血液中丙酮检测方案(气相色谱仪)

岛津SHIMADZUSSL-CA14-091Excellence in Science Excellence in ScienceGC-081 生物样品血液中甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丙酮和正丁醇的顶空-气相色谱检测方法 GC-081 摘要：本文利用岛津 GC-2010 Plus 结合双柱、双 FID 检测器，建立了生物样品血液中甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丙酮和正丁醇的顶空-气相色谱方法。在 0.1~3mg/mL 浓度范围内建立标准曲线，线性关系良好，大部分醇类相关系数r均大于0.999，6种醇类的检出限均小于 0.012mg/mL。用浓度为 1mg/mL 的标准溶液验证重复性，重复进样7针，峰面积 RSD 均小于2.92%。在0.1 mg/mL， 0.8 mg/mL， 2 mg/mL 添加浓度下，大部分醇类的加标回收率为 93.5-104.4%之间。该方法可用于生物样品血液中乙醇等醇类物质的快速定量测定。 关键词：气相色谱仪血液乙醇 “醉驾”、 “酒驾”是当前道路交通事故的主要肇事原因之一，血淋淋的事故现场令人触目惊心，给人民生命财产造成极大损害，人民群众对其深恶痛绝。血液中酒精含量与驾驶人反应时间和判断力密切相关，也是公安司法机关认定犯罪嫌疑人是否酒驾的依据。准确检测驾驶人血液中乙醇含量具有重要的现实意义。 顶空-气相色谱检测方法是检测血液中乙醇浓度最常用的方法，被世界各国广泛采用。本文参考《中华人民共和国公共安全行业标准》(GA/T 1073-2013)，利用岛津公司GC-2010 Plus，对血液中乙醇含量进行了分析，通过两根毛细管柱的相互验证，排除样品中其他物质的干扰，实现对血液中乙醇的定性和定量分析。由于采用了双孔压环直接连接两根毛细管柱，仪器安装配置合理，操作简单，大部分待测组分的检出限低于0.012 mg/mL. 恒温炉温度：65℃ 样品流路温度：105℃ 该方法能用于公安部门和司法鉴定中心测试酒后驾车司机血液中的乙醇浓度。 实验部分 1.1仪器 GC-2010 Plus 气相色谱仪 1.2分析条件 GC条件： 色谱柱1： Rtx-BAC1， 30mx0.32mmx1.8um 色谱柱2： Rtx-BAC2， 30mx0.32mmx1.2um 进样口温度：：1150℃ 进样方式：分流进样 进样时间：1min 载气控制方式：恒线速度 色谱柱流量：4mL/min 柱温程序：40℃恒温13 min 检测器温度：250℃ 传输线温度：110℃导入平衡时间：0.05 min恒温时间：10 min进样时间：：1 min样品瓶加压时间：0.1 minGC循环时间：18 min 1.3样品制备 取待测血液 100 uL 及 500 uL 水置于顶空小瓶内，拧紧瓶盖，摇匀，待测。 配制系列浓度为0.1，0.2，0.5，0.8，1.0，2.0， 3.0 mg/ml 的甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、丙酮和正丁醇的对照品标准溶液，取以上标准溶液100 pL 及 500 pL 水置于顶空小瓶内，拧紧瓶盖，摇匀，待测。 结果 2.1标准样品谱图 6种混标溶液通道1色谱图如图1所示。 图1.标准样品通道1色谱图(0.2 mg/mL) 表1.通道1标液组分信息 No 中英文名称 CAS号 通道1保留时间 (min) 1 甲醇 (Methanol) 67-56-1 1.870 2 乙醇 (Ethanol) 64-17-5 2.479 3 丙酮 (Acetone) 67-64-1 2.661 4 异丙醇(Isopropanol) 67-63-0 2.925 5 正丙醇(n-propanol) 71-23-8 4.755 6 正丁醇(n-butanol) 71-36-3 10.586 图2.标准样品通道2色谱图 (0.2mg/mL) 表2.通道2标液组分信息 No 中英文名称 通道2保留时间 (min) 甲醇 (Methanol) 1.246 2 乙醇 (Ethanol) 1.567 3 异丙醇(Isopropanol) 1.916 4 丙酮(Acetone) 2.361 5 正丙醇(n-propanol) 2.583 6 正丁醇(n-butanol) 5.195 2.2标准曲线及检出限 使用水配制醇类混合标准系列，浓度分别为0.1、0.2、0.5、0.8、1.0、2.0、3.0 mg/mL。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线。各组分标准曲线如图3，4所示，各组分标准曲线相关系数及检测限见表3. 图3.通道1标准曲线 Excellence in Science 图4.通道2标准曲线 表3.6种醇类相关系数及检出限 No. 组分名称 通道1 通道2 通道1 通道2 相关系数 相关系数 检出限(mg/mL) 检出限(mg/mL) 1 甲醇 0.9998 0.9998 0.011 0.009 2 乙醇 0.9997 0.9999 0.007 0.004 3 丙酮 0.9998 0.9998 0.002 0.002 4 异丙醇 0.9998 0.9999 0.005 0.003 5 正丙醇 0.9998 0.9998 0.007 0.003 6 正丁醇 0.9989 0.9999 0.012 0.004 2.3重复性 用浓度为1 mg/mL 的标准溶液，重复进样7次，面积重复性良好，详细结果见表4，5. 表4.通道1中6种醇类峰面积重复性结果(n=7) 表5.通道2中6种醇类峰面积重复性结果(n=7) 名称 1 2 3 4 5 6 7 平均值 RSD % 142962. 143484. 1 142937. 137941. 142794. 137796. 137439. 140765. 甲醇 8 9 5 3 2 2 1 330324. 331737. 325913. 334194. 334107. 325901. 330825. 乙醇 333602. 3 9 4 6 3 1 8 2.03 异丙 3 599327. 584238. 581763. 591558. 593404. 584087. 588927. 1.10 醇 588115.2 8 5 1 8 1 2 8 1.06 丙酮 855899. 887066. 848620. 852430. 866141. 858970. 851787. 860130. 1.53 正丙 9 1 6 6 5 1 6 9 2.25 醇 613727. 646227. 604962. 612021. 614635. 606628. 614285. 616069. 1.35 正丁 6 3 0 1 3 7 6 7 醇 876469. 8 860071. 839658. 848817. 849953. 850985. 856629. 854655. 9 3 1 3 9 8 2 2.4回收率测试 将3个不同浓度的醇类混标溶液添加血液样品中，按照样品前处理方法制备，血液样品中加标示度分别为0.1 mg/mL， 0.8 mg/mL， 2 mg/mL，平行制样7次，回收率结果见表6。大部分组分的回收率在93.5-104.4%。 表6.样品测试结果及加标回收率 No. 化合物名称 通道1平均回收率(%) 通道2平均回收率(%) 0.1 mg/mL 0.8 mg/mL 2 mg/mL 0.1 mg/mL 0.8 mg/mL 2 mg/mL 甲醇 99.9 97.6 103.0 99.1 99.8 104.4 乙醇 101.3 97.0 103.0 99.1 100.3 103.4 4 丙酮 101.1 93.5 93.5 99.3 75.7 93.6 异丙醇 101.0 95.6 99.3 99.3 99.1 102.1 正丙醇 101.1 95.6 98.8 99.1 97.7 100.9 6 正丁醇 100.9 94.5 94.4 99.0 96.1 97.6 结论 ( 采用岛津公司GC-2010 Plus 气相色谱仪结合 HS-20顶空自动进样器分析生物样品血液中醇类物质，方法操作简单，在 0.1~3 mg/mL 浓度范围内，大部分醇类线性良好，相关系数大于0.999。6种醇类的检出限均小于 0.012 mg/mL。用浓度为1 mg/mL 的标准溶液验证重复性， RSD%在0.67-2.92之间。在 0.1 mg/ m L， 0.8 mg/mL， 2 mg/mL 添加浓度下，大部分醇类的加标回收率为93.5-104.4%之间。该方法仪器安装配置简单、操作方便、重现性好、回收率高，适合血液中醇类含量的快速准确检测。 ) HS-件： 岛津全球应用技术开发支持中心上海市徐汇区宜州路华鑫天地期C 咨询电话： http：//www.shimadzu.com.cn 采用岛津公司GC-2010 Plus气相色谱仪结合HS-20顶空自动进样器分析生物样品血液中乙醇、甲醇等化合物，方法操作简单，在0.1~3 mg/mL浓度范围内，7种化合物线性良好，相关系数均大于0.999，检出限均小于0.01 mg/mL。用浓度为1 mg/mL的标准溶液验证重复性，峰面积RSD均小于1.5%。在1mg/mL添加浓度下，7种化合物的加标回收率为90-111.4%之间。该方法操作方便、重现性好、回收率高，适合血液中乙醇等化合物含量的快速准确检测。