓶，棕色， 1000mL ( 部件号9301-6526) ) ( Agilent InfinityLab Stay Safe 溶剂瓶安 全盖，GL45，3口，1个放空阀(部 件号5043-1219) ) ( Agilent 1290 Infini t y ⅡI二元泵 (G7120A) ) ( Agilent 1290 Infinity lI样品瓶进样器 (G7129B) ) ( Agilent 1290 Infinity ll 高容量柱温箱 (G7116B) ) ( 用于Agilent 1290 Infinity 液相色谱系列的安捷伦超低扩散工具包(部件号 5067-5189) ) ( Agilent MassHunter 工作站软件 ) ( Agilent 6470 三重四极杆液质联用 系统 ) 安捷伦喷射流电喷雾离子源 样品前处理 将百草枯和敌草快标准品与水混合至0.25mM， 无需进一步样品前处理即可直接分析。 ( 流动相前处理 ) ( 用水配制200 mM 甲酸铵储备液，并用甲酸将 pH 调节至3。将水与储备液按9：1稀释制得流动相A(水相)，将乙腈 与储备液按 9：1稀释制得流动相B(两流动相的最终离子强度均为=20mM)。 ) 仪器条件 HPLC条件 色谱柱 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z， 2.1×100mm， 2.7 pm(部件号685775-924) 流动相A 20mM甲酸铵水溶液， pH=3 流动相B 20 mM 甲酸铵， pH=3， 溶于90%乙腈溶液 流速 0.80mL/min 柱温 30°℃ 进样量 0.25pL 总运行时间 8分钟 梯度 时间 (min) %B0 801 8073 56 80 8 80 质谱条件 电离模式 ESI 正离子模式 干燥气温度 300°℃ 气体流速 7.0 L/min 雾化器 45 psi 鞘气温度 400℃ 鞘气流速 11 L/min 毛细管电压 3500V 喷嘴电压 0V 结果 采集时间 (min) ( Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 柱成功分离了难分离的百草枯-敌草快化 合物对，所用条件与溶剂不会引起离子抑 制或污染，提供了一种兼容质谱的工作 流程。 ) ( 峰能够实现基线分离，拖尾极小，表明了电中性表面的重要性以及 InfinityLabPoroshell HILIC-Z 色谱柱的优异分离性能。 ) ( 与传统的离子对方法相比，配备 InfinityLab Poroshell HILIC-Z 柱的 HILIC 工作流程可获得高质量的极性化合物色谱图，而不存 在系统污染或质谱可用性的限制。 ) 查找当地的安捷伦客户中心： www.agilent.com/chem/contactus-cn 免费专线：800-820-3278，400-820-3278(手机用户) 联系我们： LSCA-China_800@agilent.com 在线询价： www.agilent.com/chem/erfq-cn www.agilent.com 本文中的信息、说明和指标如有变更，恕不另行通知。 ( ◎安捷伦科技(中国)有限公司，2017 ) ( 5991-8830ZHCN ) 图.草枯和敌草快在配备 Agilent InfinityLab Poroshell HILIC-Z 色谱柱的 Agilent 杆液质联用系统中的分离 摘要本应用简报介绍了使用新一代 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 化学键合相与亲水相互作用色谱 (HILIC) 对特别难分离的百草枯和敌草快化合物对进行分离。百草枯和敌草快上存在的两个季铵基团使这些化合物具有强极性；因此难以在反相色谱上保留或分离。以前通常使用离子对试剂来诱导这些化合物的保留。然而这种技术面临诸多局限性，例如系统污染、高背景和信号抑制，使用 HILIC 色谱柱时则无需考虑这些问题。前言反相色谱使用非极性固定相，这种固定相会妨碍许多极性农药的保留和分离。离子对是保留和分离极性化合物更传统的技术。而这种技术有两项主要的缺点：• 离子对试剂在使用后的很长时间内都会对 LC/MS 系统造成污染，导致高背景和色谱柱选择性发生变化• 分析离子对试剂的运行模式会产生显著的背景与分析信号抑制；因此质谱分析仅限于单离子模式相反，HILIC 技术能够保留并分离极性化合物而不会产生由离子对技术引起的问题，同时也可以采用与反相色谱相同的系统和溶剂。百草枯和敌草快上的强正电荷使其难以通过 HILIC 得到分析，因为与表面硅醇基的任何相互作用都会导致很多色谱柱上的严重拖尾和保留时间过长。新一代 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 突破了这一限制，采用新型两性离子相，能够获得出色的峰形。结论Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 柱成功分离了难分离的百草枯-敌草快化合物对，所用条件与溶剂不会引起离子抑制或污染，提供了一种兼容质谱的工作流程。峰能够实现基线分离，拖尾极小，表明了电中性表面的重要性以及 InfinityLab Poroshell HILIC-Z 色谱柱的优异分离性能。与传统的离子对方法相比，配备 InfinityLab Poroshell HILIC-Z 柱的 HILIC 工作流程可获得高质量的极性化合物色谱图，而不存在系统污染或质谱可用性的限制。