预防类生物药品中含量测定检测

根据《中国药典2015版》中的规定进行测定疫苗中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下，转化为氨态氮。加碱蒸馏后，用硼酸吸收后，再以硫酸标准滴定液进行滴定。

使用仪器“吸溶剂”功能向滴定池内注入约30ml的无水甲醇。使用仪器“打空白”功能滴定至终点，去除滴定池内的水分，仪器就绪并保持终点状态。用经过干燥处理的微量进样针精确抽取10μL纯水，选择仪器标定功能，将纯水注入到滴定池内液面以下，开始标定。

Column: ChromCore C18, 5 μm Dimension: 4.6×250 mm Mobile Phase: 25/75 v/v 甲醇/40 mM磷酸二氢钾溶液 (含5 mM四丁基 硫酸氢铵), pH6.2

Column: ChromCore C18, 5 μm Dimension: 4.6×250 mm Mobile Phase: 25/75 v/v 甲醇/40 mM磷酸二氢钾溶液(含5 mM四丁基硫酸氢铵), pH 6.2

Column: BioCore SEC-500, 5 μm Dimension: 4.6×300mm Mobile phase: 150mM Phosphate Buffered Saline (pH 6.8) Flow rate: 0.35 mL/min Temperature: 30 ℃ Injection: 5 μL Detection: UV 280 nm Sample: Fusion Protein（1 mg/mL in water）

通过互补运用三种水解方法，并使用氨基酸分析仪进行测定，得以全面地分析了IgG单克隆抗体的构成蛋白质的氨基酸。根据结果计算出氨基酸组成，并通过与推测的组成进行比较，可用于蛋白质类药品的试验。

依降钙素别名益钙宁，由包含L-2-氨基辛二酸在内的31个氨基酸构成，是以提高降钙素的稳定性为目的而设计的合成多肽（分子量3363.77），主要应用于高钙血症、骨质疏松等骨科疾病的治疗。 氨基酸组成鉴别是此类肽制剂的一种品质评价方法。在此我们使用L-8900型日立全自动氨基酸分析仪，以日本药典规定的分析方法（使用3 μm填充剂的色谱柱）得到了依降钙素的氨基酸组成。本次试验所用依降钙素为市售制剂。

双特异性抗体是含有2种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子(细胞)之间架起桥梁，激发具有导向性的免疫反应，是基因工程抗体的一种，现已成为抗体工程领域的热点，在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。双特异性抗体药物具有浓度低及药效显著的特点，传统紫外-可见分光光度法只能准确检测A280 nm，在0.3~0.7范围的蛋白浓度，无法准确测定低浓度蛋白样品。 本应用中作者采用了TSKgel G3000SWXL尺寸排阻色谱柱建立了测定低浓度双特异性抗体药物浓度方法，该方法同时也适合于中、高浓度药物浓度检测。

在单克隆抗体药物的初期研发阶段中，需要对细胞株进行筛选，选出能产生滴度较高、ADCC活性较高的细胞株。东曹公司推出的新型亲和色谱柱FcR-IIIA-NPR能?够基于抗体糖链结构的差异，对细胞培养液中的抗体进行HPLC分析，将繁琐的抗体生物学活性测定法化繁为简，获得重复性良好的分析结果。

The Stopped Flow method is used to analyze reactions occurred during the duration of several milliseconds and several seconds meanwhile the CD measurement provides valuable information regarding the protein’s secondary structures and environment of aromatic amino acids. Therefore, CD measurement with Stoppedflow method provides one of the best techniques in analyzing the protein’s Unfolding and Refolding process. Concanavalin A (derived from Jack bean) in natural state has abundant β-sheet structures, however, it is known that its structure changes into the one with rich α-helix under trifluoroethanol (TFE) and its Unfolding process has been reported also. In this application, the model SFS-492 High-Speed Stopped-flow System was used to measure the Unfolding process of Concanavalin A under TFE. The Concanavalin A’s in pH2 hydrochloric acid gives a CD spectrum specific to β-sheet structure. In contrast, in a solution with 50% of TFE added it has a CD spectrum specific to α-helix structures. As seen in Figure 1, a big change from abundant β-sheet

《2005年版中国药典》中关于疫苗冻干粉中水分的测定内容中，包括卡尔费休容量法和库仑法两种方法，使用者可以选择其一。但是，因为疫苗冻干粉的装量小（大约每支0.03~0.05g），为了减少取样时间长而导致引入环境水分所造成的误差，同时也为了节约样品使用量，所以，使用测量精度较高的卡尔费休库仑法（检测限可以低至ppm级的水分）进行其水分测定，是一个理想的选择。

双链DNA病毒引起人类大多数疾病。疱疹病毒和腺病毒家族和乳头瘤病毒在人体中会产生相似的症状。而且，由于病毒抗原基因组的保守，对于特殊病毒的血清学和蛋白诊断确认是非常复杂的。高度的蛋白同源性和血清交叉反应导致双链DNA病毒物种之间区分是非常困难的。本研究的目的是发现识别最优的分泌高度特异性、无交叉反应的单克隆抗体的细胞系，用于生物治疗的开发。 ClonePix系统用来高通量从母本的杂交瘤细胞中（历史数据表明母本的细胞系产量少于1mg/L的单抗）筛选数以百计的亚克隆。分泌高IgG的活细胞进一步用客观评价细胞生长的CloneSelect Imager系统来评估。高效自动化克隆选择技术旨在挽回高滴度的杂交瘤细胞系，这些细胞系能生产抗原高特异性的抗体。ClonePix和CloneSelect Imager配套技术为免疫诊断技术发展提供了足够的病毒抗原的特异性抗体。 优势： 1.相比传统方法，能够筛选更多克隆，增加发现稀有、高产分泌子的可能性 2.独特的流程生产高滴度的杂交瘤细胞 3.增加发现最优细胞生产器的可能性

核酸药物以其疗效显著、开发周期短成为临床用药和新药研发市场的热点，而在药物研发阶段，样品的纯度需要符合要求，而在纯化环节，由于纯化工艺路径的差异，一般有两种方法可供选择。反相色谱法和离子交换层析法，而本文主要介绍了其中一种，反相色谱法。

化学防晒霜配方中含有紫外线 (UV) 过滤化合物，可预防皮肤晒伤和 DNA 损伤。本应用简报开发并验证了一种对样品进行前处理，然后对防晒产品中的活性 UV 过滤 剂成分进行定量分析的可靠方法。在进行 HPLC 分析前，采用有机萃取，然后通过膜过滤，从防晒乳液中提取活性成分。虽然参比标准分析物的保留时间重现性极佳(%RSD ≤ 0.11) ，但在色谱柱上连续进样防晒霜样品时，观察到严重的保留时间漂移、基线漂移和峰形不规则。使用 Agilent Captiva EMR-Lipid 色谱柱解决了色谱问题，去除了提取样品中的基质脂质。结果实现了可接受的定量准确度和回收率水平(95%–103.5%)，提高了连续进样 7 种非处方防晒产品中所有紫外线过滤剂保留时间的一致性。

postnova公司的AF2000MT型中温型非对称流动场场流分离仪，可以完整、详细、较快速地分析重组抗体本身及其碎片和集聚体的含量、分子量分布，结合激光散射检测器、四毛细管粘度检测器，还可以得到大量的构型信息。特别是，半导体制冷的场流分离通道盒温控箱，使分离在低于室温下进行，从而保证了更好的分离效果、更好的灵敏度和精度、更好的色谱图曲线。此外，分离过程可以调节，也是postnova的AF4仪器的一大特点，通过梯度式调节样品输送泵与交叉流泵的泵速比例，即可实现分离过程可以调节。大幅度提高了AF4仪器的分离分辨率。在线浓缩技术，是通过加大样品进样量、同时延长样品聚集时间，使低、极低浓度样品在样品聚集环节就实现浓缩，然后再分离分析。这也是postnova仪器的一大技术优势。