头孢克肟中USP方法分析检测方案(液相色谱柱)

Dec. 04，2015LC Application Lab， Shiseido China2Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801，FAX 010-6785-6882 No.31， BDA International Business Park， 头孢克肟的USP方法分析 本实验分别尝试两款柱型的C18 MG色谱柱， 按照USP方法对头孢克肟进行分析。由于流动相中含有离子对试剂，因此以流动相在200pL/min流速条件过夜平衡后，连续进样能得到重复性良好的稳定结果。 如图1所示， 使用MGS3； 4.6 mm i.d.×100mm色谱柱，将流速调整为1400uL/min时，头孢克肟主峰主峰保留时间为10.53min(药典要求主峰保留时间在10min左右)，理论塔板数为6729，大于药典要求4000；拖尾因子为0.89，略低于药典要求的0.9-2.0范围；主峰与相对保留时间为0.9的杂质cefixime (E)-isomer峰之间分离度为2.50，大于药典要求的2.0。且3um粒径色谱柱压力较高，建议客户酌情考虑尝试。 图1 MG S3； 4.6 mm i.d.×100 mm色谱柱分析色谱图 如图2所示， 使用MG S5； 4.6 mm i.d.×150 mm色谱柱，将流速调整为1500uL/min时，头孢克肟主峰主峰保留时间为11.69min(药典要求主峰保留时间在10min左右)，理论塔板数为8184，大于药典要求4000；拖尾因子为0.97，在药典要求范围0.9-2.0之内；主峰与相对保留时间为0.9的杂质cefixime (E)-isomer峰之间分离度为 图2 MG S5； 4.6 mmi.d.×150mm色谱柱分析色谱图 注：峰上标数字由下至上依次为分离度、不对称因子与理论塔板数。 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK MG S3；4.6 mm i.d.×100 mm CAPCELL PAK MG S5；4.6 mm i.d.×150 mm 流动相： 10mmol/L 四丁基氢氧化铵(1.5mol/L 磷酸溶液调节pH=6.5)/乙腈=75/25 流速： 1400 pL/min (图1) 1500 pL/min (图2) 温 40°C 检 PDA 254nm 进样量： 10pL 样品： Resolution solution：将原料样品以水溶解为 1mg/mL 的溶液， 95℃水浴加热 45minAssay preparation： 0.22mg/mL， 以溶剂*溶解稀释 *溶剂：取7.1g无水磷酸氢二钠，加水500mL， 再以6.8g磷酸二氢钾加水500mL 制成的溶液调节 pH=7.0.