猪肉中糖皮质激素类检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱谱-企业QC 63动物性食品中糖皮质激素类兴奋剂的测定 引领动物性性食品中科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163 样品制备 1.称取5g的处理均匀的猪肉样品，依次加入10g无水硫酸钠，20mL乙酸乙酯，混合均匀后均质1 min， 振荡提取10min， 在10000rpm下离心5 min。 2.上清液转移至浓缩瓶中，再向残渣中加入10 mL乙酸乙酯重复上述操作一次，合并两次提取液，在40℃下旋转蒸发至干。 3.将浓缩后的样品用5 mL30%甲醇水溶液溶解。 固相萃取过程 色谱条件： 仪器： 沃特世ACQUITY UPLC系统 色谱柱： ACQUITY UPLC BEHC，2.1x50 mm， 1.7 um柱温： 30℃流速： 0.5 mL/min流动相A： 水流动相B： 乙腈梯度： 时间(分钟)0.005.005.30 巧5.50 405.606.50进样量： 10pL 质谱条件 质谱系统： 沃特世ACQUITY TQD检测器电离模式： ESF MassLynx@4.1软件用于数据采集，TargetLynx"应用管理软件用于数据处理。调节ACQUITY TQD使得母离子和子离子在半峰宽的分辨率为0.7Da以内。本实验的多反应监测(MRM)、驻留时间、锥孔电压和碰撞能量列表参见表1。标注下划线的离子对用于定量分析。 MRM 保留 典型 驻留 锥孔 碰撞 时间 离子 时间 电压 能量 变化区间 (min) 比值 (s) (V) (eV) 403.2>327.2 15 泼尼松 403.2>327.2 2.65 2.7 0.05 20 8 泼尼松 龙 405.2>329.2405.2>359.2 2.68 9.8 0.05 28 17 11 氢化可 的松 407.2>331.2407.2>361.2 2.79 9.8 0.05 25 16 11 405.2>329.2 14 可的松 405.2>359.2 2.90 4.6 0.05 25 10 甲基泼 尼松 419.2>343.2419.2>373.2 4.59 13.0 0.05 28 15 11 倍他米 松 437.2>361.2437.2>391.2 4.76 28.5 0.05 26 17 11 地塞米松 437.2>361.2437.2>391.2 5.00 11.0 0.05 28 1611 倍氯米 松 453.2>377.2453.2>407.2 5.52 1.35 0.05 25 1612 氟氢可 的松 467.2>421.3467.2>349.2 5.71 10.0 0.05 30 1223 表1. ACQUITY TQD MRM参数。 相对 化合物 线性方程 相关 标准 回收率 系数 偏差 % RSD% 泼尼松 Y=55.1594x-107.197 0.9994 3.27 73.4 泼尼松龙 Y=65.9314x-113.202 0.9994 2.79 75.4 氢化可的松 Y=65.6897x-116.869 0.9994 2.97 73.6 可的松 Y=44.1831x-84.8531 0.9993 4.03 80.2 甲基泼尼松 Y=34.9512x-58.3879 0.9995 3.83 95.5 倍他米松 Y=38.7269x-74.6360 0.9993 4.12 92.1 地塞米松 Y=44.6788x-87.9209 0.9994 3.84 98.8 氟氢可的松 Y=5.63984x-7.93426 0.9996 3.43 70.0 表2.糖皮质类兴奋剂测定方法线性方程、相关系数、相对标准偏差和回收率。 糖皮质激素素类混合标准品MRM色谱图。 9种糖皮质类激素混合标准品在1 ng/mL-100 ng/mL浓度范围内进样分析，得到线性方程和相关系数。采用空白样品添加10ug/kg水平下，平行6次，计算添加回收率及RSD，结果如表2。 订购信息 描述 部件号 0asis HLB， 6 cc/500 mg 186000115 ACQUITY UPLC BEH Cg， 2.1x50mm， 1.7 pm 186002350 VanGuard Pre-column， ACQUITY UPLC BEH Cg，2.1x5 mm， 1.7 um， 3 pcs/pack 186003975 LC/MS 认证样品瓶 600000751CV [ 仪器: 沃特世ACQUITY UPLC® 系统色谱柱: ACQUITY UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm柱温: 30 ˚C流速: 0.5 mL/min流动相A: 水流动相B: 乙腈梯度： 时间(分钟) A% B%0.00 80 205.00 75 255.30 50 505.50 40 605.60 80 206.50 80 20进样量： 10 μL