婴幼儿奶粉中粗脂肪检测方案

TN-1用全自动快速溶剂萃取(APLE)技术测定婴儿奶粉中的粗脂肪 样品基体：：幼儿奶粉(丹麦) 仪器设备： APLE2000(带33ml样品萃取池，60ml收集瓶)分析天平 研钵和研杵 50ml锥形瓶(脂肪收集瓶) 100ml分液漏斗 溶剂蒸发仪或氮吹仪 水浴锅 烘箱(室温~225℃) 通风橱 试剂：硅藻土，石英砂，玻璃珠，乙醇，乙醚，石油醚，氨水 APLE溶剂：：正己烷，二氯甲烷，甲醇，水 APLE萃取条件： 萃取溶剂： 正己烷/二氯甲烷/甲醇=5：2：：1(V/V/V) 加热温度： 80℃ 萃取压力： 10mpa 加热时间： 1min 静态时间： 1min 淋洗体积： 40% 吹扫时间： 40S 循环次数： 3次 清洗： 0n 预热温度：80℃ 总萃取时间： 8min 溶剂总量：约35ml 实验步骤： 1，，脂肪收集瓶的准备 于干净的50ml 锥形瓶中加入几粒洁净玻璃珠，放入烘箱中，102±2℃，干燥1h。然后使收集瓶冷却(防尘)至天平室温度，将收集瓶放到分析天平上称量，精确至0.1mg，备用。 2，样品处理 用天平称取Hydromatrix硅藻土 10g，用移液器吸取1.33ml水滴加到硅藻土上，研磨至颗粒<1mm，湿度均匀。然后称取幼儿奶粉5g(mo)， 准确到0.1 mg，与之前加了水的硅藻土充分混合、研磨(注意不能使奶粉结块)，然后将分散好的奶粉样品装入33ml萃取池中，空隙用石英砂尽量填满，作n个平行样。 3，样品萃取 在样品处理前预先开机，按照上述 APLE 萃取条件设置萃取参数，保存方法文件，配制萃取溶剂：正己烷/二氯甲烷/甲醇=5：2：1，并使仪器开始预热。待样品全部填充完毕后，将萃取池放在仪器样品盘上，调出方法文件，进行依次萃取(如果之前溶液体系与现用溶剂 不同，应单独运行“清洗”操作3遍，以消除溶剂及其它可能发生的干扰)。 4， 溶剂蒸发 萃取完成后，将收集瓶中的萃取液缓缓倒入脂肪收集瓶中，然后用萃取溶剂小心冲洗收集瓶内壁，并将冲洗液收集到脂肪收集瓶中。要小心操作，以防溶剂溅到脂肪收集瓶外壁。然后采用蒸发的办法除掉溶剂，65℃水浴加热，氮气吹扫至近干。 5，烘干称重 将脂肪收集瓶放入放入烘箱中，102±2℃，加热1h，取出脂肪收集瓶冷却至天平室的温度。称量，精确至0.1mg。 6，采用 GB5413-1997 方法萃取奶粉中的粗脂肪 在使用 APLE 萃取奶粉中脂肪的同时，采用国标的方法，即罗兹-哥特里(RG)法，对同种幼儿奶粉中脂肪含量进行萃取称量。实验步骤主要有乙醇-氨溶解分散，乙醚-石油醚提取，液液分离等，详细操作步骤参见附录。 幼儿奶粉中粗脂肪含量计算 式中：m(g)空脂肪收集瓶质量； m2(g)萃取液蒸干后脂肪收集瓶的质量； mo(g)萃取池中奶粉的质量。 实验结果 实验1 幼儿奶粉 粗脂肪% APLE 法 RG法 APLE/RG 1# 23.2 23.5 98.7% 2# 23.8 101.2% 3# 23.0 97.9% 4# 22.8 97.0% Average 23.2 98.7% RSD 1.86% ///////// 实验2 幼儿奶粉 粗脂肪% APLE 法 RG去 APLE/RG 1# 19.4 21.2 91.5% 2# 20.6 97.2% 3# 21.0 99.0% 4# 23.4 110.0% 5# 20.6 97.2% Average 21.0 99.0% RSD 7.00% ///////// 实验3 幼儿奶粉 粗脂肪% APLE 法 RG法 APLE/RG 1# 20.0 20.1 99.5% 2# 18.8 93.5% 3# 19.6 97.5% 4# 19.4 96.5% 5# 19.4 96.5% Average 19.5 97.0% RSD 2.23% ///////// 实验4 幼儿奶粉中粗脂肪的萃取量(粗脂肪%)与静态时间(S)的关系 静态时间/S 粗脂肪% 300 21.0% 240 20.0% 180 20.2% 120 19.8% 60 21.0% 30 17.8% 附录罗兹-哥特里(RG)法测定婴儿奶粉中的脂肪含量 实验步骤： 1..实验准备 A. 脂肪收集瓶于干净的50ml 锥形瓶中加入几粒洁净玻璃珠，放入烘箱中，102±2℃，干燥1h。然后使收集瓶冷却(防尘)至天平室温度，将收集瓶放到分析天平上称量，精确至0.1mg，备用。 B. 水浴锅 调节水浴锅温度至65℃，在 100ml具塞锥形瓶中加入去离子水，放于水浴一起加热，待其恒温。 2.用分析天平(最小感量为 0.1mg)准确称取 2g婴儿奶粉置于一50ml 干净玻璃离心管中，然后加入10ml 已预热好的65℃的去离子水，振荡待其混匀后，用自来水冷却至室温。 3. 向冷却后的奶粉溶液中加入2ml浓氨水，振荡混匀后放入65℃水浴锅中加热15到20分钟，然后用自来水冷却至室温，转移到100ml分液漏斗中。 4. 向分液漏斗中加入10ml乙醇，混合摇匀。然后再向分液漏斗中加入25ml乙醚，三手工振荡1min。振荡完成后加入25ml 石油醚(60-90℃沸程)同样振荡30S。然后将分液漏斗放在铁架台上静置 30min， 待其完全分层(两相界面透明清晰可辨)。 5. 取出上面醚层置于脂肪收集瓶中，然后重复步骤“4”，但只用15ml乙醚和1ml石油醚提取，最后醚层也移至脂肪收集瓶中。 6. 采用蒸发的办法除掉溶剂，65℃水浴加热，氮气吹扫至近干。将脂肪收集瓶放入烘箱中，102±2℃，加热1h，取出脂肪收集瓶冷却至天平室的温度。称量，精确至0.1mg。