水产品中喹乙醇检测方案(固相萃取)

青岛心成发展商贸有限公司 水产品中喹乙醇检测的固相萃取方法 WGLabs MAX 一、实验目的 本研究利用固相萃取作为样品前处理方法，HPLC作为分析方法，检测水产品样品中的喹乙醇的残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。 二、实验目标物 喹乙醇(CAS： 23696-28-8)。 三、应用范围 本方法适用于水产品中喹乙醇的检测的HPLC检测及确证。 四、实验材料 WGLabs MAX 固相萃取柱 60mg/3ml 五、实验步骤 1、样品提取 准确称取5 g匀浆鱼肉样品(精确到0.001 g)于50 mL离心管中，加入35mL甲醇-水溶液(5：95， v/v)，离心管置入摇床中，室温下恒温振荡器振荡速度110 r/min， 避光振荡45 min。提取液在3500 r/min下离心10 min， 上清液经滤纸过滤，滤液加入10 mL正己烷，充分混匀后，以5000 r/min离心10 min， 弃去去层溶液，下层溶液待净化。 2、SPE柱净化 (1)活化： MAX固相萃取柱使用前依次使用3mL甲醇和3mL水活化。 (2)上样和洗脱：将待净化的样品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速过柱，弃去滤液。用3mL甲醇-水溶液(5：95， v/v)淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中残留液。用5 mL甲酸-乙酸乙酯溶液(1：9， v/v)洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。 (3)重新溶解：洗脱液于40℃氮吹吹干，用2mL甲醇定容，0.22 um微孔滤膜过滤，供HPLC上机测试。 3、HPLC条件 设备：Waters Alliance 2690 色谱柱： Welch Ultimate XB-C18(4.6×250 mm， 5um) 检测器： Waters 2487 紫外检测器 检测波长：380 nm 流动相：A：甲醇 B：0.1%甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱 表1梯度洗脱条件 时间/min A(%) B(%) 00.00 15 85 03.00 15 85 07.00 70 30 12.00 70 30 16.00 15 85 20.00 15 85 流速：1mL/min 进样体积：20pL 六、实验结果 1、鱼肉中喹乙醇2 mg/kg添加回收结果 表2鱼肉中喹乙醇2 mg/kg添加回收结果 名称 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 乙醇 86.7 81.1 86.1 84.6 3.6 2、添加水平为2 mg/kg鱼肉中喹乙醇检测色谱图 图1添加水平为2 mg/kg鱼肉中喹乙醇检测色谱图 本研究利用固相萃取作为样品前处理方法，HPLC作为分析方法，检测水产品样品中的喹乙醇的残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。具体操作步骤详见附件！！！