黑曲霉中糖化酶发酵原理及操作检测方案(摇床)

上海喆图科学仪器有限公司41喆图 400-001-0304世上只有一种英雄主义，就是在认清生活真相之后依然热爱生活 气 用途概述 又称恒温摇床，广泛应用于对温度、振荡频率有着较高要求的细菌培养、发酵、杂交和生物化学反应以及酶、细胞组织研究等应用领域。产品特点 ※集恒温培养箱与振荡器一体功能，一机多用，节约空间； ※箱体内胆及振动台面均采用不锈钢材料，便于清洁维护； ※具有美学设计理念的整机造型及静电喷塑外壳，造型豪华美观； ※慢启动设计，防止骤然启动造成液体类样品飞溅，有效保证样品的安全； ※大屏幕钢化玻璃视窗，内置照明灯光，一键开启关闭，整个工作状态一目了然； ※直流无刷感应长寿命电机设计，宽调速、恒力矩、恒转速、无碳刷、免保养； ※设有补氧透气孔，恒温工作补氧充分，双门结构无需补养时可手动关闭补养充气孔； ※大屏幕液晶显示屏，可连续实时显示温度以及转速和工作时间，操作方便，简单易懂； ※具有运行参数记忆功能，在停电情况下可自动储存，来电后可自动按原设定程序恢复运行； ※内置紫外线杀菌功能，可定期对箱体内部进行消毒，杀灭箱体内循环空气的浮菌，防止污染； ※PID反馈控制，电机转速±1rpm误差以及温度测量精度0.1℃，超过偏离设定值即可声光报警。叠加式摇床(ZX2系列) ※两层叠加组合，各层独立控制，内胆防腐，大屏钢化玻璃窗可全视角观察内部运行情况； ※彩色触摸屏，多模式多步骤操作系统，五段程序模式，单模式可设置30个控制步骤； ※多色实时曲线绘制导出功能，可显示最近两小时温度实时曲线图，可显示系统各项输出状态； ※可实现对电机选择方向正转、反转、正反交替的设置以及的各项运转方向的时间控制。 安全功能 ※运行参数可加密锁定，避免人为误操作破坏实验； ※超温声光报警功能，电机过热、温度失控、异常超温仪器自动切断各自加热电源； ※带制冷功能R系列产品，无需输入制冷系数，全自动调温，避免了繁琐的调温设置； ※可选配不锈钢材质的万能弹簧夹，可放烧瓶、试管、酶标板等(可选配件)。 技术参数 型号 ZYC-100B ZYC-100BR ZYC-111B ZYC-111BR ZYC-263B ZYC-263BR ZGC-9251R ZGC-7446R 电源电压 AC220V 50Hz AC220V 50Hz AC220V 50Hz AC220V 50Hz 振荡频率 启动~300rpm 启动~300rpm 启动~300rpm 启动~300rpm 振荡幅度 26mm 26mm 26mm 26mm 振荡方式 逆时针回旋(可调顺时针) 逆时针回旋(可调顺时针) 逆时针回旋(可调顺时针) 逆时针回旋(可调顺时针) 控制仪表 液晶显示 液晶显示(标配紫外杀菌灯) 液晶显示(标配紫外杀菌灯) 六级可调(0~12000Lx) 托盘尺寸 W*D(mm) 400*370 450*410 920*510 920*510 920*510 740*460 温控范围 RT+5~60℃ 4~60℃ RT+5~60℃ 4~60℃ RT+5~60℃ 4~60℃ 4~60℃ 4~60℃ 制冷功能 无 可制冷 无 可制冷 无 可制冷 可制冷 可制冷 输入功率 350W 550W 600W 700W 700W 1000W 1150W 1250W 控制精度 ±0.1℃ ±0.1℃ ±0.1℃ ≤±2℃(37℃) 温度波动度 ±1℃ ±1℃ ±1℃ ≤±0.5℃(37℃) 出厂标配 50ml*4；100ml*4250ml*3：500ml*3 500ml*28 2000ml*12 2000ml*8 250ml*35500ml*24 Max可选 100ml*16250ml*12500ml*91000ml*4 100ml*20250ml*16500ml*121000ml*5 250ml*361000ml*18 3000ml*85000ml*6 500ml*281000ml*182000ml*123000ml*85000ml*6 250ml*70500ml*48 内胆尺寸W*D*H(mm) 440*405*270 480*450*320 970*565*280 970*565*480(加高款) 980*570*500 880*530*660 外形尺寸W*D*H(mm) 600*580*510 780*682*560 1200*740*800 1200*740*1000 1200*810*1100 950*710*1270 托盘数量 1块 1块 1块 1块 2块 定时范围 1~9999min(可连续运行) 1~9999min(可连续运行) 1~9999min(可连续运行) 1~9999min(可连续运行) 糖化酶的制备 一、实验目的 学习并掌握黑曲霉发酵产生糖化酶的基本原理及操作方法。 二、实验原理 糖化酶又称葡萄糖淀粉酶 (glucoamylase, EC 3.2.1.3)，其作用方式不像α-淀粉酶那样无作用次序,而是从底物链的非还原性末端开始,顺次切下一个个葡萄糖单位,遇到分支处的α-1,6糖苷键时,可将α-1,6糖苷键切开,然后继续作用α-1,4糖苷键,直到产物全部成为葡萄糖为止。但糖化酶对α-1,6糖苷键的作用速度远不及对α-1,4糖苷键的作用速度，因此水解支链淀粉多的淀粉时，需延长水解作用时间或添加部分支链淀粉酶。 我国糖化酶的生产主要由黑曲霉优良菌种经深层发酵精制提炼而成。本实验利用黑曲霉具有多种活力较强酶系的特点，利用淀粉类物质为原料，获得制备淀粉水解糖所需的糖化酶。 三、实验材料 1. 菌种：黑曲霉（Aspergillus niger） 2. 仪器：洁净工作台、灭菌锅、振荡培养箱、高速冷冻离心机、高压灭菌锅 四、实验步骤 实验流程：保藏菌种菌株活化及平板扩大培养摇瓶培养 1.菌株活化及扩大培养 ①制备PDA培养基：去皮马铃薯200 g切成小块，加水约500 mL，煮沸30 min，然后用纱布过滤，滤液加蔗糖20 g，琼脂20 g。溶化后加水定容至1000 mL，分装于250 ml锥形瓶中，121℃灭菌20 min，自然pH。 ②接种：取灭菌后PDA培养基倒平板，冷却后，接种斜面保藏的黑曲霉（Aspergillus niger）菌种，28℃恒温培养3d。 2.摇瓶发酵培养 ①发酵培养基的制备： 玉米粉培养基：玉米粉30g,米糠5g,麸皮5g,加水1000ml,拌匀至无干粉又无结团，分装于250 ml锥形瓶内，每瓶100 ml, 自然pH，121℃灭菌20 min。 ②接种与产酶培养:取培养72h的黑曲霉平板，用打孔器打孔制成菌片。每个锥形瓶中接种12片，28℃振荡培养96 h。 3.离心 将摇床培养4d的黑曲霉发酵液4层纱布过滤后离心（10000r/min，10min）除菌体，所得上清液即为糖化酶粗酶液。