牛肉片中粗蛋白检测方案(电热消解仪)

牛肉片(饲料)中的氮含量 原理 凯氏法测定样品中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，i，计算出粗蛋白含量。 二.试剂 硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。 混合催化剂：1g硫酸铜，9g硫酸钾，均为化学纯，磨碎混匀。 氢氧化钠：：化学纯，40%水溶液(m/v)。5%水溶液(m/v) 硼酸：化学纯，2%水溶液(m/v)。 混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 6) 盐酸标准溶液： c(HC1)=0.1mol/L。 9ml盐酸(分析纯)，注入1000ml 蒸馏水中。 7) 硼酸吸收液：2%硼酸溶液(20g/L)：称取100g硼酸，加水溶解后并稀释至5000mL。加入(1：3.5混合指示剂6ML)摇匀，再加入5%的氢氧化钠稀释溶液0.35ML 摇匀，颜色呈紫红色。 三仪器设备45刀四 实验室用样品粉碎剂或研钵 分析天平：感量0.0001g 沛欧红外石英消化炉 (SKD-20S2) 容量瓶 100ml 滴定管：10、25ml 消化管：300ml 沛欧全自动凯氏定氮仪(SKD-1000) 分析步骤 1 样品的消化 称取样品0.5~1g(含氮量5~80mg)准确至0.0002g，放入消化管中，加入5g混合催化剂，与样品混合均匀，再加入10ml硫酸，将消化管置于消化炉上加热，直至呈透明的蓝绿色，然后在继继加热，至少30分钟。 2 SKD-20S2消化炉 操作(6个样品和2个空白) 按”SET”键+“A/M”键3秒，跳出第二设置区程序参数修改界面。连续按“SET”键数次出来 检查“RUN”“3”，pro=“1”，再设置r1=200，T1=5分钟，c1=180度，r2=180， T2=10，C2=250度， r3=180， T3=5， C3=350度， r4=200，T4=90，c4=410 r5=0， T5=0，C5=0度。 。r32=0，t32=0，c32=0，设置好后等几秒钟，程序会自动保存。 再打开启动开关(绿开关) ， ---程序自动运行，自动结束。如果出现不运行，再检查“RUN”设置为“3”， pro=“1”。 程序段 R：斜率(min/℃) T：保温时间 C：目标温度 1 200 5 180 2 180 10 250 3 180 5 350 4 200 90 410 3 SKD-1000 全自动定氮仪 样品消化好后，冷却至室温。 蒸馏设置：碱45ml，稀释液40ml，标准酸 0.0911(mo/l)， 蒸馏功率100%，蒸馏时间6分钟，硼酸仪器自动加。 测定结果 编号 样品重量g 空白(ul) 标准酸浓度mo/I 样品消耗量ml 1 0.2121 0.12 0.0911 14.255 2 0.2145 0.12 0.0911 14.510 3 0.4263 0.12 0.0911 28.613 4 0.4651 0.12 0.0911 31.670 5 0.6344 0.12 0.0911 12.815 6 0.6188 0.12 0.0911 42.132 凯氏法测定样品中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。