抗生素类检测用净化柱FaVEx-HP肉奶一步通过法简便

        巨研科技公司致力推广多重动物用药一次检验分析，先前已研发成功FaVEx-Nm kit对于102项动物用药一次提取及净化，一个步骤过净化管进行高效能除干扰物，惟每类药项适用之提取溶剂有所差异，本方法针对较高极性33药项， 同样进行一次提取及净化，均可成功达到一次分析之目标， 相较普遍的固相萃取法，处理一批16个样品可在1小时内完成前处理，溶剂使用也仅10 mL/样品；结合FaVEx-Nm 102项及FaVEx-Ag  29项共可检测150项动物用药， 对于动物用药一次检验分析其涵盖范围更完整。以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内酼类及巨环类(表一)，这些药项在一般萃取及固相萃流程均有很大限制及步骤繁杂之缺点，本应用方法同时把三类药项一次同时提取净化，因操作简单只要一步净化，使得人员操作易上手，有机溶剂的使用减少。以Agilent 6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪分析，可以同时检测牛奶中四环素等33项兽药药剂项目，分别添加20ng/g及5ng/g ，添加20ng/g的回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%, ，添加5ng/g的回收率除了Minocycline,Josamycin 及Virginiamycin M1较低外其余回收率均50%以上 (图二) ， 于LOQ部分，  Cloxacillin定量极限0.005 µg/g ，其他均可到0.001 µg/g(表二) 。1,以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内酼类及巨环类共33项。2,添加20ng/g之回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%%。3,定量极限部分， Cloxacillin定量极限0.005 µg/g ，其他均可到0.001 µg/g。4,此方法与FaVEx-Nm互补，巨环类在两种方法均可分析惟在Nm kit 回收不佳时在Hp kit则有很好回收率，例如Lincomycin在Hp kit即好回收率。口 合 名 以GETech FaVEx-Hp快速萃取净化套组分析牛奶产品中高极性多重兽药残留量 应用批注 食品 绪论 作者 古宜加、华宏达 巨研科技股份有限公司 高雄市左营区裕诚路392号 14楼 巨研科技公司致力推广多重动物用药一次检验分析·先前已研发成功FaVEx-Nm kit对于102项动物用药一次提取及净化，一个步骤过净化管进行高效能除干扰物·惟每类药项适用之提取溶剂有所差异·本方法针对较高极性33药项，同样进行一次提取及净化·均可成功达到一次分析之目标，相较普遍的固相萃取法·处理一批16个样品可在1小时内完成前处理·溶剂使用也仅10 mL/样品；结合FaVEx-Nm 102项及FaVEx-Ag 29项共可检测150项动物用药·对于动物用药一次检验分析其涵盖范围更完整。 摘要 以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内疏类及巨环类(表一)·这些药项在一般萃取及固相萃流程均有很大限制及步骤繁杂之缺点·本应用方法同时把三类药项一次同时提取净化·因操作简单只要一步净化·使得人员操作易上手·有机溶剂的使用减少。以Agilent 6470液相色谱-三重四极奶中四杆质谱联用仪分析，可以同时检测牛奶中四环素等33项兽药药剂项目·分别添加20ng/g及5ng/g·添加20ng/g的回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%，·添加5ng/g的回收率除了Minocycline，Josamycin 及Virginiamycin M1较低外其余回收率均50%以上(图二)·于LOQ部分，Cloxacillin定量极限0.005 ug/g·其他均可到0.001ug/g(表二)。 加入10mL 0.5%甲酸(乙腈/甲醇，5/5)以高速震荡机震荡10分钟 以高速震荡机震荡1分钟 4°C， 4000 rpm离心5分钟 取5mL上清液加入FaVEx-Hp萃取套组以每秒1滴流速加压净化收集 取2.5mL澄清液以40度，氮气吸干以20%乙腈水(1%甲酸)1mL回溶 L 以LC-MS/MS分析 以LC-MS/MS分析 移动相流速： 0.4 mL/min。 层析管柱： ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 内径3.0×100mm 1.8-Micron 流动相溶液-A液：水+0.1%甲酸 流动相溶液-B液：甲醇+0.1%甲酸 流动相溶液：A液与B液以下列条件进行梯度分析。 分析仪器： 1290/6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(Agilent) 时间 (min) A(%) B(%) 0.0 98 2 4.0 70 30 6.0 65 35 6.0 50 50 8.0 40 60 12.0 1 99 15.0 10 90 15.1 99 1 ( post time： 2.0min ) 表一丶兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数 Compound Name PrecursorIon Production Ret Time(min) Fragmentor Collision Energy Cell AcceleratorVoltage Polarity 4-Epichlortetracycline 479.1 443.9 6.75 114 17 7 Positive 479.1 462.1 6.75 114 9 7 Positive 4-Epioxytetracycline 461.1 201.1 5.70 119 41 7 Positive 461.1 426.1 5.70 119 13 / Positive 4-Epitetracycline 445.1 410.1 5.26 104 13 7 Positive 445.1 427.1 5.26 104 5 7 Positive Amoxicillin 366.1 349.0 3.90 87 2 4 Positive 366.1 208.1 3.90 87 5 4 Positive 366.1 114.1 3.90 87 17 4 Positive Ampicillin 350.1 106.0 6.39 102 13 4 Positive 350.1 160.0 6.39 102 6 4 Positive 350.1 114.0 6.39 102 29 4 Positive Cefapirin 424.2 292.1 4.52 112 9 7 Positive 424.2 152.1 4.52 112 21 7 Positive Ceftiofur 524.0 241.0 7.96 110 13 7 Positive 524.0 95.0 7.96 110 45 7 Positive Cefuroxime 423.0 318.0 6.39 92 2 4 Negative 423.0 207.0 6.39 92 5 4 Negative Cephalexin 348.1 158.1 5.96 92 6 7 Positive 348.1 106.1 5.96 92 29 7 Positive Chlortetracycline 479.1 443.9 7.27 114 17 7 Positive 479.1 462.1 7.27 114 9 7 Positive Clarithromycin 748.5 158.1 10.32 164 29 7 Positive 748.5 116.1 10.32 164 49 7 Positive Clindamycin 425.2 377.1 8.19 149 17 7 Positive 425.2 126.1 8.19 149 29 7 Positive Cloxacillin 436.1 277.1 10.41 186 13 7 Positive 436.1 160.1 10.41 186 13 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数(续) Compound Name PrecursorIon Production Ret Time(min) Fragmentor Collision Energy Cell Accelerator Voltage Polarity Demeclocycline 465.0 448.0 6.66 106 21 7 Positive 465.0 430.0 6.66 106 17 7 Positive Dicloxacillin 470.0 211.9 10.77 179 29 7 Positive 470.0 452.0 10.77 179 17 7 Positive Doxycycline 445.1 428.1 8.00 155 13 7 Positive 445.1 153.9 8.00 155 29 7 Positive Erythromycin 734.5 158.1 9.52 164 33 7 Positive 734.5 576.1 9.52 164 17 7 Positive Josamycin 828.5 109.1 10.25 206 49 7 Positive 828.5 174.1 10.25 206 37 7 Positive Kitasamycin 772.6 109.1 9.54 206 45 7 Positive 772.6 174.1 9.54 206 33 / Positive Lincomycin 407.2 126.1 5.22 149 29 7 Positive 407.2 359.1 5.22 149 17 7 Positive Mecillinam 326.2 167.1 6.64 144 21 7 Positive 326.2 139.1 6.64 144 33 7 Positive Methacycline 443.0 426.0 7.71 121 13 7 Positive 443.0 381.0 7.71 121 25 7 Positive 443.0 201.0 7.71 121 33 7 Positive Minocycline 458.0 441.0 5.43 155 27 7 Positive 458.0 352.0 5.43 155 45 7 Positive Neospiramycinl 699.5 174.1 6.94 176 29 7 Positive 699.5 142.1 6.94 176 29 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数(续) Compound Name Precursorion Production Ret Time(min) Fragmentor Collision Ehergy CellAccelerator Voltage Polarity Oleandomycin 772.0 158.0 9.62 158 28 7 Positive 772.0 586.2 9.62 158 16 7 Positive Orbifloxacin 396.2 295.1 6.46 144 25 7Positive 396.2 267.0 6.46 144 41 7 Positive Oxacillin 402.1 160.1 10.08 100 11 7 Positive 402.1 243.1 10.08 100 8 7 Positive Oxytetracycline 461.1 426.1 6.06 119 13 7Positive 461.1 443.1 6.06 119 5 7 Positive SpiramycinI 843.5 174.1 7.22 233 41 Positive 843.5 101.1 7.22 233 45 Positive Tetracycline 445.1 410.1 5.98 114 13 7Positive 445.1 427.1 5.98 114 5 7Positive Tilmicosin 869.6 174.1 7.84 285 49 7 Positive 869.6 132.1 7.84 285 53 7 Positive Tylosin 916.5 174.1 9.48 223 45 / Positive 916.5 101.1 9.48 223 53 7Positive Virginiamycin M1 526.3 355.2 10.53 129 13 7 Positive 526.3 337.1 10.53 129 21 7Positive *为定量离子对，定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 网门浩母ww噼回汗一N 浩ww乙之之网一 Virginiamycin M1 表二、、鲜牛奶中兽药33项药剂之线性平方及 LOQ 结论 1，以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内疏类及巨环类共33项。 2，添加20ng/g之回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%%。 3，定量极限部分· Cloxacillin定量极限0.005 ug/g·其他均可到0.001ug/g。 4，此方法与FaVEx-Nm互补·巨环类在两种方法均可分析惟在Nm kit 回收不佳时在Hp kit则有很好回收率，例如Lincomycin在Hp kit即好回收率。 详细信息 有矣本公司产品与服务的其他信息· 请造访本公司网站： www.getech.com.tw 上海分公司：绿巨研科贸易(上海)有限公司 联系电话：021-34612930/13248260650 邮箱： ada@getc.com.cn www.getech.com.tw 本文内容如有任何错误·或是因为提供、实行或使用本数据造成附带或衍生损害·巨研科技恕不负责。本文件中的信息、说明和规格可能随时变更·恕不另行通知。 巨研科技股份公司·2019年2019年12月12日GET-AN2019004CN