Kjeltec 9 ™蒸馏单元测定葡萄酒中的挥发酸

在预处理过程中，必须将二氧化碳从葡萄酒中去除。挥发性酸通过蒸汽蒸馏从葡萄酒中分离出来，并用标准氢氧化钠滴定。在这些条件下蒸馏的游离和结合二氧化硫(亚硫酸盐)的酸度应从馏出液的酸度中减去。这是通过使用碘溶液对蒸馏样品进行两次额外滴定来完成的。蒸馏单元测试挥发酸的样品，同样也使用 Kjeltec 8200 蒸馏装置和 FOSS WineScan 仪器进行测量，以验证 Kjeltec 9 蒸馏单元的性能，并与 Foss Qkit 8 葡萄酒参比样品进行了比较。 AN 5524 KjeltecTM 9 蒸馏单元 测定葡萄酒中的挥发 酸 FOSS Kjeltec'M 9 蒸馏单元 Kjeltec 9 是 一 种自动化的蒸馏装置，主要用于遵循凯氏定氮法进行 蛋白质分析，但也可广泛用于许多不同的蒸馏过程。该解决方案对 于检测量不那么大的实验室是完美的，并可以执行许多不同的蒸馏 方法。 样品类型 本应用摘报中描述的方法包括以下 类型的葡萄酒：● 干白葡萄酒 ● 玫瑰葡萄酒 ● 红葡萄酒 FOSS Nils Foss Alle 1 DK-3400 Hi l lerod Denmark Tel ： +45 7010 3370 Rev.1 应用信息 1.1 介绍 本应用摘报使用 Kjeltec 9 蒸馏单元分析葡萄酒中的挥发酸。该方法参考OIV-MA-AS313-02R201511]。挥发性酸度衡量的是葡萄酒中低分子量(或可蒸馏的)的脂肪酸，通常被认为是醋的气味。酿酒师 通常最关心的是醋酸(AA)，占葡萄酒中蒸汽可蒸馏酸的93%以上。 1.2 原理 在预处理过程中，必须将 二 氧化碳从葡萄酒中去除。挥发性酸通过蒸汽蒸馏从葡萄酒中分离出来，并用标准氢氧化钠滴定。 在这些条件下蒸馏的游离和结合 二 氧化硫(亚硫酸盐)的酸度应从馏出液的酸度中减去。这是通过使用 碘溶液对蒸馏样品进行两次额外滴定来完成的。 蒸馏单元测试挥发酸的样品，同样也使用 Kjeltec 8200 蒸馏装置和 FOSS WineScan 仪器进行测量，以验证 Kjeltec 9 蒸馏单元的性能，并与 Foss Qkit 8 葡萄酒参比样品进行了比较。 注意：山梨酸的酸度可能被添加到葡萄酒中，但未进行补偿，因为山梨酸主要存在于含糖量高的葡 萄酒中，如甜酒。 在一些国家，在分析前添加水杨酸是为了稳定葡萄酒，但未进行补偿。水杨酸被用作防腐剂，并不 自然存在于酒中；主要用途是作为果汁或葡萄的防腐剂。 1.3 安全防范 小心的操作试剂来保证安全。对于试剂的操作可以参考有关的 MSDS 。 应始终佩戴个人防护装备，如手套、实验室工作服和防护眼镜等 。处理热的消化管时也要加以注 意。 遵守仪器用户手册和 MSDS 中的安全说明。 Fig.1 个人防护设备 1.4 设备 A.移液管 B.Kjeltec 9 蒸馏单元-必须通过 OIV-MA-AS313-02：R2015[1]中描述的蒸馏测试。 C . 750 mL 蒸馏管 D. 500 ml锥形瓶-用于手动滴定 E. 滴定装置 F. 吸管-20ml G. 天平 H. 用于移除 CO2的设备，如超声水浴 1.5 试剂 在分析中，使用分级纯以上级别的试剂。 A. 乙酸，0.1M B.盐酸 37%(r20=1.18 to 1.19 g/mL) /蒸馏水按 1/4 进行稀释 C. 碘溶液， 0.005 M (lodine standardised solution 0.01 N in aqueous solution) D. 乳酸溶液， 0.1M ●将100毫 升乳酸稀释于400毫 升蒸馏水中。将此溶液置于 一 个在沸水浴中的蒸发皿中加热4小时，偶尔用蒸馏水加满。冷却后，稀释到一升。用1M氢氧化钠溶液滴定 10ml溶液中的 乳酸。将溶液调至 1M 乳酸(90g/L)。 E. 酚酞溶液，1%，溶于96%(m/v)中性酒精中。 F. 结晶碘化钾 四硼酸钠(Na2B4O7·10H2O)饱和溶液，在20℃下约55 g/L。 氢氧化钠标准溶液 0.1M 淀粉溶液， 5 g/L. ● 将5克淀粉与约500毫 升水混合 。煮沸，持续搅拌，煮沸10分钟，加入200 克氯化钠。冷 却时，稀释到到一升 。 J. 结晶酒石酸 1.6 分析细节 1.6.1 去除二氧化碳 在分析挥发性酸之前需要去除 二 氧化碳。可以采用不同的方法，例如，使用真空、振摇或超声波 浴。 1.6.2 仪器的预先检查 Kjeltec 9 蒸馏单元必须通过以下 三 个测试： 1.P 在750毫 升蒸馏管中加入20毫 升蒸馏水。蒸馏并收集250毫 升馏出液，向馏出液中加入0.1mL 0.1 M 氢氧化钠溶液和两滴酚酞溶液。粉红色的颜色必须稳定至少10秒(蒸汽中不含 二 氧化 碳)。 2.将20ml 0.1M醋酸溶液加入750 mL 样品管中。蒸馏并收集250毫升馏出液。用0.1M的氢氧 化钠溶液滴定，滴定液的体积必须至少为19.9mL(至少99.5%的乙酸被回收)， RSD 应小于 1%。 3.将 20ml1 M 乳酸溶液放入 750ml 蒸馏管中。蒸馏并收集250毫升馏出液。用0.1M氢氧化钠溶 液滴定，滴定液的体积必须小于 1.0mL(蒸馏的乳酸不超过 0.5%)， RSD 应小于 1%。 注释：推荐每个测试至少做三个平行。 1.7 蒸馏程序 样品类型 样品管(mL) 样品量(mL) 酒石酸(g) 蒸馏时间(min.) SAfE (s) 蒸汽功率(%) 馏出液体积(mL) 葡萄酒 750 20 0.5 7 5 100 250 Table 1 一 般蒸馏程序 1.8 步骤 1.8.1 样品准备 将样品置于超声浴中至少5分钟，或直到观察到没有可见气泡，即可去除二氧化碳 样品应在当天进行分析；当 瓶子被打开后，可以保存 一 天。 1.8.2 蒸馏 1. 打开仪器，完成一个成功的自检。 2.按1.6.2进行3个测试。 3.按 Table 1 的推荐设置蒸馏程序。 4. 转移 20ml 去除 CO2的葡萄酒到蒸馏管中。 5.加入0.5g酒石酸。 6. 将蒸馏管放入仪器。 7.开始蒸馏，收集约 250 mL 馏出液到 500 mL 锥形瓶中。 8. 将馏出液从仪器中取出，准备进行手 工 滴定。 1.8.3 滴定 1.滴定步骤1：用标准氢氧化钠溶液滴定馏出物，用两滴酚酞作为指示剂。注意 当 粉红色稳定时所 使用的滴定剂的体积。使用的氢氧化钠的体积记录为n ml 。 2.滴定步骤2：向蒸馏管中加入四滴稀盐酸，2毫升淀粉溶液和 一 些碘化钾晶体。用 0.005 M 的标 准碘溶液滴定游离二氧化硫 。注意当淡蓝色稳定时滴定液的体积。使用的体积记录为 n'mL。 3.滴定步骤3：加入饱和的四硼酸钠溶液，直到重新出现粉红色。用0.005M的标准碘溶液滴定化 合的二氧化硫。注意 当 蓝色稳定时所使用的滴定液的体积。使用的体积记录为 n"mL 。 注意：确保出口管不低于馏出液表面。这是为了进一步从蒸馏物中释放二氧化碳。 1.9 结果表达 挥发性酸度可以用几种方式表示： g/l 硫酸、醋酸、酒石酸或毫当量。 1.9.1 计算 计算方法 挥发性酸度以每升毫克 当 量(meq/L)表示，精确到小数点后 一 位： 挥发性酸度以每升硫酸克数(硫酸/升)表示，精确到小数点后两位： 挥发性酸度，以每升乙酸克数(VA，AA/L)表示，取小数点后两位： 重复性(r)： ● r=0.7 meq/L ● r= 0.03 g硫酸/L ●厂 r= 0.04 g 乙酸/L 重现性(R)： ●.R=1.3 meq/L ●. R=0.06 g硫酸/L ● R .=0.08g乙酸/L 1.9.2 方法性能 样品 用三种常见的葡萄酒类型，白葡萄酒、玫瑰葡萄酒和红葡萄酒，对 Kjeltec 9 蒸馏单元的性能进行验 证。在分析样本之前，对仪器进行预检查测试。样品去除二氧化碳，并在当天进行分析。 方法性能结果基于 Table 2 的测试条件。 用于样品分析的标准滴定液为0.1 N NaOH 和0，01N碘液。蒸馏和滴定按 1.8.3描述的步骤进行。 样品类型 样品量(mL) 酒石酸(g) 蒸馏时间(min.) SAfE (S) 蒸汽功率(%) 馏出液体积(mL) 白葡萄酒 20 0.5 7 5 100 250 玫瑰葡萄酒 20 0.5 7 5 100 250 红葡萄酒 20 0.5 7 5 100 250 Table 2 用于性能数据的样品及分析条件 蒸馏单元结果 该研究是 FOSS 使用 Kjeltec 9 蒸馏装置和自动滴定器进行的。为了验证，同样的样品在 Kjeltec 8200上也进行了分析。本研究采用此应用简报中描述的程序进行 。 报告的挥发酸结果(VA)用乙酸/L(AA/L)表示。 样品类型 Kjeltec 9 平均结果(VA， grams of AA/L) n SD RSD(%) Kjeltec 8200 平均结果(VA， grams of AA/L) n SD RSD(%) 白葡萄酒 0.55 10 0.014 2.53 0.53 10 0.005 0.89 红葡萄酒 0.36 10 0.004 1.15 0.37 10 0.02 5.79 玫瑰葡萄酒*) 0.20 10 0.013 6.67 0.19 10 0.015 7.83 Table 3 Kjeltec 9 蒸馏单元和Kjeltec 8200 的性能数据 *)对于玫瑰葡萄酒，也使用 FOSS WineScan 仪器进行了分析；脱气样品(n=3)的结果为 0.21 VA， g AA/L， 与 Kjeltec 9 蒸馏单元和 Kjeltec 8200 的结果相似。 也使用 FOSS 的参考样品 QKit 8 套件验证了葡萄酒中挥发性酸的应用。该套件通常用于 FOSS WineScan 分析仪的性能验证。 样品编号 样品(mL) V(NaOH) V' (lodide) V"(lodide) VA grams of AA/L QKit 8 的参比结果VA， grams of AA/L S1 20.00 3.02 3.08 1.41 0.79 0.93 S2 20.00 2.24 3.84 1.85 0.53 0.64 S3 20.00 1.28 4.14 2.05 0.23 0.29 S4 20.00 2.60 2.21 1.10 0.70 0.81 S5 20.00 1.56 2.64 1.33 0.37 0.40 S6 20.00 2.39 2.88 1.50 0.61 0.71 S7 20.00 1.79 2.70 1.40 0.44 0.55 S8 20.00 2.04 2.15 1.20 0.53 0.60 Table 4 Kjeltec 9 蒸馏单元和QKit 8的性能数据 Table 4 蒸馏单元 vs. 参比样品 (QKit 8)的相关图 Table 5 Figure 1： Kjeltec 9 蒸馏单元 QKit 8参考样品的相关图， VA， grams of AA/L X-轴数据来自 Kjeltec 9 蒸馏单元； Y-轴数据来自 QKit 8 的参考结果 1.10 参考方法 [1] COMPENDIUM OF INTERNATIONAL METHODS OF ANALYSIS -OIV， Volat i le acidity Method OIV-MA-AS313-02， Revision 2015. 2 问题和反馈 如果您对这个应用简报有任何问题或反馈，请联系 FOSS 的支持团队。 Jacob Strange Ebbesen 3 版本历史 版本 发布日期 修改内容 批准 1 2022-06-14 首发 JSE