阿维菌素中定性定量分析检测方案(液相色谱仪)

「应用纪要WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 「应用纪要] 利用ESCi多功能源中的模拟APCI功能定量分析阿维菌素 黄金昌崔腾飞张晓晓 华东区应用技术服务沃特世科技(上海)有限公司 前言 阿维菌素是从链霉菌的发酵产物中分离出来的十六元大环内酯类抗生素，是一种被广泛使用的农用或兽用杀菌、杀虫、杀螨剂，属于剧毒农药。目前市售阿维菌素农药主要含有B1a和B1b两种杀虫成分，其中B1a不低于90%、B1b不超过5%，通常以B1a的含量来标定。 阿维菌素的LC/MS/MS检测一般采用ESI+模式，但近年来某些领域的国标明确指出需要使用APCI模式，定量限要求为5 ng/mL(国标GB23200.20-2016)。本实验建立一种使用ESCi多功能源中的模拟APCI功能定量分析阿维菌素的方法，阿维菌素的定量检测限低于1ng/mL(仪器灵敏度)，可以满足国标检测要求。 ESCi电离源是沃特世串联四极杆系统标配的多功能电离源，除具有ESI独立工作模式外、还有模拟APCI独立工作模式及ESI和模拟APCI交替工作模式，其中的模拟APCI功能仅需要在ESCi多功能源中插入一根电晕针即可实现。 图1.阿维菌素结构式。 实验部分 LC条件 LC系统： ACQUITYUPLC I-Class 色谱柱： ACQUITYUPLC BEH C，。 (2.1×50 mm， 1.7 um) 柱温： 30°C 进样量： 10 pL 流动相A： H，O 流动相B： MeOH 梯度程序如表1所示 时间 流速 (min) (mL/min) A% B% 0.0 0.5 90.0 10.0 1.0 0.5 1.0 99.0 2.0 0.5 1.0 99.0 2.1 0.5 90.0 10.0 3.0 0.5 90.0 10.0 MS条件 串联四极杆系统：Xevo TQD 电离模式： 模拟APCI- Corona电压： 1.5kV 脱溶剂气： 1000 L/h 锥孔气： 50 L/h 脱溶剂气温度： 550°C 源温度： 150°c 离子对信息如表2所示 化合物 Cone电压碰撞能 名称 MRM通道 (V) (eV) 871.3>565.2 阿维菌素 (定量) 70 25 871.3>228.9 35 (定性) 70 表2.阿维菌素的质谱参数。 结果与讨论 电离极性的选择 本实验对比了APCI正负电离模式下的准分子离子峰及其信号响应，如图2所示。在正离子模式下，即使与5mM醋酸铵溶液混合进样，准分子离子也基本没有[M+H]+或[M+NH]+离子，而大多为[M+Na]+或[M+K]+离子，但[M+Na]+或[M+K]+离子信号强度通常不稳定，易受基质的影响，而且难以打碎，所以不建议用于定量分析。而在负离子模式下， [M-H]离子响应很好，而且容易得到稳定的碎片，所以本实验最终选择APCI负离子模式用于定量分析。 图2.优化母离子时不同模式下的质谱MCA图。上图为APCI负模式的MCA图，下图为APCI正模式的MCA图(与5mM醋酸铵混合进样)。 工作曲线与线性考察 阿维菌素在1-100 ng/mL线性范围内，线性良好，线性相关系数R2>0.99(如图3所示)； 1ng/mL浓度下，两个离子对的信噪比皆大于20(响应值和信噪比见图4)，国标GB23200.20-2016中要求的定量限为5 ng/mL，所以Xevo TQD完全满足国标检测要求。 图3.阿维菌素1-100 ppb标准工作曲线。 图4.定量限1ppb阿维菌素的色谱图与信噪比。 结论 本应用纪要建立了一种使用ESCi多功能电离源中的模拟APCI电离功能定量分析阿维菌素的方法， 仪器灵敏度为1ng/mL(定量限)，可以满足国标对该项目的检测要求。 ESCi多功能源是沃特世专属并标配的离子源，除了ESI独立工作模式外、它还有模拟APCI独立工作模式及ESI和APCI交替工作模式，用多功能源中的模拟APCI功能，用户无需另配APCI探针，只需插入一根电晕针即可实现，方便快捷。 扫一扫，关注沃特世微信 Waters 沃特斯中国有限公司 沃特世科技(上海)有限公司 北京：010-5209 3866 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 上海：021-6156 2666 广州：020-28296555 成都：028-67653588 香港：852-29641800 免费售后服务热线：800(400)8202676Www.waters.com 利用ESCi多功能源中的模拟APCI功能定量分析阿维菌素 Waters和The Science of What’s Possible是沃特世公司的注册商标。所有其他的商标属于各自的所有者。@沃特世公司 本应用纪要建立了一种使用ESCi多功能电离源中的模拟APCI电离功能定量分析阿维菌素的方法， 仪器灵敏度为1 ng/mL(定量限)，可以满足国标对该项目的检测要求。