蔬菜中久效磷检测方案(气质联用仪)

SSL-CA09-784Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-034 田岛津全球应用技术开发支持中心咨询电话：021-34193996上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋http：//www.shimadzu.com.cn PTV-GC-MS/MS 法快速测定蔬菜中的54种农药残留 GCMSMS-034 摘要： 结合 QuEChERS 方法与程序升温进样-气相色谱串联二级质谱 (PTV-GC-MS/MS) 建立了快速检测蔬菜 中54种农药残留同时检测的分析方法。结果表明，54种农药残留在一定浓度范围内线性关系良好，相关系数(r²)大于0.991。在3种不同样品基质中10 pg/kg、20 ug/kg、100 ug/kg下的农残加标回收均在70%~130%之间，相对标准偏差(RSD%)为0.3~19.6%，方法定量限为2.0~10.0 ug/kg。结果表明，该方法简单、快速，灵敏、准确，耐用性好。适用于大批量样品的多残留快速筛查。 关键词：PTV-GC-MS/MS QuEChERS 方法农药残留蔬菜 QuEChERS 方法在2003年由美国的 Anastassiades开发，因其快速、简单、便宜、耐用和安全，已成为蔬菜中农药残留的最常用的前处理方法之一。 本文采用 QuEChERS 前处理方法，结合岛津程序升温进样-三重四级杆气相色谱质谱仪(PTV-GC-MS/MS)建立了快速检测蔬菜中54种农药残留同时检测的分析方法。其中程序升温 (PTV) 进样口的溶剂消除不分 实验部分 1.1仪器 三重四极杆气质联用仪： GCMS-TQ8030(配 PTV进样口) 1.2分析条件 色谱柱： Rxi-5 Sil ms， (30 mx0.25 mm×0.25 um)进样口温度程序：65℃(1 min)_(200℃ /min)_250℃(15 min) 分流阀程序： 柱温程序：40℃(4min) _25℃ /min_125℃_10℃ /min_300℃ (5 min) 恒线速度方式：36.2 cm/sec 进样量： 2uL 接口温度：280℃ 离子源温度：200℃ 检测器电压：调谐电压 +0.6 kv 溶剂延迟时间：7 min 采集方式：MRM，特征离子见表1 流进样模式可以在进样时低温去除乙腈，以提高色谱柱耐用性。另外，与单级质谱相比，三重四极杆串联质谱具有抗干扰能力强、灵敏度高和高通量离子传输效率等特点，这使其在复杂基质背景下仍能完成目标化合物的准确鉴定。该方法具有简单、快速、灵敏、可靠及耐用性好等特点，完全满足我国法规对蔬菜中农药残留限量的要求。 1.3样品前处理 前处理条件见下图1。 图1前处理流程图 表1 农药组分保留时间及MRM参数 No. 中文名称 CAS号 英文名称 保留时间 定量离子对 CE 定性离子f对 CE 甲胺磷 10265-92-6 Methamidophos 9.667 141.0>95.0 8 141.0>126.0 4 2 敌敌畏 62-73-7 Dichlorvos 9.853 185.0>93.0 14 185.0>109.0 14 氧化乐果 1113-02-6 Omethoate 13.686 156.0>110.0 8 156.0>141.0 4 4 灭线磷 13194-48-4 Ethoprophos 14.099 200.0>158.0 6 200.0>114.0 14 5 久效磷 6923-22-4 Monocrotophos 14.593 127.1>109.0 12 127.1>95.0 16 6 治螟磷 3689-24-5 Sulfotep 14.627 322.0>202.0 10 322.0>294.0 4 7 甲拌磷 298-02-2 Phorate 14.776 260.0>75.0 8 260.0>231.0 4 8 alpha-六六六 319-84-6 alpha-HCH 14.948 218.9>182.9 8 218.9>144.9 20 9 乐果 60-51-5 Dimethoate 15.18 125.0>79.0 8 125.0>47.0 14 10 beta-六六六 319-85-7 beta-HCH 155 218.9>182.9 8 218.9>144.9 20 11 gamma-六六六 58-89-9 gamma-HCH 15.635 218.9>182.9 8 218.9>144.9 20 12 特丁硫磷 13071-79-9 Terbufos 15.645 231.0>174.9 14 231.0>128.9 26 13 五氯硝基苯 82-68-8 Quintozene 15.73 294.8>236.8 16 294.8>264.8 12 14 地虫磷 944-22-9 Fonofos 15.762 246.0>109.1 18 246.0>137.1 6 15 内嘧霉胺 53112-28-0 Pyrimethanil 15.83 198.1>183.1 14 198.1>158.1 18 16 二嗪农 333-41-5 Diazinon 15.836 304.1>179.1 10 304.1>162.1 8 17 磷胺 13171-21-6 Phosphamidon-1 15.909 264.1>127.1 14 264.1>193.1 8 18 delta-六六六 319-86-8 delta-HCH 16.115 218.9>182.9 10 218.9>144.9 20 19 磷胺 13171-21-6 Phosphamidon-2 16.651 264.1>127.1 14 264.1>193.1 8 20 乙烯菌核利 50471-44-8 Vinclozolin 16.841 285.0>212.0 12 285.0>178.0 14 21 甲基对硫磷 298-00-0 Parathion-methyl 16.874 263.0>109.0 14 263.0>136.0 8 22 杀螟硫磷 122-14-5 Fenitrothion 17.405 277.0>260.0 6 277.0>109.1 14 23 马拉硫磷 121-75-5 Malathion 1756 173.1>99.0 14 173.1>127.0 6 24 倍硫磷 55-38-9 Fenthion 17.775 278.0>109.0 20 278.0>125.0 20 25 毒死蜱 2921-88-2 Chlorpyrifos 17.806 313.9>257.9 14 313.9>285.9 8 26 对硫磷 56-38-2 Parathion 17.829 291.1>109.0 14 291.1>137.0 6 27 三氯杀螨醇 0-00-0 Dicofol deg. 17.869 250.0>139.0 14 250.0>215.0 8 28 三泰芬 43121-43-3 Triadimefon 17.906 208.1>181.0 39 beta-硫丹 33213-65-9 beta-Endosulfan 20.362 338.9>160.0 18 338.9>266.9 8 40 三唑磷 24017-47-8 Triazophos 20.71 257.0>162.0 8 257.0>134.0 22 41 异菌脲 36734-19-7 Iprodione 21.797 314.0>245.0 12 314.0>56.0 22 42 联苯菊酯 82657-04-3 Bifenthrin 21.969 181.1>166.1 12 181.1>153.1 8 43 亚胺硫磷 732-11-6 Phosmet 22.041 160.0>133.0 14 160.0>77.0 24 44 甲氰菊酯 39515-41-8 Fenpropathrin 22.121 265.1>210.1 12 265.1>172.1 14 45 伏杀磷 2310-17-0 Phosalone 22.711 182.0>111.0 14 182.0>138.0 8 46 氯氟氰菊酯-1 68085-85-8 Cyhalothrin-1 22.747 197.0>161.0 8 197.0>141.0 12 47 氯氟氰菊酯-2 68085-85-8 Cyhalothrin-2 22.941 197.0>161.0 8 197.0>141.0 12 48 氯菊酯 52645-53-1 Permethrin-1 23.716 183.1>168.1 14 183.1>165.1 14 49 氯菊酯-2 52645-53- Permethrin-2 23.834 183.1>168.1 14 183.1>165.1 14 50 哒螨灵 96489-71-3 Pyridaben 23.895 147.1>117.1 22 147.1>132.1 14 51 蝇毒磷 56-72-4 Coumaphos 24 362.0>109.0 16 362.0>226.0 14 52 氟氯氰菊酯-1 68359-37-5 Cyfluthrin-1 24.276 226.1>206.1 14 226.1>199.1 6 53 氟氯氰菊酯-2 68359-37-5 Cyfluthrin-2 24.356 226.1>206.1 14 226.1>199.1 6 54 氟氯氰菊酯-3，4 68359-37-5 Cyfluthrin-3，4 24.47 226.1>206.1 14 226.1>199.1 6 55 氯氰菊酯-1 52315-07-8 Cypermethrin-1 24.597 163.1>127.1 6 163.1>91.0 14 56 氯氰菊酯-2 52315-07-8 Cypermethrin-2 24.685 163.1>127.1 6 163.1>91.0 14 57 氯氰菊酯-3，4 52315-07-8 Cypermethrin-3，4 24.78 163.1>127.1 6 163.1>91.0 14 58 氟氰戊菊酯-1 70124-77-5 Flucythrinatel 24.794 199.1>157.1 10 199.1>107.1 22 59 氟氰戊菊酯-2 70124-77-5 Flucythrinatee 24.987 199.1>157.1 10 199.1>107.1 22 60 氰戊菊酯-1 51630-58-1 Fenvalerate-1 25.622 419.1>225.1 6 419.1>167.1 12 61 氟胺氰菊酯-1 69409-94-5 Fluvalinate-1 25.795 250.1>55.0 20 250.1>200.0 20 62 氰戊菊酯-2 51630-58-1 Fenvalerate-2 25.854 419.1>225.1 6 419.1>167.1 12 63 氟胺氰菊酯-2 69409-94-5 Fluvalinate-2 25.86 250.1>55.0 20 250.1>200.0 20 64 苯醚甲环唑-1 119446-68-3 Difenoconazole-1 26.189 323.0>265.0 14 323.0>202.0 28 65 苯醚甲环唑-2 119446-68-3 Difenoconazole-2 26.276 323.0>265.0 14 323.0>202.0 28 66 溴氰菊酯-1 52918-63-5 Deltamethrin-1 26.289 252.9>93.0 20 252.9>171.9 8 67 溴氰菊酯-2 52918-63-5 Deltamethrin-2 结果讨论 2.1标准曲线 采用空白菠菜提取液(按1.3步骤进行样品前处理)分别准确配制54种农药浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0 ug/L的系列标准溶液，，以峰面积(Y)对质量浓度(X， ug/L)做回归曲线，得回归方程Y=aX+b，54种农药线性相关系数见表2，部分农残的标准曲线如下图2所示。 图2 部分农药的标准曲线 表2 各组分的线性相关系数 No. 名称 相关系数r² No. 名称 相关系数r² No. 名称 相关系数r² 甲胺磷 0.999 19 甲基对硫磷 0.997 37 异菌脲 0.999 2 敌敌畏 0.999 20 杀螟硫磷 0.998 38 联苯菊酯 0.994 氧乐果 0.998 21 马拉硫磷 0.995 39 亚胺硫磷 0.998 灭线磷 0.986 22 倍硫磷 0.99 40 甲氰菊酯 0.999 5 久效磷 0.998 23 毒死蜱 0.995 41 伏杀硫磷 0.998 6 治螟磷 0.999 24 对硫磷 0.999 42 哒螨灵 0.998 7 甲拌磷 0.999 25 三唑酮 0.999 43 蝇毒磷 0.998 α-六六六 0.999 26 三氯杀螨醇 0.998 44 磷胺 0.999 乐果 0.999 27 水胺硫磷 0.999 45 硫丹 0.999 10 β-六六六 0.998 28 甲基异柳磷 0.996 46 氯氟氰菊 0.996 11 y-六六六 0.999 29 氟虫腈 0.998 47 氯菊酯 0.999 12 特丁硫磷 0.999 30 硫环磷 0.998 48 氟氯氰菊 0.997 13 五氯硝基苯 0.998 31 稻丰散 0.996 49 氯氰菊酯 0.997 14 地虫硫磷 0.999 32 喹硫磷 0.998 50 氟氰戊菊 0.996 15 嘧霉胺 0.991 33 腐霉利 0.999 51 氰戊菊酯 0.996 16 二嗪磷 0.998 34 杀扑磷 0.999 52 氟胺氰菊 0.993 17 8-六六六 0.996 35 丙溴磷 0.999 53 苯醚甲环 0.997 18 乙烯菌核利 0.999 36 三唑磷 0.999 54 溴氰菊酯 0.993 2.2方法的定量限、添加回收率及精密度 本文采用基质匹配标准溶液外标法定量，应用1.3节的样品前处理方法在菠菜、豇豆、韭菜等3种空白基质中添加54种农药进行回收率试验，添加水平为10、20、100 ug/kg，每个添加水平重复测定5次，54种农药的回收率均在70~130%间， RSD%在0.3~19.6%间。表2为菠菜、豇豆、韭菜基质3个添加水平的平均回收率及RSD。本实验通过向菠菜空白基质中添加多个较低水平的农药混合标准溶液分别进行基进加标试验，所得溶液经 GC-MS/MS分析，取各农药的信噪比最接近10时的浓度来推测计算该农药的定量限(LOQ，N=3)，结果见表2。本方法的定量限范围是2.0~10.0 ug/kg。符合国内法规残留限量要求。 表33菠菜、豇豆、韭菜基质3个添加水平的平均回收率及RSD% LOQ 菠菜基质回收率(RSD/%) 豇豆基质回收率(RSD/%) 韭菜基质回收率(RSD/%) No. 名称 10 20 100 10 20 100 10 20 100 (ug/kg) ug/kg ug/kg ug/kg ug/kg ug/kg ug/kg ug/kg ug/kg ug/kg 90.5 101.5 86.5 83.1 111.0 86.3 88.6 101.6 91.5 1 甲胺磷 4.0 (6.9) (7.4) (5.7) (8.2) (4.8) (2.8) (1.2) (5.4) (6.4) 97.9 98.5 89.0 99.6 1208 95.7 83.2 93.8 98.5 2 敌敌畏 4.0 (2.9) (3.9) (6.4) (7.9) (2.1) (3.8) (3.6) (5.6) (4.2) 90.6 103.9 84.8 100.1 111.0 96.7 98.6 96.1 93.1 3 氧乐果 2.0 (2.2) (4.1) (6.6) (4.4) (2.8) (1.2) (6.0) (5.2) (6.5) 107.4 105.9 91.7 88.3 1124 96.7 99.5 92.3 90.9 4 灭线磷 2.0 (6.0) (6.4) (6.9) (3.1) (5.5) (3.1) (4.2) (4.4) (11.2) 5 98.8 103.5 86.8 92.4 1058 97.9 100.9 91.6 91.2 久效磷 2.0 (3.4) (7.2) (6.6) (8.7) (4.0) (1.3) (6.2) (4.2) (7.9) 6 8.0 92.6 102.4 94.3 87.2 1073 93.5 90.6 92.8 88.1 治螟磷 (9.2) (8.5) (8.2) (8.5) (9.6) (4.3) (11.7) (7.2) (13.2) 7 8.0 110.1 99.8 93.5 89.8 1097 98.6 88.8 104.7 92.4 甲拌磷 (7.5) (12.4) (7.9) (4.2) (7.6) (5.6) (5.4) (9.9) (8.7) 8 8.0 100. 114.5 94.9 94.4 112.0 94.7 104.7 91.3 95.6 α-六六六 (6.2) (3.4) (7.7) (5.5) (4.8) (1.9) (4.0) (4.2) (6.9) 9 8.0 116.2 112.7 93.9 94.4 112.2 97.1 98.6 90.6 92.5 乐果 (7.2) (7.1) (3.3) (6.2) (4.0) (2.8) (2.6) (8.4) (3.3) 10 8.0 85.6 103.4 93.5 78.3 1209 95.1 105.0 88.5 96.6 β-六六六 (6.9) (6.5) (6.9) (10.7) (3.4) (4.5) (8.0) (8.7) (12.1) 11 8.0 113.4 103.9 92.8 87.8 114.9 97.6 90.0 97.9 98.0 y-六六六 (8.6) (7.8) (7.5) (7.7) (8.0) (1.7) (15.5) (9.7) (5.3) 18 4.0 96.6 104.6 93.3 74.6 1089 99.4 105.1 89.1 95.2 乙烯菌核利 (5.5) (6.1) (6.8) (3.2) (1.2) (3.9) (4.5) (8.3) (13.0) 19 115.4 101.3 87.9 82.4 112.6 94.9 102.8 90.9 86.2 甲基对硫磷 2.0 (3.7) (3.5) (6.2) (4.5) (2.7) (3.8) (4.0) (6.1) (14.5) 20 83.4 104.3 87.4 77.0 1162 98.1 90.8 92.5 91.9 杀螟硫磷 2.0 (3.8) (5.1) (5.6) (6.2) (2.0) (0.8) (6.2) (7.6) (13.8) 21 90.1 108.8 90.5 80.1 1126 99.2 98.8 85.5 93.3 马拉硫磷 2.0 (7.2) (1.7) (5.7) (3.9) (3.4) (2.7) (5.0) (6.5) (12.7) 22 91.4 102.6 87.6 82.3 1012 98.7 100.1 94.0 95.1 倍硫磷 2.0 (17.1) (6.0) (5.2) (5.9) (6.9) (2.0) (5.0) (7.0) (10.5) 23 104.6 107.0 90.5 72.5 113.0 97.5 98.1 92.3 96.9 毒死蜱 4.0 (5.1) (5.7) (5.7) (5.7) (3.3) (3.8) (4.8) (6.3) (13.4) 24 106.9 104.3 87.9 85.4 1060 96.1 99.9 100.9 88.7 对硫磷 2.0 (11.8) (2.5) (8.1) (5.3) (3.8) (2.1) (4.0) (5.0) (17.4) 25 91.6 108.5 90.8 85.9 111.4 98.1 95.4 88.0 97.5 三唑酮 2.0 (4.3) (2.5) (5.0) (6.0) (2.5) (1.4) (4.1) (5.6) (7.7) 26 96.7 106.4 88.8 91.9 109.1 99.2 104.9 96.1 97.3 三氯杀螨醇 2.0 (5.1) (2.7) (5.0) (7.0) (2.2) (1.8) (4.0) (3.8) (7.1) 27 水胺硫磷 4.0 93.7 110.7 91.2 83.3 99.1 97.7 101.2 88.3 89.6 (6.3) (1.8) (6.1) (4.9) (3.9) (1.8) (5.2) (6.7) (7.3) 28 2.0 91.9 107.4 92.0 81.3 105.1 98.8 99.8 87.6 97.8 甲基异柳磷 (3.1) (3.3) (6.3) (6.4) (8.2) (2.6) (4.9) (5.6) (11.0) 29 硫环磷 4.0 95.9 87.9 88.3 108.2 944 100.2 83.7 105.4 88.0 (7.7) (14.5) (6.1) (8.0) (3.8) (1.1) (5.0) (8.1) (11.3) 97.5 104.2 85.3 101.9 101.7 101.5 91.9 100.9 993 98.5 101.0 89.8 96.6 41 伏杀硫磷 2.0 (2.3) (1.8) (3.0) (5.9) (4.5) (1.4) (2.4) (1.2) (4.3) 101.7 105.4 92.9 104.9 101.1 98.1 102.3 91.5 97.1 42 哒螨灵 2.0 (2.7) (3.0) (2.4) (5.2) (3.9) (1.1) (1.9) (1.7) (4.1) 100.5 101.8 90.4 107.1 98.7 99.5 92.2 94.5 94.5 43 蝇毒磷 2.0 (2.2) (4.3) (4.5) (7.0) (5.1) (0.3) (5.6) (3.2) (3.7) 44 90.5 108.0 87.8 93.9 1073 97.8 94.9 82.7 91.1 磷胺 4.0 (2.6) (2.1) (5.2) (6.1) (2.8) (2.5) (5.8) (8.2) (6.6) 45 99.6 93.6 98.1 96.6 111.6 100.9 100.4 78.7 96.7 硫丹 10.0 (8.9) (7.7) (6.9) (3.8) (3.1) (4.4) (13.8) (9.6) (11.1) 46 114.0 105.5 94.1 102.7 994 98.4 101.7 89.3 93.1 氯氟氰菊酯 2.0 (1.5) (3.1) (3.2) (5.2) (4.5) (0.9) (1.4) (8.3) (4.1) 47 103.3 102.9 92.9 91.1 88.8 97.7 92.9 97.3 98.5 氯菊酯 8.0 (9.1) (6.5) (3.0) (9.5) (4.3) (1.2) (13.3) (14.8) (5.7) 48 102.1 93.8 90.4 100.1 973 98.9 98.5 101.6 93.2 氟氯氰菊酯 8.0 (4.8) (7.3) (4.1) (4.2) (9.6) (2.2) (5.6) (4.9) (4.9) 49 2.0 103.9 97.9 93.3 103.0 993 97.2 94.7 89.4 91.0 氯氰菊酯 (1.0) (3.7) (2.9) (5.2) (3.5) (2.9) (13.5) (5.6) (4.4) 50 104.6 100.0 93.2 101.3 1073 97.9 100.6 91.0 92.4 氟氰戊菊酯 2.0 (2.7) (3.8) (4.5) (2.5) (7.1) (1.3) (7.6) (5.0) (4.8) 51 2.0 97.6 102.6 90.9 97.7 993 99.6 94.5 90.0 93.7 氰戊菊酯 (3.7) (2.0) (5.6) (3.7) (3.4) (4.8) (6.3) (3.4) (8.0) 52 2.0 99.2 96.4 91.5 98.9 1030 95.9 97.9 92.9 87.8 氟胺氰菊酯 (3.3) (5.4) (5.1) (4.8) (4.0) (3.0) (3.7) (1.9) (8.7) 115.5 102.7 92.3 95.8 结论 本文建立了对蔬菜中的54种农药残留进行快速检测的方法。此方法简单、快速，灵敏、准确，耐用性好，为大批量蔬菜样品中的多种农药残留快速筛查提供了一种便捷、高效、可靠的分析手段。 结合QuEChERS方法与程序升温进样-气相色谱串联二级质谱（PTV-GC-MS/MS）建立了快速检测蔬菜中54种农药残留同时检测的分析方法。结果表明，54种农药残留在一定浓度范围内线性关系良好，相关系数（r2）大于0.991。在3种不同样品基质中10 μg/kg、20 μg/kg、100 μg/kg下的农残加标回收均在70%~130%之间，相对标准偏差（RSD%）为0.3%～19.6%，方法定量限为2.0～10.0 μg/kg。结果表明，该方法简单、快速，灵敏、准确，耐用性好。适用于大批量样品的多残留快速筛查。