氨基酸样品中反相制备方法检测方案(液相色谱仪)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 氨基酸样品反相制备案例 PP10092应用及技术服务部 摘要：本实验采用 LC-10F 高压半制备系统，选择 Venusil ASB C18 (5 um， 150 A，10×250mm)对氨基酸样品进行井纯化。结果表明：流动相为 5 mmol/L 七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液和乙腈，进行洗脱，能够有效分离，且峰形良好。 关键词： LC-10F高压半制备系统；氨基酸样品；；Venusil ASB C18 前言 氨基酸样品的普遍检测方法都是衍生化后检测。在实际研究过程中，在动物提取物蛋白水解后，测试其中的氨基酸组成，有可能需要采用非衍生化的方法进行制备，将各个氨基酸分别进行鉴定等工作。本实验建立的制备纯化方法尝试使用简单的流动相体系实现分离，避免使用衍生化等破坏性操作。 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 LC-10F 高压半制备仪器， 试剂材料 水为去离子水，乙腈为制备级 色谱柱：Venusil ASB C18 (5 um， 150 A， 10×250 mm) 氨基酸样品：客户提供 样品前处理 样品是无色溶液状态，用0.22 um 滤膜过滤后直接上样 制备条件 色谱柱：Venusil ASB C18(5 um， 150 A， 10×250mm)； 流动相： A：5mM七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液； B：乙腈； 检测器： ELSD 85℃， Gas Flow： 2.0 nl/min； ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com . cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 流速：4mL/min； 进样量：20uL； 梯度： 表1.液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 流速/(mL/min) A/% B/% 0.0 4.0 100.0 0.0 5.0 4.0 90.0 10.0 8.0 4.0 85.0 15.0 25.0 4.0 65.0 35.0 结果与讨论 本实验采用 Venusil ASB C18(5 um， 150 A， 10x250 mm)对氨基酸样品进行了分离，由表1及图1可知，流动相为5 mM 七氟丁酸+0.7%TFA 水溶液和乙腈，进行梯度洗脱时，样品分离良好。 图1.制备色谱图 结论 本实验采 Venusil ASB C18 (5 um， 150 A， 10x250 mm) 色谱柱对氨基酸样品进行了制备。 Venusil ASB C18 使用非衍生化的方法分离氨基酸分离效果良好，能够初步分离样品。 ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com.cn 网址： w w w.agela.com.cn 客服：400-606-8099 ) 附：相关产品 产品名称 规格 包装数量 订货号 VenusilASB C18 5 um 150 A 10×250 mm 1支 VS952510-0 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处 100/PK 1109-0519 32×11.6 mm 1.5 mL 样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫 45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 一次性注射器 2mL 无针头 100支/包 LZSQ-2ML 液相进样针 20 uL， 平头 1支/盒 JYZ-20UL 针筒过滤器 0.22 um 13 mm 单膜 200个/包 AS011320 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：