抗体药物中分离纯化检测方案(核酸提取仪)

篇首语The world leader in serving science全国服务热线：8008105118 400 6505118(支持手机用户) 官方网站： www.thermofisher.cnBR32026CN1606YJ_ANTIBODY 高效、标准化、流程化 Thermo Scientific助力抗体药解决方案 全球抗体药物市场增长强劲，被业内认为是生物制药产业中最为活跃的组成部分，已成为未来生物医药领域发展的“潜力股”。随着国家医药生物产业规划升级的推动，中国的抗体药将迎来新的发展机遇期。 抗体药前期研发的核心是文库筛选，获得高特异性、高亲和力单克隆抗体。主流文库筛选有两大技术平台：噬菌体/酵母展示文库筛选和杂交瘤细胞筛选。 1、噬菌体/酵母展示文库筛选 文库筛选又称Biopanning，通过“结合-清洗-洗脱-扩增”多轮循环操作，筛选出特异性强，亲和力高的单克隆抗体。传统筛选多基于96微孔板，步骤繁琐，结果一致性差。 Kingfisher Flex磁珠纯化系统是新一代自动化噬菌体文库筛选平台，将手动筛选过程实现自动化。《抗体工程》2010版将Kingfisher Flex作为自动化文库筛选标准化流程予以推荐。美国Recombinant AntibodyNetwork成员也都采用Kingfisher Flex进行自动化文库筛选。 Kingfisher Flex磁珠纯化系统 Kingfisher Flex包含8个板位，各板位分别放置噬菌体库及用于淘洗的Wash buffer、Elution buffer， 通过96磁头实现磁珠在不同板位间的转移，实现高通量淘洗。整个过程条件可控，包括淘洗强度、温度、结合和洗脱时间等，一致性好，便于标准化操作。 Cytomat 2C TOS自动化振荡培养箱实现噬菌体扩增培养的自动化及通量的提高，专有的双磁头驱动设计保证箱体内载板架上层和下层振幅的一致性，实现良好的培养效果。 自动化振荡培养箱 一致性振幅 2、杂交瘤细胞筛选 杂交瘤细胞筛选关键是杂交瘤细胞的单克隆化，经典方法是采用有限稀释法，形成单细胞克隆，通过ELISA检测培养基上清效价，确定阳性克隆。 杂交瘤细胞快速分液 Multidrop Combi微孔板自动分液器可以实现快速的细胞分液。10秒钟即可自动完成一块96孔板每孔100pL的细胞分液，整个过程自动化、快速、一致性高。 快速自动细胞分液及培养系统 Multidrop Combi自动分液器 高通量杂交瘤细胞培养 Cytomat培养箱是基于贺利氏技术的自动化培养箱，使用Cytomat 48C可以将通量提高到1008块示准板，实现细胞培养的自动化和标准化。 高通量杂交瘤细胞培养中心 单克隆抗体效价测定 对培养后的杂交瘤细胞单克隆进行筛选，获得高亲和力、高特异性的单克隆抗体。筛选的原理基于抗原、抗体间相互作用，经典方法是基于微孔板的高通量ELISA筛选。 整个抗体筛选流程中ELISA检测通量非常大，整合Orbitor机械臂、Wellwash Versa洗板机、Multidrop Combi分液器及酶标仪的自动化ELISA检测系统，可实现自动化高通量的ELISA检测。 高通量ELISA检测系统 Varioskan LUX检测平台 多功能酶标仪Varioskan LUX作为通用检测平台，可进行包括光吸收、荧光、化学发光、时间分辨荧光、HTRF、FRET、Alpha等多种方式检测。例如PD1/PDL1相互作用研究就可以通过Varioskan LUX的HTRF检测功能来实现。 Varioskan LUXPD1/PDL1抑制剂筛选 3、单克隆抗体热稳定性测定 抗体蛋白热稳定性是一个重要检测指标。借助Protein thermal shift分析技术通过Tm值的变化可以直观判定抗体蛋白的热稳定性。QuantStudio7Flex实时荧光定量PCR系统及其配套的Protein Thermal Shift试剂及软件可以很好的检测抗体蛋白Tm值的变化，以及促进蛋白稳定性的缓冲液条件的优化。 1、生产： 对筛选出的单克隆抗体噬菌体或杂交瘤细胞，将抗体基因转入到生产型细胞表达株，如CHO细胞进行大规模的培养和抗体表达，建议采用一次性生物反应器、一次性发酵罐进行生产。 一次性生物反应器：适用于动物细胞、悬浮型细胞的培养，可用于批次、补料和灌流培养。 一次性生物发酵罐：适用于要求较高的微生物发酵，易于从玻璃罐迅速放大到300L规模，适合新药平台。 一次性生物反应器、一次性生物发酵罐 离心机：从中试到放大生产，需要有强大的离心设备。 Sorvall BIOS 16大容量离心机专为生物制药生产及GMP量身定制，具有腔门自动开启及关闭的Auto-Door功能，实现自动化控制；具有远程数据监控及原始数据追溯的功能，实现数字化管理； Centri-Touch高灵敏度液晶触控屏控制功能，增加了易用性。 质控检测试剂盒： ·MycoSEQ 宿主支原体检测 ·ViralSEQ 病毒检测 ·MicroSEQ 微生物测定 ·GlycanAssure 糖型分析 · resDNASEQ 宿主细胞DNA残留定量 ·ProteinSEQ 蛋白A和CHO宿主蛋白残留定量 Kingfisher Flex磁珠纯化系统 基于磁珠法的Kingfisher Flex磁珠纯化系统可进行多种质控检测样品的高通量自动化制备，包括DNA残留、Protein A残留、HCP(宿主细胞蛋白)残留检测及支原体检测等。 上海浦东新金桥路27号7号楼 广州市东风中路410-412号 时代地产中心3001-05室 卓越大厦3109室 武汉武汉东湖高新技术开发区高新大道858号A7楼 北京 成都 香港 北京市安定门东大街28号 成都市武侯区临江西路1号 香港新界沙田，沙田乡事会路138号 雍和大厦西楼7层 锦江国际大厦1406室 新城市中央广场第一座九楼911-915室 1、生产： 对筛选出的单克隆抗体噬菌体或杂交瘤细胞，将抗体基因转入到生产型 细胞表达株，如CHO细胞进行大规模的培养和抗体表达，建议采用一 次性生物反应器、一次性发酵罐进行生产。2、质控： 对获得的单克隆抗体药物需要进行一系列的质控检测，包括宿主细胞 DNA残留检测、宿主细胞蛋白残留检测、微生物检测、内毒素检测、 纯度检测等，以达到FDA/CFDA的监管要求。质控检测试剂盒：   • MycoSEQ 宿主支原体检测   • ViralSEQ 病毒检测   • MicroSEQ 微生物测定   • GlycanAssure 糖型分析   • resDNASEQ 宿主细胞DNA残留定量   • ProteinSEQ 蛋白A和CHO宿主蛋白残留定量Kingfisher Flex磁珠纯化系统基于磁珠法的Kingfisher Flex磁珠纯化系统可进行多种质控检测样品的 高通量自动化制备，包括DNA残留、Protein A残留、HCP(宿主细胞蛋 白)残留检测及支原体检测等。