畜牧产品中5种性质不同的抗生素与激素检测方案(液质联用仪)

「应用纪要WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 「应用纪要1 I Class/TQ-XS同时检测5种性质不同的抗生素与激素 张晓晓黄金昌刘咏梅 华东区应用技术服务，沃特世科技(上海)有限公司 摘要 抗生素在畜牧中的滥用会导致畜牧产品的污染，最终会通过食物链在人体内蓄积，并且这些药物具有使人体产生过敏反应和抗药性等副作用；性激素是人体内存在的正常物质，若从体外大量摄入性激素，则会引起机体内激素分泌活动的减少，长期摄入还会造成体内激素比例失调；性激素类固醇属于弱致癌物质，长期使用危及人体的健康，甚至有致命危害，因此，监测多种兽药及激素的残留对保证人类安全具有积极意义。 当前，现有的一些标准对动物源性食品中的抗生素类化合物，如：羧苄西林(2 ug/kg)、头孢哌酮(2pg/kg)、苯丙酸诺龙(1ug/kg)及激素类化合物己烷雌酚(0.4 ug/kg)已经有了相应的限量标准，但对这些禁用药物更高灵敏度的检测和监控依然具有深远的现实意义。 本文建立了一种通过正、负极性切换，同时分析检测这5种化合物的高灵敏度的液质联用分析方法，兼顾了不同化合物化学性质的差异，对于兽药及激素残留进行痕量检测，为居民关心的食品安全问题提供更好的保障。 进样量： 5pL 时间 流速 A% B% 梯度 (min) (mL/min) 曲线 初始 0.5 95 5 0.6 0.5 95 5 6 2.5 0.5 5 95 6 3.5 0.5 5 95 6 3.6 0.5 95 5 6 5 0.5 95 5 6 表1.流动相洗脱程序。 质谱条件 离子源： ESI+/ESI 采集方式： MRM 离子源温度： 150°C 脱溶剂温度： 550°C 脱溶剂气流速： 1100L/H 锥孔气： 150 L/H 碰撞气流速： 0.15 mL/min 化合物 电离 模式 母离子 子离子 锥孔 电压 碎裂能 羧苄西林 ESI+ 379 160(定量) 6 12 Carbennicilin ESI+ 220(定性) 6 12 Cefoperazone ESI+ 646 143(定量) 30 36 头孢哌酮 ESI+ 530(定性) 30 10 ESI+ 125(定量) 22 64 头孢曲松 Ceftriaxone ESI+ 555 167(定性) 22 32 苯丙酸诺龙 Nandrolone ESI+ 407 105(定量) 30 28 phenylpropionate ESI+ 257(定性) 30 15 己烷雌酚 Hexoestrol ESI- 269 119(定量) 38 38 ESI- 134(定性) 38 16 表2.各化合物MRM信息。 结果与讨论 方法的优化 因五种激素化合物的性质各不相同，羧苄西林在甲酸铵系统里色谱没保留(如图1所示)，而头孢曲松在甲酸系统里几乎没有响向信号(如图2所示)，而其他化合物在甲酸系统里信号明显增强。故为兼顾所有化合物，最终流动相体系选择纯水作为水相流动相，使每种化合物都有一个相对不错的表现。 图1.羧苄西林在不同系统的色谱保留。 仪器灵敏度 图3为0.01ng/mL浓度的混标溶液，各个化合物的定量MRM离子对的响应情况(柱上进样量50 fg)， 可见，头孢曲松基本已达到最低定量限，而其他四个化合物的仪器灵敏度还可以向下延伸，达到几个fg。如果使用不同的方法，分别分析这5个化合物，选择各自更适合的流动相系统，仪器灵敏度还可以更高。 图3.0.01ng/mL化合物混标溶液中各化合物的信号响应，进样量5pL。 线性范围 五种化合物在0.01-10ppb范围内，线性良好，线性相关系数R2皆大于0.99，详见下图。 0.1ng/mL的混标溶液，进样5pL，柱上进样量500 fg， 连续进样6针，相对标准偏差如表3所示。 化合物 %RSD 羧苄西林 Carbennicilin 2.47 头孢哌酮 Cefoperazone 3.27 头孢曲松 Ceftriaxone 2.64 苯丙酸诺龙 Nandrolone phenylpropionate 1.59 己烷雌酚 Hexoestrol 1.80 表3.5种化合物混标， 500 fg柱上上样量，连续6针进样的数据稳定性。 结论 本实验中使用UPLC/XEVO TQ-XS 建立了一种同时检测羧苄西林、头孢哌酮、头孢曲松、苯丙酸诺龙、己烷雌酚等5种化合物的定量分析方法；在兼顾这5种化合物不同化学性质的前提下，达到了较高的灵敏度，远低于目前行业标准对其残留限量的要求，数据稳定重现，为居民日益关注的食品安全问题加上了又一道安全防线。 扫一扫，关注沃特世微信 Waters 沃特斯中国有限公司沃特世科技(上海)有限公司 北京：010-52093866 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 上海：021-61562666 广州：020-28296555 成都：028-67653588 香港：852-29641800 免费售后服务热线：800(400)8202676Www.waters.com I Class/TQ-XS同时检测种性质不同的抗生素与激素 lass/TQ-XS同时检测种性质不同的抗生素与激素 本文建立了一种通过正、负极性切换，同时分析检测这5种化合物的高灵敏度的液质联用分析方法，兼顾了不同化合物化学性质的差异，对于兽药及激素残留进行痕量检测，为居民关心的食品安全问题提供更好的保障。