右旋糖苷70中分子量分布检测方案

采用 TSKgel G4000PWxL参考2020年版中国药典分离右旋糖苷70 右旋糖苷70 (Dextran 70) 【基本信息】 右旋糖苷70系蔗糖经肠膜状明串珠菌 L.-M-1226 号菌(Leuconostoc mesenteroides)发酵后生成的高分子葡萄糖聚合物，经处理精制而得。右旋糖酐70可抑制血小板的粘附作用，而具有抗栓作用。可用于弥漫性血管内凝血、微循环血栓、栓塞性血小板减少性紫癜。药典规定，右旋糖酐70的重均分子量(Mw)为64000~76000。10%大分子部分重均分子量不得大于185000，10%小分子部分重均分子量不得小于 15000. 【分析条件】 仪器： HLC-8220 凝胶色谱仪 色谱柱： TSKgel G4000PWXL (I.D. 7.8 mm×30 cm， 10 pm) 流动相： 0.71% Na2SO4 流速： 0.5 mL/min 样品浓度：10mg/mL 进样体积：20 pL 柱温： 35℃ 检测器： RI 【分析结果】 [mV] 图1右旋糖苷70溶液色谱图 [mV] 图2葡萄糖溶液色谱图 图3葡聚糖2000溶液色谱图 图4右旋糖苷校正曲线 表1右旋糖酐70分子量计算结果 Mw 10%大分子部分分子量 Mw 10%小分子部分分子量Mw 70718 153496 25440 【结果与讨论】 参考2020年版中国药典方法方，采用 TSKgel G4000PWxL分析右旋糖酐70样品谱图见图1，右旋糖酐70出峰时间范围(起点12.9 min~终点19.02 min) 在葡聚糖2000保留时间 (to=10.367 min，见图3)与葡萄糖保留时间 (tr=20.697 min， 见图2)与之间，色谱柱理论塔板数 TP 按葡萄糖峰计算，结果为13756(TP>5000)，以上结果满足药典规定系统适用性要求。 采用右旋糖苷标准品(D-4K 4300， D-7K 7200， D-16K 16230， D-40K 39900， D-60K 60300， D-215K214800)作右旋糖苷校正曲线，见图4，对图1右旋糖酐70样品进行分子量计算，结果见表1：样品分子量计算结果为： Mw 70718，符合药典规定分子量范围 (Mw 64000~76000)，10%大分子部分分子量 Mw结果为：153496，10%小分子部分分子量 Mw 结果为：25440，符合药典规定要求(10%大分子部分重均分子量不得大于185000，10%小分子部分重均分子量不得小于15000)。 以上结果表明： TSKgel G4000PWxL色谱柱满足2020年版中国药典对右旋糖酐70样品分子量与分子量分布的测试要求。 ( 【参考资料】 ) ( 1. 《中国药典》2020年版第二 部 P205 ) 本应用是参考2020年版中国药典方法，采用尺寸排阻色谱柱TSKgel G4000PWXL（I.D. 7.8 mm×30 cm, 10 μm）分析右旋糖酐70，色谱柱理论塔板数TP按葡萄糖峰计算，结果为13756（TP＞5000），并采用右旋糖苷标准品作右旋糖苷校正曲线，样品分子量计算结果为： Mw 70718，符合药典规定分子量范围（Mw 64000~76000），10%大分子部分分子量 Mw 结果为：153496，10%小分子部分分子量Mw结果为：25440。以上结果表明：TSKgel G4000PWXL色谱柱满足2020版中国药典对右旋糖苷70样品分子量与分子量分布的测试要求。