通过Biotage Initiator 微波合成进行肽以及氨基酸的偶联反应

耐士科技www.rysstech. com14耐士科技Ryss Techwww.rysstech. com Ryss Tech 肽偶联反应 MW=468.60 PS-CDI， Polystyrene-supported Carbodiimide： 试剂 摩尔质量(g/mol) 物质的量(mmol) 等值 理论 实际重量、体积 N-tert-Butoxycarbonyl-phenylalanine (Boc-Phe-OH) 265.31 1.845 1.3 489 mg Leucine benzyl ester(H-Leu-OBzl) 221.30 1. 1 314mg Diisopropylethylamine(DIEA) 129.25 1.845 316 pL 1H-1，2，3-Benzotriazol-1-olhydrate (HOBt*H20) 1 1.845 1.3 283 mg PS-CDI (1.35 mmol/g) Nw 1.7 179 g Acetonitrile (MeCN) 41.05 1.3mL 2-5ml反应瓶1支，放入合适的磁力搅拌子，顺序加入BOC-苯丙氨酸(Boc-Phe-0H) ， H-Leu-0Bz1， H0Bt*H20， PS-CDI和二异丙基乙胺(diisopropylethylamine)。最后，加入乙腈。确定固体催化剂都在溶液中，如果有必要，可以再添加点溶剂，冲洗反应瓶壁上的固体催化剂。然后，密封反应瓶盖，用Initiator微波合成仪加热，反应结束，当反应瓶温度降至低于50℃，合成仪的机械臂自动打开，取出反应瓶，打开盖子。 反应物可以通过TLC 或者HPLC-MS方法监测和分析，检测波长设置为254nm。 参数设置 Time Temperature Absorption level Fixed Hold Time Pre-stirring 5 minutes 100 °C High On 25 s 将固体滤除， 二氯甲烷清洗，溶液减压干燥，得到的样品重新溶于二氯甲烷，对此溶液进行萃取：首先，饱和NaHCO3水溶液，然后，纯水。用Na2S04对有机相(二氯甲烷层)干燥，过滤，蒸发掉溶剂，用Biotage公司的快速制备色谱仪进行纯化，正相色谱条件：硅胶柱，庚烷-乙酸乙酯，梯度条件。