脑伤乐生中人参皂苷与三七皂苷检测方案(制备液相色谱)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 脑伤乐生中人参皂苷与三七皂苷分析报告 AP10084 应用及技术服务部 摘要：本实验采用高效液相色谱 (HPLC)法结合紫外检测器，并选择 Venusil ASB C18(3 um，150A；4.6×100mm)色谱柱对脑伤乐生样品中的皂苷类成分进行了测定。结果表明：在波长为203 nm， 流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈梯度洗脱时，测得的两皂苷类化合物分离效果较好，但与其周围杂质未达到基线分离。 关键词：高效液相色谱法；紫外检测器；皂苷；Venusil ASB C18 色谱柱 前言 三七总皂苷是三七提取的活性成分，主要成份包括人参皂苷 Rb1， 人参皂苷Rg1，三七皂苷R1。其药理作用主要有降低机体的耗氧量，提高机体对缺氧的耐受力；扩张脑血管，使脑血流量增加；抗血栓和抗凝血作用等。 实验部分 仪器、试剂与材料 试剂材料 屈臣氏水；乙腈为色谱纯；磷酸为色谱纯； 脑伤乐生样品：由某药品公司提供；皂苷类标准品：由某药品公司提供； 高效液相色谱柱：： Venusil ASB C18：3 um， 150A；：4.6×100mm。 样品制备 脑伤乐生样品溶液：准确量取样品0.5mL， 加水 0.5 mL稀释，混匀，0.45 um滤膜过滤，取续滤液即得； 皂苷类标准品：准确量取该标准品 0.5 mL， 加水 0.5 mL 稀释，混匀，0.45 um滤膜过滤，取续滤液即得。 色谱条件 色谱柱：Venusil ASB C18；3 um， 150A：；4.6×100mm： ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w .ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 流 速：1.0 mL/min： 波 长：203nm； 柱 温：30℃； 进样量：：10uL； 梯度： 表1.梯度表 时间(min) A%(0.1%磷酸水溶液) B%(乙腈) 0 84 16 20 84 16 40 79 21 45 79 21 80 68 32 85 68 32 85.1 84 16 95 84 16 结果与讨论 本实验采用 VenusilASB C18色谱柱对脑伤乐生中人参皂苷与三七皂苷进行了测定，由表2及图2可知，在上述色谱条件下，待测物分离效果相对较好。 表2.脑伤乐生中皂苷类成分测试结果 样品名称 峰序号 保留时间(min) 理论塔板数 分离度 皂苷对照品 1 42.426 133470 2 43.822 129461 2.93 脑伤乐生样品 1 42.377 115625 一 2 43.193 1.31 3 43.777 115386 0.95 ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w. ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 图1.皂苷类标准品高效液相色谱图 图2. 脑伤乐生样品溶液高效液相色谱图(下图为上图的横、纵坐标局部放大) 结论 本实验按客户提供的标准方法，采用Venusil ASB C18 色谱柱(3 um， 150A，4.6×100 mm)对脑伤乐生样品溶液中的皂苷类成分进行了测定。结果表明两皂苷类化合物分离效果较汝，但与其周围杂质未达到基线分离。 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w. ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 VenusilASB C18 3um， 150 A， 4.6×100 mm 1支 VS931005-0 1.5mL样品瓶 短螺纹透明带书写处 100/PK 1109-0519 32×11.6mm 1.5 mL 样品瓶盖 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 微孔滤膜 单膜，13 mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 一次性注射器 2 mL 无针头 100支/包 LZSQ-2ML 乙腈 4L/瓶，色谱纯 4×4L/箱 AH015-4 ( Email： s e r vi c e@ag e l a .co m. cn 网址： w w w.ag e la.co m . c n 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：