蔬菜水果中三苯基羟基检测方案(气质联用仪)

SSL-CA14-142Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-071 http：//www.shimadzu.com.cn上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋 咨询电话：021-34193996 GC-MS/MS法测定蔬菜水果中有机锡类农药 GCMSMS-071 摘要：本文建立了使用三重四极杆气质联用仪测定蔬菜水果中有机锡类农药含量的方法。本方法中样品经丙酮正己烷提取后，用戊基溴化镁衍生，再用活性炭及弗罗里硅土固相萃取小柱净化，最后用 GCMS-TQ8040 检测，该方法检测灵敏度高，方法重现性好，标准曲线线性良好，相关系数均大于 0.999。 有机锡类农药是用于杀菌和杀螨的含锡有机化合物农药，包括三唑锡、三苯基羟基锡、苯丁锡等这类化合物常用做杀螨剂类农药。可用于苹果、柑橘、梨、茶树、棉花、蔬菜、花卉等作物。此类农药属剧烈神经毒物。这类农药可由呼吸道、消化道、皮肤进入人体，主要分布于血血、肝、肾、脑中。可经肾脏排出体外，还可经液、乳汁排出，有的还可从呼吸道粘膜排出。在环境中有较好的稳定性，残留期较长，因而存在对人体的潜在健康风险。我国最新实施的食品安全标准《食品中农药最大残留限量 GB 2763-2012》规定了苹果、梨、柑橘、番禺等水果蔬菜中三唑锡和苯丁锡的残留限量，限量浓度为 0.2-2 mg/kg。欧盟、日本和美国等国家和团体也对食品中有机锡类农药提出限量要求，例如日本肯定列表规定了134种食品中有机锡类农药残留的检测方法，蔬菜水果中有机锡农残检测的方法有气相色谱 法、气质联用法，但由于蔬菜水果基质比较复杂，用气相和气质的方法干扰大，三重四极杆气质联用仪具有抗干扰能力强、准确、灵敏度高等优点，能够有效的检测蔬菜水果中有机锡类农药残留。 实验部分 1.1仪器与试剂 仪器： 岛津 GCMS-TQ8040 试剂：丙酒(色谱纯)、正己烷(色谱纯) 1.2分析条件 色谱柱： Rtx-5 ms(30 mx0.25 mmx0.25um) 进样口温度：300℃ 柱温程序：50℃(1 min)-20℃/min-300℃(7 min)线速度：35.7 cm/sec(恒线速度方式) 不分流进样 进样体积：1pL 离子源温度：250℃ 色谱质谱接口温度：300℃ ( 采集模式： MRM ) 1.3样品制备 1.4衍生反应原理 CsH1MgBr CsHMgBr Sn-N Sn-CgH11 -Sn-OH -Sn-CgH1 ：N=二 三唑锡 三苯基羟基锡 结果讨论 2.1标准谱图 图1.3种有机锡类农药衍生物 MRM色谱图 表1.3种有机锡类农药信息 化学名称 英文名称 CAS号 三唑锡 Azocycltin 41083-11-8 三苯基羟基锡 Triphenyltin，hydroxide 76-87-9 苯丁锡 Fenbutatin oxide 13356-08-6 表2.3种有机锡类农药各衍生组分定量离子和参考离子 No. 化学名称 保留时 目标离子对 CE 参考离子对 CE 参考离子对 CE 间 (min) (m/z) (V) (m/z) (V) (m/z) (V) 1 三唑锡衍生物 13.472 205.00>81.10 6 287.00>205.10 18 287.00>81.10 18.00 2 三苯基羟基锡衍生物 13.519 351.00>197.00 27 351.00>120.00 27 349.00>194.90 27.00 3 苯丁锡衍生物 18.106 457.00>275.00 24 455.00>273.00 30 457.00>197.00 30.00 2.2标准曲线 分别取一定量有机锡类农药混合标准溶液，用氮气吹干溶剂后，用戊基溴化镁乙醚溶液进行衍生，经正己烷提取、浓缩和定容后，分别得到各衍生组分的浓度为0.005、0.01、0.05、0.1、0.5 mg/L， 取1pL混合标准衍生溶液进样，以MRM方式采集，各衍生组分监测离子见表2，各衍生组分标准曲线见图2. 图2.3种有机锡类农药各衍生组分标准曲线 2.3精密度及回收率实验 取 0.01 mg/L 有机锡类农药混合标准衍生溶液，连续进样5次，考察仪器的重复性，测定结果见表3； 平行取2份同一基质样品(白菜、芥菜、梨和苹果)，往其中一份基质样品中添加适量的有机锡类农药混合标准溶液，添加浓度为 0.01 mg/kg，按上述1.3步骤进行处理，并用 GCMSMS进行测试，考察方法的回收率，测定结果见表4. 表3.峰面积重复性结果(n=5) 化合物名称 面积1 面积2 面积3 面积4 面积5 平均值 RSD(%) 三唑锡衍生物 5255 5397 5433 5535 5017 5327 3.7 三苯基羟基锡衍生物 1306 1307 1307 1291 1226 1287 2.7 苯丁锡衍生物 1576 1547 1556 1619 1569 1573 1.8 表4.不同基质样品添加回收结果(%) 化合物名称 白菜 芥菜 梨 苹果 三唑锡衍生物 100.9 113.9 84.6 91 三苯基羟基锡衍生物 88.3 85.8 74.1 81.6 苯丁锡衍生物 124.5 86.4 88.4 95.2 2.4仪器检出限 通过稀释有机锡类农药混合标准溶液，用戊基溴化镁乙醚溶液进行衍生，得到有机锡类农药衍生物的实际检出浓度为 0.001 mg/L， 各衍生组分的质量色谱图如图3所示。 (x1，000) 2.00--205.00>81.10 -287.00>205.10 -287.00>81.10 1.5- 1.0- 1Aww 0.5- wA^ 0.0- ww 13.25 18.25 三苯基羟基锡衍生物 图3.3种有机锡类农药各衍生组分质量色谱图 (c=0.001 mg/L) 2.5样品测试结果 取2.0g样品，按照上述1.3步骤进行处理，并用 GCMSMS进行测试，得到样品的色谱图及测试结果如下： 图4.样品 TIC 图 表3.样品测试结果 No. 组分名称 保留时间(min) 峰面积 含量(mg/kg) 1 三唑锡 13.472 N.D 2 三苯基羟基锡 13.519 - N.D 3 苯丁锡 18.106 24491 0.078 注： N.D为未检出 结论 本方法采用岛津 GCMS-TQ8040 检测蔬菜水果中的有机锡类农药，样品经戊基溴化镁乙醚溶液衍生处理，用正己烷提取、净化，用GCMSMS检测，各衍生组分在0.005~0.5 mg/L 浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数均在 0.999以上，不同基质加标回收率在 74.1%~124.5%之间，平行测试 0.01 mg/L 的有机锡类农药标准衍生溶液，峰面积的相对标准偏差均小于5.0%，精密度良好。本方法操作简单，可有效地检测蔬菜水果中有机锡类农药。 田I岛津全球应用技术开发支持中心 有机锡类农药包括三唑锡、三苯基羟基锡、苯丁锡等含锡有机化合物农药。由于蔬菜水果基质比较复杂，用气相和气质检测干扰大。因此，开发相关检测方法尤为重要。本实验样品经丙酮正己烷提取后，用戊基溴化镁衍生，再用活性炭及弗罗里硅土固相萃取小柱净化，再利用GC-MS/MS中MRM（多反应监测）方式可以有效排除基质干扰，提高仪器的选择性和灵敏度。方法回收率在74.1%～124.5%之间。该方法可有效地检测蔬菜水果中有机锡类农药。