化妆品中禁用物质贝美格检测方案(液相色谱仪)

文件号：FLYQ-AD-FA-01浙江福立分析仪器股份有限公司成都应用中心 化妆品中禁用物质贝美格的测定高效液相色谱法 分析报告 一、参考标准 依据国家标准《GB/T 40898-2021化妆品中禁用物质贝美格及其盐类的测定高效液相色谱法》 二、方法介绍 试样经溶剂超声提取，离心过滤后，以高效液相色谱进行测定，根据保留时间定性，外标法定量。 三、试剂和材料 3.1试剂 3.1.1水：哇哈哈饮用纯净水。 3.1.2甲醇：色谱纯。 3.1.3氯化钠：分析纯。 3.1.4贝美格标准品： CAS 64-65-3，纯度98%，有证书。 3.2仪器设备 3.2.1高效液相色谱仪：福立LC5090 高效液相色谱仪，配备 LC5090 在线脱气机、LC5090二元高压输液泵、LC5090 自动进样器、LC5090 柱温箱、LC5090紫外检测器。 3.2.2色谱柱： Sunniest C18柱， 4.60 mm*250mm， 粒径为5.0um。 3.2.3分析天平：精度0.0001g。 3.2.4 15 mL具塞比色管。 3.2.550mL塑料离心管。 3.2.6高速离心机。 3.2.7微孔滤膜：0.45um，有机相。 四、溶液配制 4.1标准溶液配制 4.1.1贝美格标准储备溶液：称取贝美格标准物质(3.1.4)10 mg，精确至0.1 mg， 置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，配制成浓度为 100 mg/L的标准储备液，于4℃避光保存，有效期三个月。 4.1.2标准曲线绘制：用甲醇将贝美格标准储备液(4.1.1)逐级稀释成浓度为 0.5 mg/L、1.0mg/L、2.0 mg/L、5.0 mg/L、10 mg/L的系列标准工作溶液，1供高效液相色谱测定。 4.2样品溶液配制 4.2.1乳液和膏霜类样品 称取1g(精确到0.001g)试样置于15mL具塞比色管中，加入甲醇并定容至刻度，再加入2g氯化钠进行破乳，摇匀，超声提取 20 min， 将样液转移至塑料离心管中，5000 r/min离心15 min， 上清液经0.45 um过滤，待测。 4.2.2水制类样品 称取1g(精确到0.001g) 试样置于15mL具塞比色管中，加入甲醇并定容至刻度，摇匀，超声提取20 min， 将样液转移至塑料离心管中， 5000 r/min 离心 15 min， 上清液经0.45 um 过滤，待测。 五、分析结果 5.1试剂空白 图1 贝美格试剂空白谱图 5.2贝美格标准溶液典型谱图及结果 地址：四川省成都市成华区成致路50号3栋2单元3楼 邮编： 610052 图2 1美美格标准溶液普谱图图(5 ug/mL) 1、贝美格 分析结果表 峰序 组分名 保留时间[min] 峰高[uAU] 峰面积[uAU*s] 1 贝美格 5.691 24599.7 216288.5 系统评价表 峰序 组分名 保留时间[min] 半峰高宽「uAU1 理论塔板 理论塔板/米 拖尾因子 1 贝美格 5.691 0.13626 9663 38650 1.090 5.3重复性实验 邮编： 610052 图3 贝美格标准溶液重复性谱图(5 ug/mL) 峰序 组分名 保留时间平均值[min1 保留时 间RSD%] 面积平均值[uAU*s] 面积RSD91 峰高平均值[uAU] 峰高RSD%] 谱图数 1 贝美格 5.687 0.060 215553.0 0.410 24530.8 0.273 6 5.4标准曲线 分别将一系列不同浓度的贝美格标准工作溶液(4.1.2)各10 uL， 进行 HPLC分析。然后以峰面积为纵坐标，以含量为横坐标，绘制标准曲线。 5.4.1贝美格标准曲线方程及相关系数 组分[贝美格]：曲线方程： Ci =2.20854E-005*Ai 校正因子： f0=0，fl=2.20854E-005 相关系数： r^2=0.99981 5.5检出限 5.5.1贝美格标准溶液(0.5 ug/mL))七针重复性谱图 图4贝美格标准溶液重复性谱图(0.5 ug/mL) 组分名 平均时间[min] 时间RSD[%] 平均面积fuAU*s 面积RSD 平均峰高[uAU1 峰高RSD%1 平均含量[ug/mL] 含量RSD%] 谱图数 贝美格 5.678 0.029 23765.5 0.448 2700.5 0.220 0.4437 0.561 7 5.5.2贝美格检出限结果 以取样1.0g计，本方法的检出限、定量限如下表所示： 组分名 含量 [ug/mL] 含量 [ug/mL] 含量 [ug/mL] 含量 [ug/mL] 含量 [ug/mL] 含量 [ug/mL] 含量 [ug/mL]| 检出限[mg/kg] 定量限[mg/kg] 贝美格 0.4468 0.4423 0.4468 0.4442 0.4419 0.4402 0.4434 0.0787 0.787 5.6乳液类样品中贝美格谱图及回收率结果 5.6.1贝美格试样空白 图5贝美格试样空白谱图 5.6.2贝美格样品谱图及结果 图6 贝美格样品谱图 5.6.3乳液类样品加标贝美格(100mg/kg)谱图及回收率结果 邮编： 610052 图7 乳液类样品中加标贝美格(100mg/kg)谱图 分析结果表1 峰序 组分名 保留时间minl 峰高uAUT 峰面积「uAU*sl 含量 [mg/kg] 1 贝美格 5.688 49327.2 415747.4 91.8195 分析结果表2 峰序 组分名 保留时间[minl 峰高uAUT 峰面积uAU*sl 含量 [mg/kg] 1 贝美格 5.687 51217.2 429404.7 94.8357 分析结果表3 峰序 组分名 保留时间min 峰高uAUl 峰面积[uAU*s1 含量 [mg/kg] 1 贝美格 5.687 51751.7 436259.1 96.3496 样品中的贝美格(mg/kg) 试样空白(mg/kg) 加标量(mg/kg) 测定值(mg/kg) 加标回收(%) 相对标准偏差(%) 加标回收率范围(%) 0 0 100 91.82 91.82 2.45 91.82-96.35 94.84 94.84 96.35 96.35 注：添加浓度为100mg/kg， 回收率在 91.82%-96.35%之间，相对标准偏差为2.45%，符合回收率在87.6%-105.8%之间的要求。 5.7膏霜类样品中贝美格谱图及回收率结果 5.7.1贝美格试样空白 邮编： 610052 图8贝美格试样空白谱图 5.7.2贝美格样品谱图及结果 图9 贝美格样品谱图 5.7.3膏霜类样品加标贝美格(100 mg/kg)谱图及回收率结果 图10 膏霜类样品中加标贝美格(100 mg/kg)谱图 分析结果表1 峰序 组分名 保留时间minl 峰高uAUT 峰面积「uAU*sl 含量[mg/kg] 1 贝美格 5.679 54747.0 468421.8 103.4528 分析结果表2 峰序 组分名 保留时间minl 峰高uAUl 峰面积「uAU*s1 含量[mg/kg] 1 贝美格 5.679 53997.9 459520.8 101.4780 分析结果表3 邮编： 610052 峰序 组分名 保留时间minl 峰高「uAUl 峰面积「uAU*s 含量 [mg/kg] 1 贝美格 5.680 53212.3 452830.5 100.0094 样品中的贝美格(mg/kg) 试样空白(mg/kg) 加标量(mg/kg) 测定值(mg/kg) 加标回收(%) 相对标准偏差(%) 加标回收率范围(%) 0 0 100 103.45 103.45 1.70 100.01-103.45 101.48 101.48 100.01 100.01 注：添加浓度为100 mg/kg，回收率在100.01%-103.45%之间，相对标准偏差为1.70%，符合回收率在87.6%-105.8%之间的要求。 5.8水制类样品中贝美格谱图及回收率结果 5.8.1贝美格试样空白 图11 贝美格试样空白谱图 5.8.2贝美格样品谱图及结果 图12贝美格样品谱图 5.8.3水制类样品加标贝美格(100 mg/kg)谱图及回收率结果 图13水制类样品中加标贝美格(100 mg/kg)谱图 分析结果表1 峰序 组分名 保留时间minl 峰高 [uAUl 峰面积uAU*s 含量 [mg/kg] 1 贝美格 5.679 54464.2 460752.8 101.7591 分析结果表2 峰序 组分名 保留时间min1 峰高[uAU1 峰面积「uAU*sl 含量 [mg/kg] 1 贝美格 5.679 54625.7 461624.1 101.9515 分析结果表3 峰序 组分名 保留时间minl 峰高uAUl 峰面积fuAU*sl 含量 [mg/kg] 1 贝美格 5.677 52880.2 446712.7 98.6583 地址：四川省成都市成华区成致路50号3栋2单元3楼 邮编： 610052 样品中的贝美格(mg/kg) 试样空白(mg/kg) 加标量(mg/kg) 测定值(mg/kg) 加标回收(%) 相对标准偏差(%) 加标回收率范围(%) 0 0 100 101.76 101.76 1.83 98.66-101.95 101.95 101.95 98.66 98.66 注：添加浓度为100 mg/kg， 回收率在98.66%-101.95%之间，相对标准偏差为1.83%，符合回收率在87.6%-105.8%之间的要求。 六、实验结果 方法评价 组分名 保留时间/min 检出限(mg/kg) 定量限mg/kg) 峰面积RSD% 线性相关系数 加标回收率(%) 贝美格 5.678 0.0787 0.787 0.410 0.999 91.82-103.45 由以上实验结果可知，本方法符合GB/T 40898-2021《化妆品中禁用物质贝美格及其盐类的测定高效液相色谱法》的要求。 邮编： 址：川省成都市成华区成致路元楼 贝美格及其盐类可导致人体产生幻视、幻听以及精神错乱等不良反应在《化妆品安全技术规范（2015年版）》中规定其为禁用原料。2022年6月1日起即将实施的国家标准GB/T 40898-2021《 化妆品中禁用物质贝美格及其盐类的测定 高效液相色谱法》首次规定了物质的检测方法，为化妆品质量安全提供了科学保障，也为消费者提供了健康保障。本方案参考GB/T 40898-2021，分别对膏霜类、乳液类、水制类化妆品进行了检测，部分结果如下：5μg/mL贝美格标样谱图膏霜化妆品分析谱图乳液化妆品分析谱图水制类化妆品分析谱图