液体乳中非法添加检测

本文参建立了由LabTech SepLine SPE全自动固相萃取仪净化液态奶中的三聚氰胺，并用HPLC进行含量测定的方法。SpeLine全自动固相萃取系统的密闭性及溶剂回收功能， 可保护操作人员免受有毒有害物质的危害。同时降低了实验室工作量，提高了工作效率，保证结果的平行性和准确性，具有较高的回收率。

本文依据《GB/T 22388-2008》介绍了一种通过使用配有UV检测器和C18反相柱的赛里安LC6000高效液相色谱仪检测原料乳及乳制品中三聚氰胺的方法。 结果在0.8-80μg/mL范围内三聚氰胺的线性良好（R²=0.9997）。保留时间和峰面积的RSD％值分别为0.028和0.97。

东曹公司推出的TSKgel Amide-80色谱柱属于最常用的HILIC色谱柱之一，可以非常迅速并有效地分离糖类、多肽、以及低分子量的极性药物。尤其在针对低聚糖的分析上极具优势，Amide-80色谱柱现已成为国际低聚糖分离的标准。 本报告介绍了使用TSKgel Amide-80色谱柱分析奶粉中的三聚氰胺及三聚氢酸的应用。

2013 年1 月，新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的有毒物质双氰胺(二氰二氨Dicyanodiamide，DCD），已经下令禁售含有DCD的奶制品。中国的进口奶粉八成来自新西兰，全球60%以上的奶源产自新西兰。新西兰奶农通常会在牧草上喷洒双氰胺，防止肥料中的副产品硝酸盐流入河流和湖泊。

仅用15 min就能完成一针三聚氰胺样品的分析，操作简便，分析时间短，实际样品中无杂质干扰，三聚氰胺在0~2 μg/mL内线性相关系数为0.99991。以S/N=3为检测限，S/N=10为定量限，测定三聚氰胺的检出限和定量限，满足了低浓度定量检测需求。

本资料汇集了2010版药典有关离子色谱的检测项目，并附录了药典中对离子色谱技术的描述，用以方便广大用户参考。

PerkinElmer作为一家全球技术领先的分析仪器设备供应厂商，我们一直致力于环境与人类健康事业。为了帮助国内食品企业更好的控制整个产业链质量，保证食品安全，PerkinElmer基于优秀的分析仪器平台开发出一系列应用于食品质量快速筛查与风险控制解决方案。我们的方案力求最大限度提高防范食品掺假行为发生的能力，最准确最便捷的给出食品掺假分析结果，控制食品风险因素或关键指标成份。例如应用PerkinElmer公司的直接进样飞行时间质谱系统可以做到在15秒钟之内快速区分出有机奶和非有机奶种类，利用中近红外(M/NIR)光谱技术对奶粉中三大指标成份脂肪，蛋白质和糖类快速无损测定，实现对奶粉质量快速评价与风险控制。

离子色谱一紫外法检测牛奶中三聚氰胺的方法。利用乙腈沉淀牛奶中的蛋 白，十八烷基(ODS)固相革取柱对上清液中的三聚氰胺进行富集。选用SH-Cation 2 阳离子交换色谱柱，以甲烷磺酸(MSA)作淋洗液，240nm紫外波长下进行检测。该法 在0．10～10．0mg／L范围内线性关系良好，Ⅳ为0．9998，检测限为O．50 u g／L，加标回收率 在92．0％-99．8％之间。方法简便易行，灵敏度高，结果准确。

三聚氰胺事件向我们预警了食品安全的重要性，很多牛奶、奶粉等奶制品中均含有三聚氰胺的成分，从2008-2010年都一直作为检测分析行业内的重点项目，离子色谱分析三聚氰胺具有很好的检出限和检测准确度，青岛盛瀚色谱技术有限公司开发的三聚氰胺检测分析方法在2008年国家科技部和质检总局组织的北京大比武中获得第一名的好成绩，请大家参阅

本文采用SPE-HILIC方法分析乳制品中的三聚氰胺。 关于Supelco 美国Supelco公司成立于1966年，一直致力于色谱耗材的研究和生产，是色谱耗材的专业生产公司。超过40年在色谱和分析领域的技术经验，拥有多项专利技术，提供范围广泛的产品：气相色谱柱（包括手性柱）和配件、液相色谱柱（包括手性柱）和配件、固相萃取小柱和装置、固相微萃取手柄和萃取头、空气检测产品、分析标准品和样品瓶等。

三聚氰胺，简称三胺, 学名三氨三嗪, 别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺, 是一种重要的氮杂环有机化工原料, 具 有一定的肾毒性。其分子中含有大量氮元素（大约%），而用全氮法检测蛋白质含量时不能够区分这种“伪蛋 白氮”。不法分子为追求最大利益而不顾消费者的生命健康和安危，向产品中大量添加三聚氰胺粉以提高“蛋白 质”含量。

三聚氰胺，简称三胺, 学名三氨三嗪, 别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺, 是一种重要的氮杂环有机化工原料, 具 有一定的肾毒性。其分子中含有大量氮元素（大约%），而用全氮法检测蛋白质含量时不能够区分这种“伪蛋 白氮”。不法分子为追求最大利益而不顾消费者的生命健康和安危，向产品中大量添加三聚氰胺粉以提高“蛋白 质”含量。 三聚氰酸与三聚氰胺结构类似，在化工生产过程中经常同时存在。若在奶粉生产过程中直接加入化工原料三 聚氰胺，也会同时掺入三聚氰酸。两者在人体内会最终于肾脏处结合成网格结构（不溶于水的大分子复合物）形 成结石。造成肾脏积水，最终导致肾脏衰竭。婴幼儿由于主要营养来源来自于奶粉，大量食用含有三聚氰胺和三 聚氰酸的奶粉，会形成肾结石，长期摄入可致肾衰竭和死亡。成年人长期摄入也会造成不同程度肾损伤

根据《企业生产乳制品许可条件审查细则(2010版)》和《企业生产婴幼儿配方乳粉许可条件审查细则(2010版)》征求意见稿中的要求，三聚氰胺是乳制品和婴幼儿配方乳粉中出厂前的必检项目并且要求批批检验。沃特世公司为您提供了全方位的解决方案，包括仪器(ACQUITY UPLC® TUV/TQD系统、ACQUITY UPLC H-Class或Alliance® 系统)， 样品制备(Oasis® MCX 3cc/60mg)，色谱柱(ACQUITY UPLC BEH HILIC Atlantis® HILIC或XBridgeTM BEH HILIC)，方法简单快捷稳定，大大节省了样品分析时间，降低了分析成本，保证了分析检验结果的可靠性，为提高您的品牌效应锦上添花。

PerkinElmer QSight 200TM 系统完全满足原料乳与乳制品中三聚氰胺的日常检测工作。该系统离子源具有自清洁功能以及质谱接口HSID 热源去溶剂技术，提高仪器抗污染能力，从而获得更低的噪音，更低的检测限，从容应对复杂基质的食品安全检测。

参照 NY/T 1372-2007，使用岛津的 GCMS-QP2010 Plus 测定了奶粉及液态奶制品中三聚氰胺的残留。对样品进行前处理，三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化后，用衍生化试剂（N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺 BSTFA+1%三甲基氯硅烷 TMCS）进行衍生，用 GCMS 进行定性分析和定量分析。检测方法完全满足目前三聚氰胺分析的要求。

本文采用沃特世超高效液相色谱UPLC与高灵敏度三重四极杆Xevo TQ-S，开发了奶粉中三聚氰胺的检测方法，此方法建立在HILIC机理的BEH Amide色谱柱上。对于基质中添加1 ppb的待测物，经过DisQuE基质分散样品制备盒净化后进样，不但峰形良好、不受基质干扰 影响，灵敏度也完全满足检测要求。

目前市场上牛奶的价值在于其中的蛋白质，其蛋白质含量的标准检测方法是对氮含量进行测试，然后推算出其蛋白质含量。因此添加一些氮含量高的化学物质例如尿素，能够在降低成本的情况下提高牛奶的表观氮含量。天然牛奶中尿素的含量大约在0.02%-0.05%，而牛奶中高含量的尿素通常是掺杂所得。另一种掺杂物蔗糖通常用于提高牛奶中碳水化合物的含量和重量，这也使得在通过标准乳糖测试的同时可以添加更多的水。本文介绍的近红外光谱配合PerkinElmer的掺杂物筛查技术（Adulterant Screen）可以用于检测任何故意或意外的牛奶掺杂。

影响牛奶口感的最主要因素就是牛奶的酸值，酸值的大小还会影响牛奶的保质期，所以酸值的测定是测试牛奶的一个重要指标。

本文建立了固相萃取-高效液相色谱法测定牛奶中的三聚氰胺的线性方程，相关系数为0.999。该法操作简便、灵敏度和精密度高、检测线性范围宽、回收率稳定，适用于奶站、乳品厂和实验室的快速筛选检测.

本文采用沃特世超高效液相色谱UPLC与高灵敏度三重四极杆Xevo TQ-S，开发了同时分析奶粉中双氰胺和三聚氰胺的检测方法，此方法建立在HILIC机理的BEH Amide色谱柱上。对于基质中添加1 ppb的待测物，经过DisQuE基质分散样品制备盒净化后进样，不但峰形良好、不受基质干扰 影响，灵敏度也完全满足检测要求。

本文建立了乳制品中三聚氰胺的 GC-MS分析方法；试样经超声提取、固相萃取净化后，进行硅烷化衍生，衍生产物采用选择离子监测模式扫描，外标法定量。该方法回收率在80-108%之间，相对标准偏差小于6%，在0.05ug/mL～2ug/mL之间保持良好的线性，相关系数大于0.999，最低检测限为 0.01mg/kg。

应用GC-MS3100 分析测定奶粉中的三聚氰胺，参照国标GB/T 22388-2008 和地方标准DB13/T 1000-2008，采用SIM 离子扫描方式，外标法定量，对气-质联用分析条件进行了考察。该方法在乳制品中三聚氰胺的加标回收率在80-108%之间，相对标准偏差在5%以内，在0.05mg-50mg/l 之间保持良好的线性，相关系数在0.999 以上， 最低检测限稳定在0.01mg/kg。

可节约成本, 缩短保留时间 • 检测食品,效果较好;吡啶含量低,灵敏度高. • 样品处理简单; 衍生化试剂进样体积小,进样口和柱免受污染. • 保留时间缩短,灯丝寿命更长. 摘要 气相色谱和质谱(GC/MS)用于分析三聚氰胺和相关的化合物如三聚氰酸, 三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺. 该方法以 FDA方法-GC-MS 方法检测与确认三聚氰胺及其类似物,(第二版, 2007年5月7日)为基础, 经多处修改并优化了分离方法. 分析物通过相对保留时间再配合质谱方法,很容易鉴定. 分析干燥食品中的高或低浓度三聚氰胺是很成功的,基质成分不会同相关的成分共同洗脱出来. 介绍 2007年发生了好多宠物食品招回事件,动物食用污染食品后生病,有些已经死亡.动物生病与三聚氰胺污染有潜在联系, 尽管人们认为三聚氰胺毒性小或几乎没有毒性.三 聚氰胺是一种工业化学原料,用于塑料制品,粘胶, 阻燃剂,纺织和其它原料的生产.三聚氰胺不是食品添加剂,但在宠物食品及其它含蛋白质食品中发现有三聚氰胺. 大家认为它的毒性是由于三聚氰胺与三取氰酸结合形成水不溶性晶体. 晶体在肾脏形成, 收起疾病甚至肾衰竭. 随着研究的深入, 一致认为三聚氰胺和三聚氰胺副产物经常被添加在蔬菜蛋白产品中,如小麦谷蛋白和大米蛋白. 这样可人工提高产品中蛋白质的含量. 凯氏定氮法用于测定蛋白质的含量. 也可测定氮的含量. 蛋白质分解后, 释放出氮,氮转化成氨 . 氨水含量通过滴定的方法测定,同蛋白质的含量也相关. 当样品中加入非蛋白质的含氮成分时,用此方法测定结果偏高,虚假成分太多. 三聚氰胺及其副产品加入蛋白制品中能升高蛋白的含量. 下图展示的是三聚氰胺及副产物的化学结构式,氮含量非常高, 是理想的非蛋白氮原料. 不幸的是, 三聚氰胺副产品不仅含有三聚氰胺, 还有三聚氰酸, 三聚氰酸二酰胺, 和三聚氰酸一酰胺, 导致动物毒性. 鉴于三聚氰胺的副作用, 进口产品需要检测三聚氰胺, 三聚氰酸和相关化合物的含量.

"文章介绍了在参考《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》 (GB/T22388-2008)方法下，利用PE LC对试样中的三聚氰胺进行定性和定量分析，结果：方法检出限为1mg/kg。回收率在95％左右。"

CEM SPRINT——目前世界上唯一的真蛋白质快速测仪，诞生于2007年， 2008年获IFT创新奖。该仪器采用了生命科学领域的iTAG“蛋白质分子标签”技术，这项技术可以给蛋白质贴上“标签”，提供一种在样品中直接测量真蛋白质含量的手段。

"文章介绍了在参考《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》 (GB/T22388-2008)方法下，利用PE LC对试样中的三聚氰胺进行定性和定量分析，结果：方法检出限为1mg/kg。回收率在95％左右。"

由于测试过程的快速和无损，近红外（NIR）光谱是一种很有吸引力的粉末物质中掺杂物的筛查工具。当然，对于ppm或ppb量级的痕量杂质，近红外光谱的灵敏度无法与像GC/MS这样的技术竞争。如果没有样品预处理过程，近红外光谱的检测限在0.1%的水平，这对于含量一般在百分之几的商品掺杂物的筛查已经足够了。三聚氰胺（melamine）是一种商品掺杂物。如果使用凯氏定氮法或燃烧法通过总氮含量间接测定蛋白质的含量，加入三聚氰胺可以提高样品中表观蛋白质含量。在奶粉和谷朊粉（面筋粉）中掺杂三聚氰胺的恶性事件已经发生了很多。目前食品和药物中三聚氰胺的含量上限一般在1~2 ppm。近红外光谱并不适合于检测成品中如此低含量的三聚氰胺，但是非常适合于筛查原材料。相比于在成品中检测出三聚氰胺，如果在原材料中检测出三聚氰胺则更容易追查其来源。

色谱柱：Diamonsil C18(2) 200 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99602) 流动相：缓冲溶液/ 乙腈=94/6 流速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱温：30 oC 检测器：UV 240 nm

流动相：缓冲溶液/ 甲醇=92/8 （ 缓冲溶液：0.005 mol/L 四丁基溴化铵+ 0.005 mol/L 磷酸氢二钠水溶液） 流速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱温：30 oC 检测器：UV 226 nm 注：本方法中，目标化合物是由HPLC 测定的，但这并不表明其他仪器不适合。当使用者采用其他方式进行检测时，同样可以采用本方法进行样品前处理。

三聚氰胺---无味、白色单斜晶体，化工中常用于塑料及肥料生产，其含氮量高且成本低，人体大量摄入三聚氰胺会引发肾结石等多种泌尿系统疾病，严重将危害生命。 动物奶源原乳及乳制品食物营养丰富在市场及人们的饮食中十分常见。乳品市场广泛，市场竞争激烈，常以蛋白质含量评价乳品质量，而最常用的蛋白质检测方法为凯氏定氮法---以氮含量来推算蛋白质含量。2008年“三鹿”牌奶粉厂家以次充好，将三聚氰胺添加到奶粉中利用其氮高含量来充当蛋白质，给30万家庭带来了不同的伤害和影响。尽管已过去10余年，提起三聚氰胺仍让人心惊胆颤。 本方案参考GB/T 22388-2008 《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中高效液相色谱法，以科学仪器为眼睛，探究乳品安全。