做GFP标记细菌时如何准备转化用的细胞原种

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检测样品: 其他
检测项目: 做GFP标记细菌
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发布时间: 2023-04-04
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准备转化用的细胞原种

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做做GFP标记细菌,如果想要成功标记,用生化培养箱准备转化用的细胞原种是个很重要的过程,下面小编就给大家罗列下准备转化用的细胞原种的过程。1. 取菌液甘油保存-80°C;2. 用接种环直接将冻存的菌种在R2A琼脂平板表面划线,在 23°C生化培养箱内培养16h;(没有必要融化冻存的细菌。当接种环在冻存菌种表面上划过时,将附着足量的细胞。一管冻存菌种可以使用很多次。如果没有生化培养箱,普通的电热恒温培养箱不能设定到23℃,可以在室温下孵育R2A平板)3. 将4或5个分开的菌落转移到含2mL R2A液体培养基的新的干净的15ml培养管中,23°C生化培养箱培养 16h。(菌落直径应该不超过2~3mm。可根据需要设置多个2mL培养物);4. 在每份培养物中,添加无菌甘油至终浓度为 15%(V/V);5. 分装到2.5mL 冻存管中,每管 1mL。将冻存管装入到一个塑料密封袋中,浸入干冰/乙醇浴中5min;6. 将塑料袋及其内容物转移到-80°C冰箱。
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