奶及奶制品中牛奶检测方案(液相色谱柱)

应用编号： 101052 样品前处理： 色谱条件： 文章出处： P098 关键字： 摘要： 适用于牛奶中四环素类药物的测定。 图谱： 2010-06-30 SPE/HPLC 基质： 奶及奶制品 化合物： 四环素：土霉素：金霉素 SPE柱：ProElut PLS 150mg/ 6mL 30/pk色谱柱：Spursil C18 5um 150x4.6mm 1、提取 (1)将20mL牛奶和20mL Mcllvaine缓冲液加入50mL塑料离心管中； (2)将样品涡旋混合2 min： 4000 rpm以上离心10 min； (3)取20mL上清液：待净化。 注：Mcllvaine缓冲液(pH4)/称取磷酸氢二钠(Na2HPO4?12H2O)27.6g、柠檬酸(C6H807?H2O) 12.9 g、乙二胺四乙酸二钠盐37.2g， 用水溶解后稀希并定容至1000 mL。 2、净化 ProElut PLS 150mg/6mL(Cat.#68004) (1)活化：依次加入5mL甲醇，5mL水，流出液弃去。 (2)上样：将20mL提取液加入柱中，流出液弃去。 (3)淋洗：依次用5mL水， 5mL5%的甲醇水溶液淋洗：流出液弃去：然后将PLS柱抽干。 (4)洗脱：5mL甲醇洗脱，流出液收集。 (5)重新溶解：*将洗脱液在40℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mLe 注：由于上清液的量大于柱管体积：应分次上样：或在PLS 柱上加20 mL储液管(Cat.#4811)，适配器(Cat.#4803) 流速：1.0 mL/min 检测器：：UV 365 nm 柱温：：30℃ 进样量：20pL 流动相A：0.01mol/L草酸水溶液流动相B：乙腈：甲醇1：1梯度程序时间0-10.01min 流动相B从30%到50%； 10.01~10.5min 流动相B从50%到30%；10.5~20min流动相B为30%。 流 速： 1.0 mL/min检测器： UV 365 nm柱 温： 30 ℃进样量： 20 μL流动相A： 0.01mol/L草酸水溶液 流动相B： 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 时间0-10.01min 流动相B从30%到50%；10.01~10.5min 流动相B从50%到30%；10.5~20min流动相B为30%。