中药中有效成分含量分析检测方案

北京鸿作盛威科技有限公司 希望能够给您提供更精确、更完美的解决方案 气相色谱法测定心力丸中麝香酮的含量 摘要：麝香酮是麝香的主要成分，现可人工合成。天然的麝香酮为左旋体，合成的一般为右旋体。麝香酮具有扩张冠状动脉及增加冠脉血流量的作用，对心绞痛有一定疗效。 建立心力丸中麝香酮含量的测定方法。方法采用SPBTM1FUSEDSILICACapillaryColumn（30m×0.32mm×1.0μm）毛细管柱，火焰离子化检测器（FID），以N2为载气，柱温：200℃，进样口温度：210℃，检测器温度：225℃。结果麝香酮在0.076～1.5mg·mL-1的范围内与其峰面积呈良好线性关系（r=0.9996），麝香酮的平均回收率为99.5%（n=9），RSD为1.64%。结论本法简便、准确，可用于控制该制剂的质量。 心力丸是本所科研成果，药厂注册品种，国家中药保护品种，质量标准收载于卫生部中药成方制剂第十七册（WS3—B—3150—98）。本品具温阳益气、活血化瘀功能，用于心阳不振、气滞血瘀所致胸痹心痛、胸闷气短、心悸怔忡等证及冠心病、心绞痛。该制剂是由麝香、人参、附子、红花、人工牛黄、蟾酥等中药制成的浓缩丸，现国家规定处方中麝香以人工麝香等量替代使用，因此，人工麝香中主要有效成分麝香酮的含量［1］，对控制该产品质量和保证临床用药安全有效具有重要意义。已有对六神丸等制剂中麝香酮进行测定的文献［2-5］报道。本文用气相色谱法测定心力丸麝香酮的含量，方法简便、准确，可以有效控制该产品质量。 1仪器和试剂1.1仪器岛津GC17A气相色谱仪，FID检测器，N2000数据工作站（浙江智达）；METTLERAE240电子分析天平；AS5150A超声波仪。 1.2试剂、试药麝香酮对照品（中国药品生物制品检定所，批号：071920006，含量测定用，质量分数99.8%）；心力丸（广东省药物研究所制药厂）；无水乙醇、乙醚等试剂均为分析纯；压缩空气、H2、N2均为高纯度的气体（广州气体厂，质量分数达99.9%以上）。 2方法与结果2.1色谱条件毛细管柱:SPBTM1FUSEDSILICACapillaryColumn（30m×0.32mm×1.0μm）；柱温：200℃；进样口温度：210℃；检测器温度：225℃；载气：N2；流速：2mL/min；柱前压：80kPa；空气：300mL；氢气：30mL；尾吹：30mL；分流:50∶1；进样量：1μL。在上述条件下，供试品溶液中麝香酮色谱峰能达到基线分离，供试品与邻峰的分离度大于2.0，峰形对称，人工麝香阴性供试品无干扰，方法具有专属性，按麝香酮计算理论塔板数不低于4500。 2.2线性关系考察精密称取麝香酮对照品0.15194g，置100mL量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；再分别精密量取0.5、1、2、4、5、6、8、10mL置10mL量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，精密吸取1μL进样，测定峰面积，以对照品质量浓度（ρ）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，求得回归方程为A=291382.2ρ 18117.0，r=0.9996，麝香酮线性范围为0.076～1.5mg·mL-1。 2.3供试品溶液制备取本品，研细，精密称取3.5g，置具塞锥形瓶中，加入乙醚30mL，密塞，冷浸12h，滤过，残渣和具皿用少量乙醚洗涤数次，合并乙醚液，挥去乙醚，残渣加无水乙醇使溶解并定容至5mL，摇匀，用0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得。 2.4测定方法精密吸取供试品溶液和对照品溶液1μL，分别注入气相色谱仪中，记录色谱图，以外标法计算供试品中麝香酮含量。 2.5稳定性试验取同一供试品溶液制备后室温放置，分别在0、1、2、4、6、8、10h进样测定，每次进样1μL，测得麝香酮平均含量490.4μg/g，RSD为0.29%。结果表明供试品在10h内测定结果稳定。 2.6精密度试验取麝香酮对照品溶液（0.7597mg/mL）重复测定6次，测得麝香酮峰面积的RSD值为0.15%。 2.7重现性试验取同一批供试品，平行6次精密称取，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，依“2.4”项测定，计算供试品中麝香酮含量，结果其RSD值为1.4%，表明方法重现性好。 2.8回收率试验精密称取已知含量的心力丸（麝香酮含量495.0μg/g）共9份，置具塞锥形瓶中；取高（1.5194mg/mL）、中（0.7597mg/mL）、低（0.07597mg/mL）3个浓度的对照品溶液各3份，每份2mL，置蒸发皿中，通风柜中挥干乙醇，残渣用适量乙醚溶解，移入称取有供试品的具塞锥形瓶，用乙醚洗涤具皿数次，将洗涤液并入锥形瓶，乙醚用量为30mL，其余按“2.3”方法制备，按“2.4”方法测定，结果见表1。 2.9样品测定取本品6批，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.4”法进行测定。 3讨论3.1提取方法的选择分别考察了超声提取法和浸渍法，结果见表3。结果表明：用乙醚作溶剂的2种提取方法有偏差（相对偏差为3.1%），浸渍法提取比超声法提取损失少，或者说提取较完全；在产品含量测定时采用浸渍法提取，提取适宜时间为12h；在生产过程中的产品质量检测则可采用超声提取方法。 3.2色谱柱的选择曾采用强极性毛细管柱（SHIMADZUCBP20M25025）进行试验，结果麝香酮很难达基线分离，且被测组分峰有拖尾现象。