大豆油中农残检测方案

GPC-GC-MS/MS 法测定大豆油中农药残留含量 摘要：!：建立了在线凝胶色谱串联三重四极杆气质联用仪 GPC-GC-MS/MS 测定大豆油中农药残留含量的分析方法。在1~50 ug/L 浓度范围内，各农药的相关系数均在 0.998以上。对10ug/L的标准溶液连续5针进样，峰面积的 RSD%均小于5.0%。在0.05mg/kg 加标浓度下，大部分农药的加标回收率在70.0~120.0%之间，完全满足日常检测对大豆油中农药残留分析的要求。 关键词： GPC-GC-MS/MS大豆油农药残留 大豆油是世界上产量最多的油脂，它含有丰富的亚油酸、卵磷脂和多种维生素，是一种营养价值很高的优良食用油。由于大豆在种植过程中经常喷洒农药，致使大豆及其制品大豆油中存在农药残留。 食品安全国家标准《GB2763-2012食品中农药最大残留限量》、国际食品法典委员会标准(CAC)和日本肯定列表制度等法规均对大豆油中农药最大残留限量进行了规定。国家标准《GB2763-2012食品中农药最大残留限量》中规定在大豆油料及制品中毒死蜱、对硫磷最大残留限量为0.1mg/kg， 氟乐灵、甲拌磷等农药最大残留限量为0.05mg/kg。目前国际最严格的限量标准日本肯定列表对大豆油中农药的限量一般规定至0.01mg/kg。 大豆油中因含有大量的油脂等成分，在分析时，需要复杂的净化过程。本文采用在线凝胶色谱对大豆油样品进行净化，有效地简化样品前处理过程。同时结合GC-MS/MS技术的MRM采集方式，减少基质干扰对农药的测定，同时也降低了检出限，为大豆油中农药残留检测提供了一种简单、快速、可靠的分析方法。 1实验部分 1.1仪器 岛津在线凝胶色谱串联三重四极杆气质联用仪 (GPC-GC-MS/MS) 1.2分析条件 GPC条件： 色谱柱： Shodex CLNpak EV-200 (2.1mmx150mm) 流动相：丙酮/环己烷(3/7，VV/V) 流速：0.1mL/min 柱温：40℃ 进样量：10 uL GC-MS/MS 条件： 色谱柱：惰性石英管：5m×0.53mm 预柱： Rtx-5 MS， 5mx0.25mmx0.25um 分析柱： Rtx-5MS， 25mx0.25mmx0.25um 柱温程序：82℃(5min)_8℃/min 300℃(7.75min) PTV 进样口温度程序：120℃(5min) 100℃/min 250℃(33.7min) 进样口压力程序： 120kPa(0min)_100kPa/min _180kPa(4.4min)_(-49.8 kPa/min)_120kPa(33.8min) 隔垫吹扫程序：5.0mL/min_(-10mL/min)_ 0 mL/min(6min) 10mL/min 5mL/min(5min) 不分流进样时间：7min； 溶剂切割时间：9.7min 接口温度：300℃；离子源温度：200℃ 采集方式：MRM，采集条件见表1 1.3 样品制备 样品前处理见图1所示。 图1.样品前处理流程图 表1.农药组分保留时间及 MRM参数 No. 保留时间 农药中英文名 CAS 定量离子(CE) 定性离子(CE) 11.075 敌敌畏 (Dichlorvos) 62-73-7 185>93(14) 185>109(14) 2 17.750 氟乐灵(Trifluralin) 1582-09-8 306>264(8) 306>206(14) 3 18.167 甲拌磷(Phorate) 298-02-2 260>75(8) 260>231(4) 48 33.375 溴氰菊酯-1 (Deltamethrin-1) 52918-63-5 253>93(18) 253>172(4) 49 33.683 溴氰菊酯-2 (Deltamethrin-2) 52918-63-5 253>93(20) 253>172(8) 2结果 2.1标准样品谱图 标准样品的 MRM 图如图2所示。 图2标准样品的MRM 图(50ug/L) 2.2标准曲线及重复性 使用丙酮/环己烷(3/7，V/V)配制农药混合标准系列，浓度分别为1、5、10、20、50ug/L。各农药的标准曲线相关系数均在0.998以上(表2)。因篇幅所限，部分农药标准曲线如图3所示。峰面积的重复性以 10 ug/L 的标准样品连续进样5次，计算其相对标准偏差(RSD)。以1 ug/L标样为基础，以3倍信噪比计算各农药组分最低检出限，结果见表2. 氟乐灵 图3.6种农药的标准曲线 表2.各物质标准曲线相关系数、峰面积RSD%(n=5) 及最低检出限 34 甲氧滴滴涕 0.9998 2.41 0.07 35 甲氰菊酯 0.9996 3.29 0.90 36 氯氟氰菊酯 0.9992 4.85 1.26 37 哒螨灵 0.9997 2.41 0.46 38 氯氰菊酯 0.9992 2.10 2.74 39 丙炔氟草胺 0.998 3.12 2.01 40 氰戊菊酯 0.9993 2.48 0.28 41 苯醚甲环唑 0.9999 1.97 0.53 42 溴氰菊酯 0.998 1.84 0.62 2.3回收率测试 在大豆油中加入农药混标，添加浓度为 0.05 mg/kg，平行处理3份，按照上述步骤进行前处理，测定各农药组分的浓度，计算回收率和相对标准偏差，结果见下表： 表3.样品加标回收率 No. 化合物名称 回收率(%) 平均值 RSD 2 (%) (%) 敌敌畏 103.10 104.29 107.99 105.13 2.43 2 氟乐灵 82.69 90.50 94.16 89.12 6.57 3 甲拌磷 94.31 96.24 98.72 96.43 2.29 4 a-666 92.45 94.46 96.01 94.31 1.89 5 B-666 95.27 98.83 101.00 98.36 2.94 6 Y-666 93.10 97.98 98.58 96.55 3.11 7 百菌清 72.34 72.47 75.92 73.58 2.76 8 8-666 95.23 98.02 99.56 97.60 2.25 9 抗蚜威 102.85 106.03 107.46 105.45 2.24 10 甲基毒死蜱 95.08 98.24 98.57 97.29 1.98 11 嗪草酮 105.37 105.10 108.77 106.41 1.92 12 甲基对硫磷 103.43 109.24 111.79 108.16 3.96 13 七氯 74.44 70.24 71.98 72.22 2.92 14 杀螟硫磷 103.33 109.17 110.89 107.80 3.68 15 马拉硫磷 111.56 117.63 121.97 117.06 4.46 16 毒死蜱 92.81 95.83 94.33 94.33 1.60 17 艾氏剂 73.21 70.84 79.85 74.63 6.26 18 对硫磷 100.41 104.81 107.84 104.35 3.58 19 三唑酮 97.98 103.25 106.95 102.72 4.39 20 二甲戊乐灵 88.80 92.89 93.96 91.88 2.97 21 环氧七氯 87.46 89.22 90.86 89.18 1.90 22 杀扑磷 103.90 107.73 101.28 104.30 3.11 23 反-氯丹 72.64 75.66 75.97 74.76 2.46 24 顺-氯丹 78.14 79.66 80.87 79.56 1.72 25 p，p'-DDE 70.80 74.96 70.68 72.15 3.37 26 狄氏剂 80.69 83.41 80.82 81.64 1.88 27 异狄氏剂 80.17 83.08 83.22 82.16 2.09 28 P，p'-DDD 91.51 93.67 94.80 93.33 1.79 29 β-硫丹 93.57 95.15 96.44 95.05 1.51 30 异狄氏醛 72.94 75.25 71.36 73.19 2.67 31 硫丹硫酸酯 98.76 101.88 104.31 101.65 2.73 32 p，p'-DDT 73.94 75.70 77.03 75.56 2.05 33 异狄氏酮 99.21 100.20 102.68 100.69 1.77 34 甲氧滴滴涕 96.67 98.46 100.79 98.64 2.10 35 甲氰菊酯 89.39 94.27 94.01 92.56 2.96 36 氯氟氰菊酯 90.39 96.69 105.32 97.47 7.69 37 哒螨灵 84.45 88.83 89.60 87.63 3.17 38 氯氰菊酯 92.59 98.88 101.16 97.55 4.55 39 丙炔氟草胺 100.74 101.69 109.91 104.11 4.84 40 氰戊菊酯 93.78 98.64 104.81 99.08 5.58 41 苯醚甲环唑 124.74 126.30 104.80 118.61 10.11 42 溴氰菊酯 83.83 89.92 97.01 90.25 7.31 3结论 使用岛津在线凝胶色谱串联三重四极杆气质联用仪 (GPC-GC-MS/MS)对大豆油中农药残留进行定性定量分析。该方法前处理操作简单，重复性好，灵敏度高，在 0.05mg/kg的加标浓度下，大部分农药的回收率在70.0%~120.0%之间，完全满足日常的农药残留痕量分析工作。实验表明，结合在线凝胶色谱和串联质谱的检测方法能够有效地简化样品前处理过程，同时消除基质干扰，提高分析的选择性和灵敏度。