动物源性食品中喹乙醇代谢物检测方案

DiKMAA reliable partner for your lab 动物源性食品中喹乙醇代谢物的测定解决方案 (参考 GB/T20746-2006牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、乙醇及代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法) 喹乙醇是一种饲料添加剂，能提高饲料转化率，促进牲畜生长。但对大多数动物有明显的致畸作用，对人也有潜在致畸性，致突变，致癌作用。 因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。《中国兽药典》(2005版)也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。 喹乙醇在体内不稳定，在动物体内能短时间内产生十多种代谢物，其中3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)是其主要代谢产物之一，在体内相对稳定，是国际食品法典委员会认定的标示残留物之一。我国农业部规定肌肉和肝脏组织中的最大残留限量分别为 4 ug/kg 和50 pg/kg. 方法优势 迪马科技建立猪肉、猪肝等动物源性食品中喹乙醇代谢物解决方案，对比《GB/T20746-2006牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》，本方案： 1.不需要甲酸溶液消化、蛋白酶酶解、盐酸酸化等复杂操作步骤，采用2%甲酸乙酸乙酯作为提取液，采用 ProElut PXA固相萃取柱，水、甲醇淋洗，2%甲酸乙酸乙酯洗脱； 2.简化前处理步骤，降低实验成本，节省大量时间，并降低基质效应的影响，回收率达85%以上，保证实验结果的准确性、重现性； 3.方法检出限为 0.27 pg/kg，较国标方法《GB/T 20746-2006牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧、喹乙醇及代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》的方法检测限0.5 pg/kg 低，可供广大分析工作者使用。 以下为详细解决方案，，荷敬请参考! 1、适用范围 适用于猪肉、猪肝等动物源性食品中喹乙醇代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 的检测，检出限是0.27 pg /kg， 定量限是 0.63 pg /kg. 2、提取 (1) 取2.0g样品，加入5g无水硫酸钠，搅匀，加入15 mL2%甲酸乙酸乙酯，涡旋混合，振荡5 min， 8000 rpm 下离心2 min，收集上清液； (2)将下层残留物用10 mL 2%甲酸乙酸乙酯按照步骤(1)重复提取一次，合并两次上清液； (3)将上清液在35℃水浴条件下，减压蒸至近蒸，再加入10 mL 2 mo/L HCI水溶液超声溶解，转移至 15 mL 离心管中，6000 rpm 下离心2 min， 取 5 mL下层清液，待净化。 3、净化 ProElut PXA 150 mg/ 6 mL (Cat.#68304) a活 化： 5mL甲醇， 5mL水活化； b上 ： 加入待净化液，弃去流出液； c淋 洗加入10mL水，5mL甲醇，弃去流出液； 脱 d洗 加入5mL2%甲酸乙酸乙酯，收集流出液； e重新溶解： 将流出液在35℃下减压蒸馏至干，用甲醇定容至1mL，供LC-MS/MS分析。 4、色谱条件 4.1液相条件 色谱柱： Endeavorsil C18， 100×2.1 mm， 1.8 um (Cat.#87003) 流速：0.2mL/min 进样量： 5pL 柱 温：35℃ 流动相：0.2%甲酸水：乙腈=40：60 4.2质谱条件 电离模式： ESI扫描方式：：正离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500V雾化气压力：50 psi辅助气压力：50 psi 气帘气压力：20 psi 离子源温度：500℃ 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对(m/z ) (母离子/子离子) 定量离子对(m/z) (母离子/子离子) 碰撞气能量/V 去簇电压/V 3-甲基-喹噁林-2-羧酸 189.1/145.1 189.1/145.1 17 51 189.1/142.9 19 5、添加回收结果 猪肉和猪肝中喹乙醇代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸的 LC-MS/MS 检测添加回收结果 基质 分析物 添加水平(ug/kg) 回收率(%) 猪肉 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 1.0 92.7 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 2.0 91.5 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 5.0 88.0 猪肝 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 1.0 97.9 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 2.0 90.2 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸 5.0 93.8 3-甲基-喹噁啉-2-羧酸多反应监测色谱图 货号 名称 规格 样品前处理 68304 混合型阴离子萃取柱 ProElut PXA 150 mg/6 mL 30/pkg 244358 12管防交叉污染真空 SPE 萃取装置 12位 4803 1，3，6mL柱管通用连接器 15/pk 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 30039 FitMax针头式过滤器 Nylon 13 mm，0.22 um 100/pk 30040 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13mm，0.45 um 100/pk 色谱柱及保护柱 87003 UHPLC 色谱柱 Endeavorsil C18 100x2.1 mm，1.8 um HPLC溶剂•缓冲盐•离子对试剂 50101 乙腈 HPLC级 4L 50102 甲醇 HPLC级 4L 50104 乙酸乙酯 HPLC级 4L 50144 甲酸 HPLC级 50mL 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50孔 52401A 瓶架/白色 50 孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2 mL， 100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk H80465 HPLC进样针 25 pL 红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中 北京：都： 沈阳： 石家庄： 青岛：南： 重庆：