头孢特仑新戊酯中成分分析检测方案(液相色谱柱)

Nov. 10，2015LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31，BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801， FAX 010-6785-6882 数据文件名：ADME-T2-20-Y-5mg-10ul-2.lcd样品名：TOUBAO 头孢特仑新戊酯的分析报告 客户所提供分析品分别为头孢特仑新戊酯原料药、辅料及样品，分析目的为使死时间附近杂质间分离度、杂质与辅料间分离度达到要求。为使极性化合物有更好的保留和分离结果，我们首先选择使用具有较高表面极性的 CAPCELL PAK C18 AQ 柱和 CAPCELL PAK ADME 柱进行尝试。 数据文件名：151105-Adme-T2-20-Y-5mg-10ul-1.lcd 图1 AQ柱与 ADME 柱分析样品溶液分析图谱对比 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK ADME S5； 4.6mm i.d.x250mm CAPCELL PAK C18 AQ S5； 4.6mm i.d.x250mm 流速1000 uL / min温度检测 35℃ PDA254nm 进样量： 10 uL 样 品： 样品溶液 5mg/ml 如图1所示，两柱相比， ADME 柱 0min 至10min 内所分离出杂质峰较多，主峰处与杂质峰分离也较好，基线平稳，而AQ 色谱柱主峰处基线明显抬升，因此我们选择使用 ADME 色谱柱进行后续分析。 图2! ADME 柱分析图谱 图3ADME 柱样品分析局部放大图谱(峰上标为分离度) 如图2、图3所示， 使用 ADME 色谱柱分析，5min 至 10min 内相邻杂质峰分离良好，且杂质峰与辅料峰分离良好，辅料峰不干扰杂质检查。 随即我们按客户要求将样品破坏后进样，图谱如下： 数据文件名：151105-Adme-T2-20-Y-5mg-10ul-1.lcd 图 4 样品破坏前后 ADME 分析对比图谱 图5破坏样品 ADME 分析局部放大图谱(峰上标为分离度) 如图4、图5所示，破坏样品溶液 5min 至10min 较破坏前多出两个杂质峰，与辅料峰分离良好，但杂质间分离度未达到1.5，可通过调整流动相比例加以改善。 我们在进行头孢特仑新戊酯单标溶解时，1mg该单标加入 1ml流动相是无法完全溶解的；而对于客户所提供样品破坏方法，样品浓度为 10mg/ml，样品中主药成分为13%，经计算破坏样品溶液中头孢特仑新戊酯浓度约为1.3mg/ml，该浓度下会出现样品溶解问题，建议客户对样品浓度进行考察，重新建立合适的样品分析浓度。 对于客户所提出 2.5min 杂质峰在主药单标和辅料中均有，怀疑杂质峰与辅料峰没有分开的问题，我们将初始有机相比例降到0%进行了实验： 数据文件名：151109-Adme-T4-0-F-10mg-10ul-6.lcd 纯水相下主药单标、辅料对比图谱 如图6所示，将初始有机相比例降至0%后，辅料、主药单标、空白溶剂、样品中 5min 后均存在两杂质峰，因此可判断该杂质峰来源于样品溶剂。 ( 张亚丽杨茜郭彦丽 ) 客户所提供分析品分别为头孢特仑新戊酯原料药、辅料及样品，分析目的为使死时间附近杂质间分离度、杂质与辅料间分离度达到要求。为使极性化合物有更好的保留和分离结果，我们首先选择使用具有较高表面极性的CAPCELL PAK C18 AQ柱和CAPCELL PAK ADME柱进行尝试。