鱼肉中孔雀石绿检测方案(旋涡混合器)

兽残篇www.biocomma.cnn103 分子印迹固相萃取-高效液相色谱法检测鱼肉中孔雀石绿 一、样品提取 流速：：11.2 mL/min 鱼去鳞、皮，沿背脊取肌肉，粉碎均匀后，取鱼肉试样2g(精确至0.01g)，加入2g NaCl， 再加入 15 mL 70%乙腈水，涡旋震荡10 min， 超声提取10 min，以10000 r/min转速离心5 min， 移取全部上清液至离心管中；将所得的上清液中加入等体积的去离子水，混匀，作为待净化液。 柱温：30℃ 进样量：20匹 四、实验结果 表1鱼肉中孔雀石绿加标回收实验结果 二、样品净化 活化：依次用3mL乙腈和3mL去离子水平衡 MISPE 柱；上样和淋洗，移取所得样品提取液过柱，再用3.0 mL的水淋洗，弃去淋洗液； 目标物 加标水平 (Hg/g) 回收率/(%)(n=3) 平均回收率(%) RSD (%) 孔雀石绿 0.100 87.2 89.0 89.5 88.6 1.11 0.200 87.8 87.4 88.5 87.9 0.517 0.500 85.0 84.6 85.8 85.1 0.586 3.00 洗脱：用3.0mL甲醇-乙酸(9：1，V/V)洗脱，收集洗脱 -孔蜜石绿-10.2802.50-液；重新溶解：洗脱液经氮吹浓缩至近干，用1.0mL乙腈 20D-1.50-溶解，过0.45Hm有机滤膜，进行上机测定。100-注0.50-：整个过程控制流速不要超过1 mL/min。0.00三、仪器条件 -050--1.0D-液相色谱条件 -1.50-仪器： UltiMate 3000 (Thermofisher Scientific) -2.00--2.50-色谱柱： Agilent C18 (4.6 mm×250 mm， 5 Hm) -3.00-流动相：乙腈：50mM乙酸铵(0.1%乙酸)=60：40 -350-检测波长：620nm4.0 5.0 60 70 8.0 9.0 100图1鱼肉品加标(0.500 Hg/g)的色谱图 货号 描述 包装 COMG3200 Copure@ 孔雀石绿分子印迹柱，3mL 30支/盒 SDC-3000 多管涡旋混匀仪 1台/箱 SF130-22-PTFE PTFE 针式过滤器，直径13 mm， 孔径0.22 Hm， 有机系 100个/盒 SC2-1 2 mL 蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫， 9-425 100个/盒 V2-AL 2mL螺纹棕色样品瓶，带书写处 11.6*32 mm， 9-425 100个/盒 一、样品提取 鱼去鳞、皮，沿背脊取肌肉，粉碎均匀后，取鱼肉试样 2 g( 精确至 0.01g)，加入 2 g NaCl，再加入 15 mL 70% 乙 腈水，涡旋震荡 10 min，超声提取 10 min，以 10000 r/ min 转速离心 5 min，移取全部上清液至离心管中；将所得 的上清液中加入等体积的去离子水，混匀，作为待净化液。 二、样品净化 活化：依次用 3 mL 乙腈和 3 mL 去离子水平衡 MISPE 柱； 上样和淋洗，移取所得样品提取液过柱，再用 3.0 mL 的水 淋洗，弃去淋洗液； 洗脱：用 3.0 mL 甲醇 - 乙酸（9:1，V/V）洗脱，收集洗脱 液；重新溶解：洗脱液经氮吹浓缩至近干，用 1.0 mL 乙腈 溶解，过 0.45 µm 有机滤膜，进行上机测定。 注：整个过程控制流速不要超过 1 mL/min。 三、仪器条件 液相色谱条件 仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific） 色谱柱：Agilent C18 (4.6 mm×250 mm，5 µm) 流动相：乙腈：50mM 乙酸铵 (0.1% 乙酸 )=60:40 检测波长：620 nm流速：1.2 mL/min 柱温：30℃ 进样量：20 µL四、实验结果 表 1 鱼肉中孔雀石绿加标回收实验结果