纺织品中偶氮染料检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 651632 作者 Minjia HUANG Agilent Technologies， Inc. ( 3 Wang Jing Bei RoadChaoyang D i strict， Beijing 100102 ) ( China ) ( Rongjie FU ) ( Agilent Technologies (Shanghai) Co.， Ltd. ) 412 Ying Lun Road China 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 使用 Poroshell 120 色谱柱和 1290 Infinity系统分析纺织品中欧盟委员会禁用的偶氮染料 应用报告环境 摘要 使用 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱和 Agilent 1290 Infinity 液相色谱系统分析了偶氮染料中的禁用的22种芳香胺和四种偶氮化合物。这种新方法在14分钟内能完成26种苯胺类化合物的分离，并且具有良好的耐用性和重现性。 前言 偶氮染料是一大类合成有机染料，其分子结构中包含有偶有官能团-N=N-。它们通常用于纺织品和皮革的染色。其中某些染料会释放容易致癌的芳香胺。因此，欧盟委员会出台了禁令以防止人们接触这些有害的芳香胺。法规 EN14362 [1，2]禁止使用偶氮染料，它们可能会释放表1(不包括1，4，13和14号化合物)22种芳香胺中的一种。由于可能直接或长时间的与人们的皮肤或口部接触，纺织品和皮革产品也适用于该禁令。 本报告中， 使用 Agilent Poroshell 120 EC-C18， 3.0×150mm， 2.7 pm 色谱柱和 AgilentInfinity 1290 系统分析了欧盟委员会禁止的22种芳香胺和另外四种4化合物(1，4-苯二胺，苯胺，2，6-二甲苯胺和2，4-二甲苯胺)。改进了 EN 14362 方法中所用梯度，增加了该色谱柱的分离度。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 表1. 偶氮染料列表(欧盟委员会方法中不包括1，4，13和14号化合物) 实验部分 仪器和试剂 Agilent Infinity 1290 液相色谱系统包括二元泵，柱温箱(TCC)，高效自动进样器和二级管列检测器(DAD)。 本文所用色谱柱为 Agilent Poroshell 120 EC-C18 3.0×150 mm，2.7 um色谱柱(部件号：693975-302)。 26种标准品(表1)购自百灵威科技有限公司(北京，中国)。标样混合物溶解于甲醇和流动相A的溶液中(10：90)(见条件部分)，浓度 12 pg/mL， 4℃暗处保存。 高效液相色谱分析条件 色谱柱 Poroshell 120 EC-C18， 3.0 mm x150 mm， 2.7 pm (部件号：693975-302) 柱温 40°C 流速 0.8 mL /min 流动相 A：称取 0.575g磷酸二氢铵， 0.7g磷酸氢二钠溶于900mL水 后加入 100mL甲醇， 用磷酸调节 pH 6.9 B：甲醇 DAD 波长 240 nm； 280 nm； 305 nm； 进样体积 1 pL 结果和讨论 分离条件的选择 欧盟委员会的分析方法采用4.6× 250mm， 5 um 色谱柱，需要70分钟，梯度洗脱时间较长[1]。在本方法中，测试了 AgilentPoroshell 120 SB-C18 和 EC-C18两种色谱柱。对于这些苯胺化合物， Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱能够提供良好的选择性和峰形。与亚 2 pm 全多孔填料相比，2.7 pm 表面多孔填料具有相似的性能，150 mm 的色谱柱长度提供了很高的峰容量。这个复杂样品混合物要求能在较短分析时间内得到更高的分离度和峰容量。混合物中，4，4'-二氨基二苯甲烷(11)，2-甲氧基-5-甲基苯胺(12)，2，6-二甲苯苯(13)，2，4-二甲苯胺(14)，3，3'-二甲氧基联苯胺(15)和3，3'-二甲基联苯胺(16)的分离是非常困难的。它们对于梯度的微小变化非常灵敏。改进表2中的洗脱梯度可以实现最优化的分离。采用改进的洗脱梯度所得的色谱图见图1所示。所有的26种化合物在15分钟内实现了很好的分离，这比推荐方法快将近80%。 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：40061 65163 相对于4.6 mm内径的色谱柱，较小的 3.0 mm 内径色谱柱可以节 mAU省大概60%的溶剂。 许多偶氮染料都有其自己的最大紫外吸收，因此，根据欧盟委员会的方法，检测包括 240 nm， 280 nm 和305 nm 在内的多个波长以使每个峰都得到较好的信号。 表 2. 用于26种标样分离的改进梯度 重现性和耐用性 2.7 pm 表面多孔填料与1.8 um填料性能相似，但是，压力却比1.8 pm 色谱柱低40%。即使使用一根长150 mm的色谱柱，最大压力为580 bar， 该方法仍能在 600 bar 压力上限的 UHPLC 上运行。在本报告中，使用一根较长的 Poroshell120 EC-C18 (3.0 mmx150mm， 2.7 pm)色谱柱与 Agilent Infinity 1290 系统结合，很快得到了更高的灵活性、分离度和更可靠的结果。图2中的重叠的色谱图使用了两个不同日期的两个不同批次的流动相，显示出该方法的良好重现性。 图1. 使用 Agilent Poroshell 120 EC-C18， 3.0 mm x 150 mm， 2.7 pm 色谱柱分析26种偶氮染料标样的色谱图，检测波长240 nm 图2. 检测波长分别为240 nm， 280 nm 和305 nm 的色谱图 本文开发了一种使用新型表面多孔填料色谱柱――安捷伦Poroshell 120 EC-C18， 3.0mmx150mm，2.7 um 色谱柱的分析方法，能够在15分钟内基线分离26偶氮染料。该方法与新型Agilent Infinity 1290 系统结合显示了良好的重现性和可靠的结果。该方法显著的缩短了分析时间(将近80%)并降低了溶剂用量(将近60%)。 ( 参考文献 ) 1. EN 14362-1-2003 Textiles -Methods for determination ofcertain aromatic amines derived from azo colorants. Part1： Detection of the use of certain azo colorants accessiblewithout extraction. 2. EN 14362-2-2003 Textiles. Methods for the determinationof certain aromatic amines derived from azo colorants.Part 2： Detection of the use of certain azo colorantsaccessible by extracting the fibres. ( D AD1A， S i g =240，4 Ref=off (AZOS DYES\. . .DYES-POROSH E LL1 2 0EC\DEF LC 2010-08-1909-56-21\20100819000001. D ) ) DAD1 A，Sig=240，4 Ref=off (AZOS DYES\...DYES-POROSHELL 120EC\DEF_LC 2010-08-1909-56-21\20100819000002.D)DAD1 A，Sig=240，4 Ref=off (AZOS DYES\...DYES-POROSHELL 120EC\DEF LC 2010-08-1909-56-21\20100819000003.D)DAD1 A， Sig=240，4Ref=off (AZOS DYES\...DYES-POROSHELL120EC\DEF_LC 2010-08-1909-56-21\20100819000004.D) DAD1 A， Sig=240，4 Ref=off (AZOS DYES\...DYES-POROSHELL120EC\DEF _LC 2010-08-1909-56-21\20100819000005.D) 图3. 使用两天两个不同批次的流动相六次进样的重叠色谱图，检测波长240 nm 色谱柱Poroshell 120 EC-C18，3.0 mm × 150 mm，2.7 μm（部件号：693975-302）柱温40 °C流速0.8 mL /min流动相A：称取0.575 g 磷酸二氢铵，0.7 g 磷酸氢二钠溶于900 mL 水后加入100 mL 甲醇，用磷酸调节pH 6.9B：甲醇DAD 波长240 nm；280 nm；305 nm；进样体积1 μL