氨曲南杂质例中制备过程检测方案(制备液相色谱)

Agela Technologies 博纳艾杰尔产品应用案例氨曲南杂质制备案例 PP10109 应用及技术服务部 摘要：本实验采用 Cheetah MP200中压制备色谱仪器，选择 Flash AQ C18快速纯化柱(20-35um，100A， 12g三支串联)对氨曲南杂质进行了制备。结果表明：样品在紫外波长254 nm下，流动相为 0.1%TFA水溶液和甲醇，进行梯度洗脱，能够有效分离，且峰形良好。 关键词： Cheetah MP200中压制备系统；氨曲南杂质样品； Flash AQ C18 前言 氨曲南具有免疫原性弱以及青霉素类、头孢菌素类交叉过敏少等特点，因此可用于替代氨基糖苷类药物，治疗肾功能损害患者的需氧革兰阴性菌感染；并可在密切观察情况下用于对青霉素、头孢菌素过敏的患者。该氨曲南杂质在分析过程中需要添加缓冲盐，使用中压制备过程中使用 0.1%TFA替代缓冲盐，简化后处理过程。 表1.氨曲南杂质样品信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS编号 NH C13H19N5O6S 373.38 HO D 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 Cheetah MP200 中压制备仪器 试剂材料 去离子水；甲醇为色谱纯； 制备色谱柱： Flash AQ C18， 20-35 umm，， 11000A0，A1， 12g三支串联； 氨曲南杂质样品：客户提供。 样品前处理 ( Email： s s e e r v ice@ag el a.com . cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 样品是黄色粉末固体，取5 mg样品加入1 mL 甲醇超声溶解，用0.22 um滤膜过滤后上样。 制备条件 色谱柱： Flash AQ C18， 20-35 um， 100A， 12g三支串联； 流动相：A：0.1%TFA 水溶液B： 甲醇； 流 速： 12mL/min； 波 长：220nm(蓝线)，254nm(红线)； 梯 度： 表2.液相制备色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 12.0 100.0 0.0 30.0 12.0 70.0 30.0 检测条件 色谱柱： Innoval ODS-2， 10 um， 100A， 4.6x250 mm； 流动相：A：0.1%TFA水溶液 B：甲醇； 流速：1.0mL/min； 检测器： UV254 nm； 柱温：30℃； 梯度： 表3.液相分析色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 1.0 100.0 0.0 30.0 1.0 70.0 30.0 结果与讨论 本实验采用 Flash AQ C18 柱(20-35um， 100 A， 12g 三支串联)对氨曲南杂质样品进行了制备测试，由表2及图1可知，流动相为 0.1%TFA水溶液与甲醇，进行梯度洗脱时，样品通过制备测试，峰形良好。 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s s e e r v ice@ag el a.com . cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 图1.制备色谱图 图2.制备前样品检测图谱 结论 结果表明 Flash AQ C18 柱(20-35um， 100A， 12g三支串联)填料对氨曲南杂质样品保留及分离效果良好。 附：相关产品 产品名称 规格 包装数量 订货号 Flash AQ C18 20-35 um，100 A， 12g 1支 SQ230012-0 Innoval ODS-2 10 um， 100 A， 4.6x250 mm 1支 IX902505-2 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6mm 100/PK 1109-0519 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s s e e r v ice@ag el a.com.cn 网址： w w w. ag ela . com.cn 客服：400-606-8099 ) 博纳艾杰尔产品应用案例 1.5mL样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE隔垫45°Shore A；1.0 mm 100/PK 0915-1819 一次性注射器 2mL无针头 100支/包 LZSQ-2ML 液相进样针 20uL，平头 1支/盒 JYZ-20UL 针筒过滤器 0.22 um 13 mm单膜 200个/包 AS011320 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：